ВИВЧЕННЯ ЗВ’ЯЗКУ «СТРУКТУРА-ДІЯ» ПРОТИТУБЕРКУЛЬОЗНИХ ЗАСОБІВ – ПОХІДНИХ α-, β-, γ-ПІРИДИНКАРБОНОВИХ КИСЛОТ МЕТОДАМИ КВАНТОВОЇ ХІМІЇ

Краткое описание

МІНІСТЕРСТВО ОХОРОНИ ЗДОРОВ’Я УКРАЇНИ
ЛЬВІВСЬКИЙ НАЦІОНАЛЬНИЙ МЕДИЧНИЙ УНІВЕРСИТЕТ
імені ДАНИЛА ГАЛИЦЬКОГО

На правах рукопису

Д Р А П А К
Ірина Володимирівна

УДК 615.211:616-002.5]:[547.821:547.29].015.11.015.1/.11

ВИВЧЕННЯ ЗВ’ЯЗКУ «СТРУКТУРА-ДІЯ» ПРОТИТУБЕРКУЛЬОЗНИХ ЗАСОБІВ ПОХІДНИХ α-, β-, γ-ПІРИДИНКАРБОНОВИХ КИСЛОТ МЕТОДАМИ КВАНТОВОЇ ХІМІЇ

15.00.02 фармацевтична хімія та фармакогнозія

Дисертація
на здобуття наукового ступеня
кандидата фармацевтичних наук

Науковий керівник
ЗІМЕНКОВСЬКИЙ БОРИС СЕМЕНОВИЧ
доктор фармацевтичних наук,
професор, академік АН ВО України

Львів - 2008

ЗМІСТ
стор.
ВСТУП..4
РОЗДІЛ 1
Протитуберкульозні засоби: проблеми та перспективи (огляд літератури)..9
1.1. Актуальні проблеми лікування туберкульозу.9
1.2. Хіміотерапевтичні засоби для лікування туберкульозу...10
1.2.1. Хімічна будова, механізми дії та побічні ефекти протитуберкульозних засобів.10
1.2.2. Сучасна класифікація протитуберкульозних засобів21
1.3. Характеристика та молекулярні механізми дії похідних α-, β-, γ- піридинкарбонових кислот..23
1.4. Сучасні тенденції синтезу протитуберкульозних засобів похідних піридинкарбонових кислот, підвищення їх активності та зниження побічних ефектів..32
РОЗДІЛ 2
Об’єкти та методи дослідження.36
2.1. Характеристика об’єктів дослідження.36
2.1.1. Хімічна будова протитуберкульозних засобів похідних α-, β-, γ- піридинкарбонових кислот.36
2.1.2. Протитуберкульозна активність досліджуваних сполук.41
2.2. Характеристика методів дослідження43
2.2.1. Загальна характеристика методів квантової хімії43
2.2.2. QSAR-аналіз.47
РОЗДІЛ 3
Розрахунок дескрипторів молекулярної структури похідних α-, β-, γ- піридинкарбонових кислот..53
3.1. Класифікація та загальна характеристика дескрипторів молекулярної структури53
3.2. Визначення електронних та електростатичних дескрипторів похідних піридинкарбонових кислот55
3.3. Визначення стеричних та геометричних параметрів похідних піридинкарбонових кислот.58
3.4. Розрахунок енергетичних параметрів та параметрів, що характеризують атомні орбіталі досліджуваних сполук.60
3.5. Конституційні та топологічні дескриптори похідних піридинкарбонових сполук65
3.6. Прогнозування параметру ліпофільності досліджуваних сполук з допомогою комп’ютерних програм67
3.7. Висновки...74
РОЗДІЛ 4
Вивчення зв’язку структура дія”, докінг, ВІРТУАЛЬНИЙ СКРИНІНГ та Комп’ютерне прогнозування протитуберкульозної активності похідних піридинкарбонових кислот...75
4.1. QSAR-аналіз похідних α-, β-, γ- піридинкарбонових кислот.75
4.1.1. Вивчення залежності структура активність” в ряду гідразонів ізонікотинової кислоти75
4.1.2. QSARаналіз похідних піридинкарбонових кислот як протитуберкульозних агентів.86
4.2. Докінгові дослідження похідних піридинкарбонових кислот...90
4.2.1. Докінг похідних піридинкарбонових кислот з протитуберкульозними мішенями90
4.2.2. Кореляція результатів докінгових досліджень з величинами протитуберкульозної активності...93
4.3. Віртуальний скринінг та комп’ютерне прогнозування гіпотетичних похідних піридинкарбонових кислот94
4.4. Висновки...100
РОЗДІЛ 5
Синтез та фармакологічний скринінг похідних піридинкарбонових кислот.102
5.1. Синтез похідних піридинкарбонових кислот з найбільшою прогнозованою протитуберкульозною активністю.102
5.2. Експериментальне дослідження ліпофільності нових похідних піридинкарбонових кислот та кореляція одержаних результатів з прогнозованими значеннями..108
5.3. Протитуберкульозна активність синтезованих сполук124
5.3.1. Дослідження протитуберкульозної активності синтезованих сполук in vitro124
5.3.2. Порівняння прогнозованої та експериментальної протитуберкульозної активності синтезованих сполук...128
5.4. Гостра токсичність синтезованих сполук..129
5.5. Висновки...131
ЗАГАЛЬНІ ВИСНОВКИ132
СПИСОК ВИКОРИСТАНИХ ДЖЕРЕЛ...135
ДОДАТКИ169

