Скрининг и определение пентациклических тритерпеноидов в растительном сырье хроматографическими и масс-спектрометрическими методами Фалёв Данил Иванович

Краткое описание

Фалёв, Данил Иванович.
Скрининг и определение пентациклических тритерпеноидов в растительном сырье хроматографическими и масс-спектрометрическими методами : диссертация ... кандидата химических наук : 02.00.02 / Фалёв Данил Иванович; [Место защиты: ФГБОУ ВО «Кубанский государственный университет»]. - Архангельск, 2020. - 123 с. : ил.
Оглавление диссертациикандидат наук Фалёв Данил Иванович
ВВЕДЕНИЕ........................................................................................................................7
1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ............................................................................................12
1.1 Общие сведения о пентациклических тритерпеноидах...................................12
1.2 Методы экстракции пентациклических тритерпеноидов из растительного сырья................................................................................................................................14
1.2.1. Традиционные методы экстракции......................................................................15
1.2.2. Ультразвуковая экстракция (УЗЭ).......................................................................16
1.2.3. Микроволновая экстракция (МВЭ).....................................................................18
1.2.4. Сверхкритическая флюидная экстракция (СКФЭ)............................................19
1.2.5. Жидкостная экстракция под давлением (ЖЭД).................................................20
1.3 Методы определения пентациклических тритерпеноидов.............................22
1.3.1 Методы газовой хроматографии...........................................................................22
1.3.2 Методы жидкостной хроматографии...................................................................24
1.3.3 Особенности разделения ПЦТТ в ВЭЖХ............................................................27
1.3.4 Скрининг и идентификация ПЦТТ.......................................................................29
2. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ.......................................................................31
2.1 Оборудование...........................................................................................................31
2.2 Реагенты и материалы...........................................................................................32
2.3 Растительное сырье................................................................................................34
2.4 Экстракция ПЦТТ из растительного сырья......................................................34
2.5 Характеристика компонентного состава субкритических экстрактов........35
2.6 Определение ПЦТТ методами ВЭЖХ-МС и ВЭЖХ-МС/МС.........................36
2.7 Скрининг ПЦТТ в растительном сырье методом ВЭЖХ-МС/МС в режиме сканирования ионов-предшественников..................................................................37
2.8 Скрининг ПЦТТ методом МАЛДИ-МС.............................................................38
3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ.................................................................39
3.1 Разработка способа жидкостной экстракции ПЦТТ из растительного сырья
...........................................................................................................................................39
3.2 Характеристика субкритических экстрактов коры березы...........................44
3.3 Разработка подхода к определению ПЦТТ в коре березы методом обращенно-фазовой ВЭЖХ - тандемной масс-спектрометрии............................50
3.3.1 Выбор метода ионизации.......................................................................................50
3.3.2 Оптимизация параметров ионного источника.....................................................51
3.3.3 Диссоциация тритерпеноидов, активированная соударениями........................52
3.3.4 Оптимизация условий хроматографического разделения..................................53
3.3.5 Анализ субкритического экстракта коры березы................................................56
3.4 Определение широкого круга ПЦТТ методом обращенно-фазовой ВЭЖХ -тандемной масс-спектрометрии.................................................................................57
3.4.1 Масс-спектры ПЦТТ..............................................................................................60
3.4.2 Хроматографическое разделение ПЦТТ на неподвижной фазе Nucleodur C18 Isis......................................................................................................................................62
3.4.3 Метрологическая характеристика и валидация методики определения ПЦТТ в растительном сырье методом ОФ ВЭЖХ-МС/МС......................................................64
3.4.4 Анализ биомассы растений...................................................................................67
3.5 Применение неподвижной фазы со смешанным механизмом удерживания для определения ПЦТТ методом ВЭЖХ-МС/МС...................................................72
3.5.1 Влияние состава подвижной фазы........................................................................74
3.5.2 Влияние рН и ионной силы подвижной фазы.....................................................77
3.5.3 Оптимальные условия хроматографического разделения.................................79
3.5.4 Метрологическая характеристика и валидация методики.................................81
3.5.5 Анализ биомассы растений...................................................................................85
3.6 Скрининг тритерпеноидов в растительном сырье методом ВЭЖХ-МС/МС в режиме сканирования ионов-предшественников................................88
3.6.1 Выбор иона-продукта.............................................................................................88
3.6.2 Сканирование ионов-предшественников ПЦТТ в экстрактах растений..........89
3.6.3 Определение ПЦТТ методом ВЭЖХ-МС/МС в режиме СИП с применением стандартных образцов.....................................................................................................93
3.6.4 Полуколичественное бесстандартное определение ПЦТТ................................97
3.7 Быстрый скрининг ПЦТТ в растительном сырье методом масс-спектрометрии МАЛДИ.............................................................................................100
3.7.1 Характеристика масс-спектров МАЛДИ пентациклических тритерпеноидов .........................................................................................................................................100
3.7.2 Полуколичественное определение ПЦТТ методом МАЛДИ-МС...................103
3.7.3 Анализ экстрактов растительного сырья...........................................................104
ВЫВОДЫ......................................................................................................................108
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ ИСТОЧНИКОВ..............................................110