Румянцева Галина Николаевна. Теория и практика использования направленного биокатализа в технологиях пищевых продуктов и инградиентов белковой и углеводной природы

Короткий опис

Румянцева Галина Николаевна. Теория и практика использования направленного биокатализа в технологиях пищевых продуктов и инградиентов белковой и углеводной природы : диссертация ... доктора технических наук : 05.18.07 / Румянцева Галина Николаевна; [Место защиты: ГОУВПО "Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Московский государственный университет прикладной биотехнологии"].- Москва, 2008.- 511 с.: ил.

На правах рукописи
МОСКОВСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ
ПРИКЛАДНОЙ БИОТЕХНОЛОГИИ
05200350001
Румянцева Галина Николаевна
ТЕОРИЯ И ПРАКТИКА ИСПОЛЬЗОВАНИЯ
НАПРАВЛЕННОГО БИОКАТАЛИЗА В ТЕХНОЛОГИИ
ПИЩЕВЫХ ПРОДУКТОВ И ИНГРЕДИЕНТОВ
БЕЛКОВОЙ И УГЛЕВОДНОЙ ПРИРОДЫ
Специальность 05Л 8.07 - Биотехнология'пищевых продуктов
ДИССЕРТАЦИЯ
на соискание учёной степени доктора технических наук
Научный консультант: доктор технических наук, профессор, академик РАЕН Н.И. Дунченко
Москва 2008 
Оглавление Стр.
Введение 6
Глава 1. Теоретические и практические предпосылки создания
биокаталитических технологий пищевых продуктов и ингредиентов белковой и углеводной природы 11
1.1. Источники получения ферментов микробного, живот¬ного и растительного происхождения 11
1.2. Ферменты микроорганизмов: классификация и особен¬ности действия на субстраты белковой и углеводной 14
природы
1.3. Традиционное использование биокатализа в пищевой
промышленности для гидролиза растительных белков и 25
полисахаридов
1.3.1. Пивоварение 26
1.3.2. Спиртовое производство 33
1.3.3. Виноделие и производство соков 35
1.3.4. Хлебопечение 38
1.3.5. Производство сахаристых веществ 41
1.4. Современное состояние вопроса получения и
применения белковых препаратов 45
1.5. Традиционные технологии растительных »
полисахаридов 58
1.5.1. Строение и свойства структурных полисахаридов
растений 58
1.5.2. Сырьевые источники и особенности технологии пекти¬на и нерастворимых пищевых волокон (ПВ) 67
Заключение к обзору литературы 85
Глава 2. Постановка эксперимента, объекты и методы 87
исследования
2.1. Объекты исследования 89
2.1.1. Ферментные препараты 89
2.1.2. Субстраты белковой и углеводной природы 92
2.1.3. Сырьевые объекты 93
2.2. Методы исследования 94
2.2.1 Методы определения активности ферментов 94
2.2.2. Препаративное выделение р-глюкозидазы Aspergillus
awamori 18 97
2.2.3. Методы определения химического состава
растительного сырья 99
2.2.4. Методы определения качественных показателей
готовых препаратов, полученных методом 102
биокатализа
2.2.5. Исследование функционально-технологических свойств
структурообразователей 103 
Методы анализа эфирного розового масла, агара и чая. . 104
Опытно-промышленные испытания метода биокатализа 105
Математические методы 106
Изучение субстратного состава ВСР и каталитических свойств микробных ферментов на природных 108
субстратах
Выбор растительного сырья и ВСР для получения бел¬ка, пектина и ПВ 108
Определение основных каталитических свойств мик¬робных ферментов на природных субстратах 112
Изучение субстратной специфичности ферментов мик- 120 робного происхождения
Изучение продуктов гидролиза растительных полиса¬харидов 124
Изучение продуктов гидролиза растительных белков. . . 130
Параметрическая модель и научное обоснование мето¬дологии направленного биокатализа 135
Формирование концепции, параметрической модели и
методологии направленного биокатализа 135
Скрининг ферментных препаратов, действующих на
субстраты белковой и углеводной природы 142
^Определение оптимальных режимов действия карбо-
гидраз и ПТЭ 147
Исследование оптимальных режимов действия ■
протеолитических ферментов 152
Совершенствование традиционных технологий на
основе биокатализа 158
Биокатализ в технологии эфирных масел 158
Использование биокатализа в производстве чая и
чаепродуктов 169
Комплексная переработка плодоовощного, в т.ч. цитрусового сырья, а также трав и ягод
биокаталитическим способом 180
Биокатализ в технологии агара из морских водорослей. . 197 Разработка биокаталитических технологий пищевых
ингредиентов белковой и углеводной природы 205
Экспериментальное обоснование выбора МФП и ра¬циональных режимов ферментативного выделения рас¬тительного белка 205
Исследование динамики протеолиза при использовании
различных видов сырья 205
Определение влияния продолжительности гидролиза на выход белка из зернового и масличного сырья 209 
6.1.3. Выбор условий предобработки белоксодержащего
сырья 211
6.1.4. Определение рациональной дозы ферментных препара¬тов для обработки бобового сырья 214
6.1.5. Выбор гидромодуля, обеспечивающего максимальный
выход белка 218