ВСТУП

Актуальність теми. Синтез та систематичний пошук нових біологічно активних речовин є одним з головних завдань органічної та фармацевтичної хімії. Це дуже об’ємний, вартісний та довгий процес. За даними досліджень Lehrman Brothers Pharmaceutical Research співвідношення між синтезованими сполуками і сполуками, що стають лікарськими засобами становить 10000:1. Час від початку синтезу до впровадження на ринок займає 10-15 років, при цьому витрати на один лікарський засіб складають близько мільярда доларів. Розвиток комп’ютерної техніки, молекулярної фармакології, квантової хімії привів до нової концепції створення ліків цілеспрямованого синтезу із застосуванням новітніх технологій (віртуальний скринінг, QSAR-аналіз, дослідження in silico, комп’ютерне моделювання та прогнозування, молекулярний докінг). Це дозволяє прогнозувати шляхи синтезу нових, більш ефективних лікарських засобів та передбачати активність ще несинтезованих сполук.
Актуальність пошуку протитуберкульозних засобів обумовлена різким зростанням туберкульозу та появою резистентних мікобактерій до відомих протитуберкульозних засобів. ВООЗ оголосила туберкульоз хворобою глобального масштабу. Згідно з світовою статистикою щорік в усьому світі від туберкульозу помирає більше 2 млн. людей. В Україні, починаючи з 1995 р., зареєстрована епідемія туберкульозу, яка невпинно прогресує та набуває масштабів пандемії. Особливо загрозливим є ріст захворюваності та смертності (щогодини в Україні захворює 4 людини, з яких одна помирає), а також зміна структури захворювання, постійне збільшення мультирезистентних форм збудника, обмежений вибір протитуберкульозних засобів, небажані побічні реакції, що спостерігаються при довготривалій фармакотерапії. У зв’язку з цим в Україні у 2001 р. була прийнята Національна програма боротьби з туберкульозом та Загальнодержавна програма протидії захворюванню на туберкульоз у 2007-2011роках.
Одними з найефективніших лікарських засобів в терапії туберкульозу є похідні γ піридинкарбонової (ізонікотинової) кислоти, але їм характерні ряд недоліків: висока гепато- та невротоксичність, погіршення гостроти зору, алергічні реакції, резистентність мікобактерій та ін. Однак, за останні більше ніж 50 років не було синтезовано ні одного препарату, який би проявляв більшу терапевтичну активність, ніж ізоніазид. Тому актуальним є пошук нових засобів цієї групи, які б мали високу протитуберкульозну активність при нижчій токсичності та відсутності інших побічних ефектів. Також перспективним є пошук протитуберкульозних агентів похідних α піридинкарбонової (піколінової) кислоти, так як встановлений зовсім інший механізм протитуберкульозної дії, виявлена ефективність при мультирезистентному туберкульозі, туберкульозі, викликаному Mycobacterium avium сomplex, який не піддається лікуванню відомими протитуберкульозними засобами, та туберкульозі поєднаному з імунодефіцитом. Встановлена також протитуберкульозна активність похідних β піридинкарбонової (нікотинової) кислоти.
Зв'язок роботи з науковими програмами, планами, темами. Дисертаційна робота виконана згідно з планом проблеми «Фармація» МОЗ України і є фрагментом комплексної науково-дослідної роботи Львівського національного медичного університету імені Данила Галицького (державна реєстрація № 0101U009227, шифр теми ІН 10.06.0001.01).
Мета і завдання дослідження. Метою даної роботи було виявлення загальних закономірностей залежності активності протитуберкульозних засобів похідних α-, β-, γ- піридинкарбонових кислот від електронно-просторової будови їх молекул, а також визначення на основі виявлених закономірностей подальших тенденцій цілеспрямованого синтезу нових протитуберкульозних сполук.
Для досягнення цієї мети були поставлені наступні завдання:
· методами квантової хімії, за допомогою сучасних комп’ютерних програм провести моделювання електронно-просторової будови молекул похідних піридинкарбонових кислот та розрахувати молекулярні дескриптори;
· провести QSAR-аналіз і виявити закономірності зв’язку «структура-дія» похідних α-, β-, γ-піридинкарбонових кислот;
· здійснити докінгові дослідження до протитуберкульозних біомішеней;
· на основі даних квантово-хімічних розрахунків, QSAR-аналізу та докінгу провести віртуальний скринінг та комп’ютерне прогнозування протитуберкульозної активності гіпотетичних структур похідних піридинкарбонових кислот;
· синтезувати сполуки з найбільшою прогнозованою протитуберкульозною активністю; структуру синтезованих сполук підтвердити сучасними фізико-хімічними методами аналізу;
· провести експериментальне дослідження ліпофільності нових похідних піридинкарбонових кислот та порівняти одержані результати з прогнозованими значеннями за допомогою комп’ютерних програм;
· дослідити протитуберкульозну активність синтезованих сполук;
· вивчити гостру токсичність синтезованих сполук;
· на основі одержаних результатів зробити висновки про подальші фармакологічні дослідження найперспективніших із синтезованих сполук.
Об’єкти дослідження: похідні α-,β-,γ-піридинкарбонових кислот.
Предметом дослідження стало встановлення зв’язку між молекулярною структурою та протитуберкульозною активністю похідних α-, β-, γ- піридинкарбонових кислот, а також визначення на основі виявлених закономірностей подальших тенденцій цілеспрямованого синтезу, молекулярний докінг, віртуальний скринінг та комп’ютерне прогнозування протитуберкульозної активності віртуальних похідних α-, β-, γ- піридинкарбонових кислот, синтез сполук з найбільшою прогнозованою активністю, дослідження активності та токсичності одержаних сполук, відбір високоактивних, малотоксичних сполук для їх поглибленого вивчення як потенційних протитуберкульозних лікарських засобів.
Методи дослідження: напівемпіричні квантово-хімічні методи, QSAR-аналіз, докінгові дослідження, органічний синтез, спектральні методи аналізу (ПМР-спектроскопія), елементний аналіз, високоефективна рідинна хроматографія, фармакологічний скринінг.
Наукова новизна одержаних результатів. Розроблено для досліджень загальну методологію та схему аналізу залежності протитуберкульозної активності похідних α-, β-, γ- піридинкарбонових кислот від електронно-просторової структури їх молекул методами квантової хімії за допомогою сучасних комп'ютерних програм. На основі модифікації найперспективніших молекул, враховуючи кореляційні закономірності QSAR-аналізу, докінгу, віртуального скринінгу, комп’ютерного прогнозування здійснено цілеспрямований синтез нових протитуберкульозних сполук похідних α-, β-, γ- піридинкарбонових кислот, виділено найактивніші речовини для проведення поглиблених фармакологічних досліджень. Наукова новизна роботи підтверджена патентами України на корисну модель №34079 (2008 р.), №34785 (2008 р.).
Практичне значення одержаних результатів. Розроблена схема розрахунку параметрів електронно-просторової будови молекул, QSAR-аналізу, молекулярного докінгу, комп’ютерного моделювання та прогнозування протитуберкульозної активності похідних α-, β-, γ- піридинкарбонових кислот послужить основою для розробки напрямків цілеспрямованого створення нових протитуберкульозних засобів. Нові високоактивні сполуки запропоновано для поглиблених доклінічних досліджень. Фрагменти роботи впроваджено в науковий та навчально-методичний процеси Національного фармацевтичного університету, Запорізького державного медичного університету, Національного університету «Львівська політехніка», Львівського національного медичного університету імені Данила Галицького (акти впровадження від 3.09.2008, 15.12.2006, 25.11.2007, 2.09.2008)
Особистий внесок здобувача. У ході виконання роботи автором реалізовано виконання експериментальної частини, узагальнення результатів та формулювання положень і висновків, які виносяться на захист. Співавторами наукових праць є науковий керівник, а також науковці, з якими проводились спільні дослідження.
Апробація результатів дослідження. Основні положення дисертаційної роботи доповідались на Десятій науковій конференції «Львівські хімічні читання2005» (Львів, 2005); Всеукраїнській науково-практичній конференції з міжнародною участю «Сучасні досягнення фармацевтичної науки та практики» (Запоріжжя, 2006); І Міжнародній науково-практичній конференції «Науково-технічний прогрес і оптимізація технологічних процесів створення лікарських препаратів» (Тернопіль, 2006), Науково-практичній конференції з міжнародною участю «Лекарства ­- человеку. Современные проблемы создания, исследования и апробации лекарственных средств» (Харків, 2007), Міжнародній науково-практичній конференції ­ «Сучасні проблеми хімії» (Київ, 2007), ІІІ Всеукраїнській конференції «Домбровські хімічні читання» (Тернопіль, 2007), Всеукраїнському конгресі «Сьогодення та майбутнє фармації» (Харків, 2008), національній науково-технічній конференції з міжнародною участю «Актуальні проблеми синтезу і створення нових біологічно активних сполук та фармацевтичних препаратів» (Львів, 2008), засіданні кафедр фармацевтичної, органічної і біоорганічної хімії та загальної, біонеорганічної і фізколоїдної хімії ЛНМУ імені Данила Галицького (Львів, 2008).

Публікації. За результатами дисертації опубліковано 15 наукових робіт, з яких 5 статей у наукових фахових виданнях, 8 тез доповідей, одержано 2 патенти на корисну модель.

Список литературы

ЗАГАЛЬНІ ВИСНОВКИ

1. Методами квантової хімії за допомогою сучасних комп’ютерних програм проведено квантово-хімічне моделювання електронно-просторової будови молекул похідних піридинкарбонових кислот та розраховано молекулярні дескриптори. Для дослідження були вибрані ті характеристики структури молекул, які, враховуючи можливі механізми протитуберкульозної дії, можуть мати найбільший вплив на протитуберкульозну активність похідних піридинкарбонових кислот,.
2. Проведено QSAR-аналіз і виявлено закономірності зв’язку «структура-дія» похідних α-, β-, γ-піридинкарбонових кислот. На основі побудованих моделей залежності протитуберкульозної активності від параметрів електронно-просторової структури молекул встановлено, що активність в досліджуваному ряду сполук зростає із зменшенням ефективного заряду на атомі кисню, збільшенням заряду на атомі азоту піридинового циклу, а також із зростанням відстаней між атомами кисню карбоксильної групи і азоту гідразидної групи та азоту піридинового циклу і азоту гідразидної групи. Крім того протитуберкульозна активність досліджуваних сполук залежить від значення енергій граничних молекулярних орбіталей та коефіцієнту розподілу вода-октанол logP, причому, активність сполук збільшується при зменшенні їх гідрофобності та енергій граничних молекулярних орбіталей.
3. На основі аналізу відомих механізмів дії протитуберкульозних засобів проведено докінгові дослідження до цитохром С пероксидази. Одержані дані підтверджують гіпотезу про першу ланку механізму протитуберкульозної дії похідних ГІНК через утворення активної форми ізоніазиду та його похідних, що на наступному етапі утворюють аддукти ізонікотиноїлгідразидного фрагменту з NAD, інгібуючи біосинтез міколевих кислот клітинної стінки та інших структурних компонентів мікобактерій. У результаті аналізу докінгових позицій сполук запропоновано можливі шляхи модифікації структури з метою покращення афінітету до мішені та підвищення протитуберкульозної активності.
4. На основі результатів квантово-хімічних розрахунків, QSAR-аналізу та докінгу був проведений віртуальний скринінг гіпотетичних похідних піридинкарбонових кислот. Ряд рівнянь залежності протитуберкульозної активності від докінгових функцій та молекулярних дескрипторів був використаний для попереднього прогнозування активності структурно подібних сполук. У результаті для цілеспрямованого синтезу та подальшого дослідження протитуберкульозної активності in vitro було відібрано 8 гіпотетичних сполук з найвищою прогнозованою протитуберкульозною активністю.
5. Здійснено цілеспрямований синтез сполук - похідних піридинкарбонових кислот з найбільшою прогнозованою протитуберкульозною активністю. Структуру синтезованих сполук підтверджено ПМР-спектроскопією та елементним аналізом.
6. Ліпофільність синтезованих похідних піридинкарбонових кислот визначена експериментально методом високоефективної рідинної хроматографії та спрогнозована за допомогою комп’ютерних програм. На основі статистичного аналізу рівнянь залежності між експериментальними та теоретичними даними встановлено найкращу прогнозуючу здатність програм Dragon та Chem Office для розрахунків значень logP, що може бути використано для передбачення ліпофільності потенційних біологічно активних сполук даної групи.
7. На підставі вивчення протитуберкульозної активності синтезованих сполук щодо мікобактерій туберкульозу штаму H37Rv та проведення дослідження їх гострої токсичності встановлено, що усі синтезовані сполуки, як і передбачалось, виявляють високу протитуберкульозну активність. Циклогексиліден- та циклопентиліденгідразиди ізонікотинової кислоти виявляють активність на рівні ізоніазиду. Однак, циклопентиліденгідразид ізонікотинової кислоти у 3 рази менш токсичний за ізоніазид і може бути рекомендований для поглиблених фармакологічних досліджень як потенційний протитуберкульозний препарат.
8. Синтезовані похідні піколінової кислоти менш активні за похідні ізонікотинової кислоти, проте циклопентиліден-гідразид піколінової кислоти може бути рекомендований для подальших досліджень, зважаючи на нижчу токсичність, порівняно з іншими похідними піколінової кислоти та ізоніазид і принципово інший механізм протитуберкульозної дії препаратів цієї групи, а отже можливу ефективність при мультирезистентному та неспецифічному туберкульозі.

СПИСОК ВИКОРИСТАНИХ ДЖЕРЕЛ
1. World Health Organization. Treatment of tuberculosis: guidelines for national programmes. Geneva, 1997. 220 р.
2. World Health Organization. Global Project on Anti-tuberculosis Drug Resistancе Surveillance. Anti-tuberculosis drug resistance in the world. Geneva, 1997. 217 p.
3. Yves L. Janin. Antituberculosis drugs: Ten years of research / Yves L. Janin // Bioorganic & Medicinal Chemistry. ­ 2007. ­ Vol.15. ­ P. 24792513.
4. Ying Zhang. Tuberculosis Drug Targets / Ying Zhang, L. Mario Amzel.// Current Drug Targets. ­ 2002. ­ Vol.3. ­ P. 131-154
5. Ken Duncan. Progress in TB drug development and what is still needed Tuberculosis. ­­ 2003. ­ Vol.­83. ­ P. 201207.
6. Закон України «Про затвердження Загальнодержавної програми протидії захворюванню на туберкульоз у 2007-2011роках» від 08.02.2007 №648-V // Відомості Верховної Ради України. ­ 2007. ­ №15. ­ С. 611.
7. Наказ МОЗ України № 384 від 09.06.2006 р. «Протокол надання медичної допомоги хворим на туберкульоз».
8. Наказ МОЗ України № 499 від 28.10.2003 р. «Про затвердження інструкцій щодо надання допомоги хворим на туберкульоз і неспецифічні захворювання легенів».
9. Фещенко Ю.І. Актуальні проблеми туберкульозу в Україні / Ю.І. Фещенко // Проблеми мед. науки та освіти. 2002. №4. С. 14-16.
10. Маркарян Е. Оценка контроля туберкулеза в Украине / Е. Маркарян // Провизор. 2000. №1. C. 48.
11. Фещенко Ю.І. Ефективність контролю за епідемією туберкульозу в Україні за період 1996-2001рр. / Ю.І. Фещенко, В.М. Мельник, В.Г. Матусевич [та ін] // Укр. пульмонолог. журн. 2003. №2(40). С. 386.
12. Садова Д.Т. Оценка влияния социально-экономических факторов на состояние заболеваемости туберкулезом населения Украины / Д.Т. Садова, О.Л. Гром. // Провизор. 2000. №22. С. 34-35.
13. Платонова І.Л. Показник захворюваності на легеневий туберкульоз із врахуванням фенотипічних ознак / І.Л. Платонова, М.І. Сахелашвілі, І.М. Стасюк [та ін] // Укр. пульмонолог. журн. 2003. №2(40). С. 308.
14. Вартанян Ф.Е. Туберкулез: проблемы и научные исследования в странах мира / Ф.Е. Вартанян, К.П. Шаховский // Проблемы туберкулеза. 2002. №1. С. 48-50.
15. Reichlin S. Pulmonary tuberculosis resistant to four antimycobacterial agents / S. Reichlin, R. Frei, P. Reusser // Schweizerische Medizinische Wochenschrift. 1998. Vol.128 (7). P. 264-267.
16. Фещенко Ю.І. Епідеміологія, діагностика та лікування хіміорезистентного туберкульозу органів дихання / Ю.І. Фещенко, В.М. Петренко, С.О. Черенько // Укр. пульмон. журн. №4. С.5-12.
17. Зозуляк В.І. Деякі особливості сучасного туберкульозу легень / В.І. Зозуляк, В.В. Вашлевич // Укр. пульмонолог. журн. 2003. №2(40). С. 184-185.
18. Мавров И.И. Современные проблемы туберкулеза кожи / И.И. Мавров, Я.Ф. Кутасевич Дерматологія та венерологія. 2003. №4(22). С. 3-9.
19. Тунгусова О.С. Молекулярные механизмы формирования лекарственной устойчивости микобактерий туберкулеза (обзор) / О.С. Тунгусова, А.О. Марьяндышев // Пробл. туберкул. 2001. №6. С. 48-49.
20. Morris S. Molecular mechanisms of multiple drug resistance in clinical isolates of Mycobacterium tuberculosis / S.Morris, G. H. Bai, P. Suffys [et al.] // J. Infect. Dis. ­1995. ­Vol.171. ­ P. 954960.
21. Николаева О.Д. Побочное действие химиопрепаратов у больных туберкулезом легких с сопутствующими заболеваниями / О.Д. Николаева // Лікарс. справа. 2003. №3/4. С. 74-78.
22. Проблема лікарської алергії у хворих на туберкульоз / Б.М. Пухлик, М.А. Тхоровський, І.М. Горбатюк, В.Б. Русанова. // Укр. пульмон. журн. 2002. №1. С. 47-51.
23. Петренко В.І. Епідеміологія туберкульозу / В.І. Петренко // Мистецтво лікування. 2003. №4(4). С. 42-46.
24. Савула М.М. Туберкульоз: Підручник./ М.М. Савула, О.Я. Ладний. Тернопіль: Укрмедкнига, 1998. 262 с.
25. Визель А.А. Туберкулез: Этиология. Патогенез. Клинические формы. Диагностика. Лечение. / А.А. Визель, М.Э. Гурылева. М: ГЭОТАР Медицина, 1999. 208 с.
26. Мельник В.М. Етіопатогенез, класифікація, діагностика і лікування легеневого та позалегеневого туберкульозу / В.М. Мельник // Мистецтво лікування. 2003. №4(4). С. 35-41.
27. Галинская Л.А. Туберкулез: лечение и профілактика / Л.А. Галинская. Ростов-на-Дону: Медицина для вас, 2000. 224 с.
28. Фещенко Ю.І. Сучасні методи діагностики, лікування і профілактики туберкульозу / Ю.І. Фещенко, В.М. Мельник. К.:Здоровя , 2002. 904 с.
29. Grunhage F. Tuberculosis Current therapeutic concepts / F. Grunhage, T. Sauerbruch, S. Spengler // Deutsche Medizinische Wochenschrift. 2005. Vol.130 (4). P. 159-164.
30. Greinert U. Tuberculosis-present therapeutic principals / U. Greinert, P. Zabel // Internist. 2003. Vol.44 (11). P. 1394-1399.
31. Сучасні концепції хіміотерапії туберкульозу / В.П. Костроміна, О.В. Деркач, О.О. Регкіна [та ін.] // Укр. пульмонолог. журн. 2003. №2(40). С. 96-97.
32. Мельник В. Сучасні протитуберкульозні засоби / В. Мельник // Вісник фармак. 2002. №8. С. 6-13.
33. Чучалин А.Г. Новое поколение противотуберкулезных препаратов / А.Г. Чучалин // Проблемы туберкулеза. 2000. №5. С. 6-8.
34. Schraufstatter E. Schwermetall komplex bildung und antibacterialle Wircung / E. Schraufstatter // Z. Naturforsch. 1950. Vol. 56. P.190-193.
35. Щукина М.Н. Химиотерапевтические препараты / М.Н. Щукина // Мед. пром. 1960. №4. С.13-25.
36. Машковский М.Д. Лекарственные средства: в 2-х т. / М.Д. Машковский. М.: Новая Волна, 2001. Т.1. 540 с.; Т.2. 608 с.
37. Мartin Negwer. Organic-chemical drugs and treir synonyms Academie-verlad Berlin. 1987 // http://organic.chemweb.com/negwer.
38. The Merck Index. 13 Edition. Merck & CO., Inc. Whitehouse Station, NJ. 2001. 1818 p.
39. Молекулярные механизмы устойчивости к рифампицину и изониазиду клинических штамов Mycobacterium tuberculosis / В.Н. Степанишина, Е.А. Панферцев, Г.Н. Митрофанова [и др.] // Пробл. туберкул. 2000. №1. С.32-36.
40. De La Iglesia A.I. Mechanisms of action of and resistance to rifampicin and isoniazid in Mycobacterium tuberculosis: new information on old friends / A.I. De La Iglesia, H.R. Morbidoni // Rev Argent Microbiol. 2006. Vol.38(2). Р. 97-109.
41. Молекулярная медицина и лечение туберкулеза / М.И. Перельман, Ю.Н. Хомяков, В.И. Кисилев [и др.] // Проблемы туберкулеза. 2001. №3. С. 5-7.
42. Chakrabarti Parul. Drug targets and drug resistance in mycobacteria / Chakrabarti Parul // Proc. Nat. Acad. Sci. India. 1997. Vol. 67. P. 169-179.
43. Middlebrook G. Sterilization of tubercle bacilli by isonicotinic acid hydrazide and the incidence of variants resistant to the drug in vitro / G. Middlebrook // Am. Rev. Tuberc. ­ 1952. ­ Vol. 65. ­ P. 765767.
44. Chemotherapy of experimental tuberculosis. V. Isonicotinic acid hydrazide (nydrazid) and related compounds. / J. Bernstein, B. Loot, B. Steinberg [et al.] // Am. Rev. Tuberc. 1952. Vol.65. P.357-364.
45. Youatt J. A review of the action of isoniazid / J. Youatt // Am. Rev. Respir. Dis. ­ 1969. ­ Vol.99. ­ P. 729749.
46. H. Herbert Fox, John T. Gibas. Synthetic tuberculostats V. Alkylidne derivatives of isonicotinylhydrazine / H. Herbert Fox, John T. Gibas // J. Org. Chem. 1953. Vol.18. P. 983-989.
47. H. Herbert Fox, John T. Gibas. Synthetic tuberculostats VII. Monoalkyl derivatives of isonicotinylhydrazine / H. Herbert Fox, John T. Gibas. // J. Org. Chem. 1953. Vol.339. P. 994-1002.
48. Chemotherapy of tuberculosis. III. Hydrazides and hydrazones Bull. // Libermann David; Rist Noel; Grumbach Francoise [et al.] // Soc. Chim. Fr. 1954. P. 1430-1434.
49. The tuberculostatic activity of hydrazine derivatives from pyridine carboxylic acids and carbonyl compounds // Offe Hans A.; Siefken W.; Domagk G. [et al.] // Zeitschrift fuer Naturforschung. 1952. Vol.7. P. 462-468.
50. Китаев Ю. П. Гидразоны / Ю. П. Китаев, Б. И. Бузыкин М.: Наука, 1974. 415 с.
51. Gilles Klopman. Computeraided study of relationship between structure and antituberculosis activity of isoniazid derivatives / Gilles Klopman, Dan Fercu, Jason Jacob // Chemical Physics. 1996. Vol. 204. P. 181-193.
52. Patent № 19943911 DE.A1 C12Q1/04 Einfache, schnelle und kulturunabhangige Methode zur Vorhersage von Isoniazid-Resistenzen bei Mycobacterien / Rinder Heinz, Zahler Monika, Loscher Thomas. /DE/ заявл. 14.09.1999; опубл. 10.05.2001. // Deutsches Patent- und Markenamt. 2001.
53. H. Herbert Fox. Synthetic tuberculostats VI. Some sugar derivatives of isonicotinylhydrazine / H. Herbert Fox //J. Org. Chem. 1953. Vol.18. P. 990-994.
54. Chemotherapy of experimental tuberculosis. VIII. The synthesis of acid hydrazides, their derivatives, and related compounds / Yale Harry L.; Losee Kathryn, Martins Joseph [et al.] // Journal of the American Chemical Society. 1953.­ Vol.75.­ P. 1933-1942.
55. Initial contribution to knowledge of the antitubercular activity of hydrazides / Carrara G.Chiancone, F. M. D'Amato V., Ginoulhiac E. [et al.] // Gazzetta Chimica Italiana. ­ 1952. ­ Vol.82.­ P. 652- 660.

56. Syntesis and antimicobacterial activity of some coupling products from 4- aminobenzoic acid hydrazones / Kuckuguzels Guniz, Rollas Sevim, Kuckuguzel Ilkay [et al] // Eur. J. Med. Chem. 1999. Vol.34. P. 1093-1100.
57. Johnson Kai. Studies on the mechanism of action of isoniazid and ethionamide in the chemotherapy of tuberculosis / Johnson Kai, King David S., Schultz Peter G. // J. Amer. Chem. Soc. 1995. Vol.117, №17. P. 5009-5010.
58. InhA, a Gene Encoding a Target for Isoniazid and Ethionamide in Mycobacterium tuberculosis / Asesh Banerjee, Eugenie Dubnau, Annaik Quemard [et al.] // Science. 1994. Vol.263, № 5144. P. 227-230.
59. Pharmacoproteomic Effects of Isoniazid, Ethambutol, and N-Geranyl-N-(2-adamantyl)ethane-1.2-diamine (SQ109) on Mycobacterium tuberculosis H37Rv / Lee Jia, Lori Coward, Gregory S. Gorman [et al.] // J. Pharmacol. and Exper. Therap. 2005. Vol.315, №2. P. 905-911.
60. Bestra Gurdial S. The mycobacterial cell envelope: A target for novel drugs against tuberculosis / Bestra Gurdial S., Brennah Patrick J. // J. Pharm. and Pharmacol. 1997. Vol. 49, №1. P. 25-30.
61. New trends in development of antimycobacterial compounds / Biava M., Porretta G.C., Deidda D. [et al] // Infect Disord Drug Targets. 2006. Vol.6(2). Р. 159-172.
62. Om Prakash. Developing an antituberculosis compounds database and data mining in the search of a motif responsible for the activity of a diverse class of antituberculosis agents / Om Prakash, Indira Ghosh // J. Chem. Inf. Model. 2006. Vol. 46. P. 17-23.
63. Orme I. M. Search for new drugs for treatment of tuberculosis / I. M. Orme // Antimicrob. Agents Chemother. 2001. Vol.45. P.1943-1946.
64. Cytochromes P450: novel drug targets in the war against multidrug-resistant Mycobacterium tuberculosis / A.W. Munro, K.J. McLean, K.R. Marshall [et al.] // Biochemical Society Transactions Structural Biology in Drug Metabolism and Drug Discovery. ­ 2003. ­ Vol. 31, № 3. ­ P.625-630.
65. Tuberculosis Antimicrobial Acquisition and Coordinating Facility: http://www.taacf.org.
66. Rapid Microbiologic and Pharmacologic Evaluation of Experimental Compounds against Mycobacterium tuberculosis / V. Gruppo, C.M. Johnson, K.S. Marietta [et al.] // Antimicrob. Agents Chemother. 2006. Vol.50. №4. P. 1245-1250.
67. Betts J.C. Signature gene expression profiles discriminate between isoniazid- thiolactomycin-, and triclosan-treated Mycobacterium tuberculosis / J.C. Betts // Antimicrob.Agents Chemother.­ 2003. ­ Vol.47. ­ P. 29032913.
68. Зіменковський Б.С. 4-Тіазолідони. Хімія, фізіологічна дія, перспективи. / Б.С. Зіменковський, Р.Б. Лесик Вінниця: Нова книга, 2004. 106 с.
69. Антитуберкульозна активність 4,5-заміщених 1,3-тіазолідону-2 та кореляція структуридії / Н.Є. Штойко, Б.С. Зіменковський, І.Г. Ільницький [та ін.] // Фармацевтичний журнал. 2001. №2. С. 84-89.
70. Ладный А.Я. Эффективность нового химиопрепарата дитофена при туберкулёзе морских свинок / А.Я. Ладный // Профилактика и лечение туберкулёза. 1973. Вып. 6. С. 140-142.
71. Особливості будови і реакційна здатність піридоксину, піридоксалю, піридоксаміну та ізоніазиду / Л.В. Гайова, В.М. Овруцький, Л.С. Бобкова [та ін.] // Ліки. 2002. №1-2. С. 94-99.
72. Вивчення особливостей окиснення вітамінів групи В6 квантово-хімічними методами / Ю.І. Губський, Л.В. Гайова, Л.С. Бобкова [та ін.] // Мед. хімія. 2004. №2. С.5-10.
73. Ebadi M. Drug-pyridoxal phosphate interactions / M. Ebadi, C.F. Gessert, A. Al-Sayegh // Rev Drug Metab Drug Interact. 1982. Vol.4(4). P. 289-331.
74. Гайова Л.В. Нові експериментальні дані щодо ефективності вітаміну В6 за умов фармакотерапії ізоніазидом / Л.В. Гайова // Ліки. 2004. №1/2. С. 59-64.
75. Гальмування росту культури мікобактерії туберкульозу ізоніазидом, вітаміном В6 та піридоксальфосфатом в дослідах in vitro. Зв’язок структура-активність” з використанням квантово-хімічних розрахунків / Л.В.Гайова, Н.І. Шарикіна, Л.С. Бобкова [та ін.] // Укр. пульмонол. журн. 2002. №2(36). С.54-57.
76. Георгиева Н. Изоникотиноилгидразоновые аналоги изониазида: взаимосвязь между антиоксидантной активностью и бактериостатической активностью / Н. Георгиева, В. Гаджева // Биохимия. 2002. №5. С. 705-710.
77. Петренко В.М. Современные режими антимикобактериальной терапии больных туберкулезом легких / В.М. Петренко // Укр. хіміотерапевт. журн. 2002. №3/4. С. 20-26.
78. Bhusal Y. Determination of in vitro synergy when three antimicrobial agents are combined against Mycobacterium tuberculosis / Y. Bhusal, C.M. Shiohira, N. Yamane // Int J Antimicrob Agents. 2005. Vol. 26(4). P. 292-299.
79. Бялик Й.Б. Ефективність різних режимів індивідуалізованої антибактеріальної терапії у хворих із вперше діагностованим деструктивним туберкульозом легень з бактеріовиділенням / Й.Б. Бялик, В.М. Петренко, Н.А. Литвиненко // Укр.. хіміотерапевт. журн. 2002. №2. С. 54-57.
80. Шпичак О.С. Аналіз протитуберкульозних препаратів, представлених на фармацевтичному ринку України / О.С. Шпичак, О.Є. Богуцька, О.І. Тихонов // Клінічна фармація. 2003. Т.7, №4. С. 18-22.
81. Мельник В.М. Сучасні аспекти забезпечення хворих на туберкульоз антимікобактеріальними препаратами / В.М. Мельник // Укр. хіміотерап. журн. 2002. №3/4. С. 27-34.
82. Заліська О. Система визначення потреби в лікарських засобах на основі фармакоекономічних підходів (на прикладі протитуберкульозних препаратів) / О. Заліська, Б. Парновський Ліки України. №7-8(72-73). 2003. С. 53-56.
83. Наказ МОЗ України від 05.06.2006 №361 «Про затвердження методики розрахунку потреби в протитуберкульозних препаратах»
84. Experimental and theoretical IR and Raman spectra of picolinic, nicotinic and isonicotinic acids/ P. Koczon, J.Cz. Dobrowolski, W. Lewandowski [et al] // J. Molecular Structurel. 2003. Vol.655. P. 89-95.
85. Вивчення взаємозв’язків між антиоксидантними та квантово-механічними характеристиками похідних піридинкарбонових кислот / Ю.І. Губський, Г.Г. Горюшко, Л.С. Бобкова [та ін.] // Вісник фармації. 2003. №1. С. 11-16.
86. Светлый С.С. Изучение токсичности и некоторых вопросов токсикодинамики производных пиколиновой кислоты / С.С. Светлый, В.М. Воронина, Л.А. Любинская // Сельськохоз. токсикология. 2000. №2. С. 5-9.
87. Губський Ю.І. Взаємодія нових похідних піридинкарбонових кислот з ізольованими фракціями ядерного хроматину клітин печінки інтактних та отруєних тетрахлоретаном щурів / Ю.І. Губський, Е.Л. Левицький, Г.Г. Корюшко // Сучасні пробл. токсикології. 2002. №2. С. 26-32.
88. Carey M.M. Relation of chemical constitution of a series of esters of picolinic acid to toxicity as insecticides / M.M. Carey, D.E. Frear, L.E. Dills // J. Econ. Entomol. 1949. Vol.42(5). Р. 798-801.
89. Мельников Н.Н., Новожилов Е.П., Белан С.Р. и др. Справочник по пестецидам. / [Н.Н. Мельников, Е.П. Новожилов, С.Р. Белан и др.]. М.: Химия, 1985. 352 с.
90.