6.1.6. Определение рациональной температуры для фермен¬тативной обработки растительного сырья 223
6.1.7. Определение рационального значения pH для фермен-тативной обработки сырья 227
6.1.8. Исследование возможности совместного использования протеаз и карбогидраз в процессе экстрагирования
белка 233
6.2. Научно-экспериментальное обоснование биокатализа в
технологии высоко- и низкоэтерифицированных пектинов 245
6.2.1. Влияние ферментных препаратов на выход пектина. . . . 246
6.2.2. Влияние ферментных препаратов на желирующую спо-
. собность пектина 250
6.2.3. Выбор рациональных доз ферментных препаратов 260
6.2.4 Создание композиции ферментов на основе ПТЭ и кар-
богидраз микроорганизмов для гидролиза ВСР - источ¬ников пектина 266
6.3. Научный подход к использованию биокатализа в тех¬нологии получения нерастворимых пищевых волокон... 274
6.3.1. Теоретические и практическое обоснование выбора ферментных препаратов для получения пищевых
волокон 274
6.3.2. Экспериментальное обоснование режимов фермента¬тивной обработки источников пищевых волокон 281
6.3.3. Выбор композиции ферментных препаратов для извле¬чения пищевых волокон 300
Глава 7. Изучение показателей качества пищевых ингредиентов
белковой и углеводной природы 305
7.1. Показатели качества белковых препаратов из расти¬тельного сырья и ВСР 305
7.1.1 Биохимические, физико-химические и функциональные
свойства экспериментальных белковых препаратов. ... 305
7.1.2 Исследование возможности использования
экспериментальных препаратов при производстве вареных колбас 312
7.2. Качественные свойства экспериментальных образцов
высоко- и низкоэтерифицированного пектина 314
7.2.1 Изучение желирующей способности высокоэтерифици-
рованных пектинов ' .' 314
7.2.2. Исследование качественных показателей
низкоэтерифицированного пектина 317
7.2.3 Оценка экспериментальных образцов пектина в составе
молочных продуктов 318
7.2.4. Оценка комплексообразующих свойств пектина 320
7.3. Показатели качества экспериментальных образцов
пищевых волокон 323
7.3.1. Химический состав экспериментальных образцов ПВ. . . 323
7.3.2. Функционально-технологические свойства (ФТС)
экспериментальных пищевых волокон 325
7.3.3. Оценка экспериментальных препаратов ПВ в составе
вареных колбас 326
7.3.4. Оценка экспериментальных препаратов ПВ в составе
хлеба 327
Основные результаты и выводы 330
Заключение 334
Список сокращений, используемых в работе 338
Список литературы 339
Приложения: 389
Приложение 1. Авторские свидетельства, патенты, дипломы 389
Приложение 2. ТД на используемые ферментные препараты 405
Приложение 3. Акты опытно-промышленных и промышленных
испытаний 421
Приложение 4. ТД: технологические инструкции на производство и
технические условия на пищевые ингредиенты 477
Приложение 5. Протоколы и акты испытаний пищевых продуктов и
ингредиентов 492
Ферменты микроорганизмов используют для получения продуктов пита¬ния в течение несколько веков: в пивоварении, сыроделии, хлебопечении. Тра¬диционные технологии, в основе которых лежат ферментативные процессы и биохимические превращения, характерные, например, для ферментов дрожжей и солода, использовались задолго до того, как стал известен механизм действия этих ферментов. Однако, только благодаря достижениям науки в области инже¬нерной энзимологии стало возможно промышленное получение и применение ферментов в различных отраслях промышленности: пищевой, легкой, фарма¬цевтической, бытовой химии и сельском хозяйстве.
В технологии получения ферментных препаратов особое внимание уделяется микроорганизмам, которые как продуценты ферментов обладают многими преимуществами. Во-первых, это лабильность к физико¬химическим и биологическим факторам, в связи с чем открываются поистине неограниченные возможности в получении высокоактивных штаммов проду-центов ферментов; во-вторых, возможность увеличить ассортимент фер-ментных препаратов с помощью селекции микроорганизмов и направленного биосинтеза за счет подбора компонентов среды и условий культивирования. Наибольший интерес представляют микроскопические грибы и бактерии, об-ладающие разнообразием ферментных систем как гидролитического, так и негидролитического действия, что особенно важно для использования в пи-щевой технологии.
Технология получения микробных ферментных препаратов включает процессы культивирования наиболее активных штаммов - продуцентов фер-ментов, выделение и очистку, получение различных форм ферментов: жид¬ких, растворимых, порошкообразных, а также иммобилизованных фермент¬ных препаратов.
На современном этапе основное внимание уделяется ферментным пре-паратам, которые находят широкое применение для обработки пищевого сы-
рья: целлюлазам, пектиназам, в том числе мацерирующим ферментам, геми- целлюлазам, амилазам, протеазам.
Теоретические достижения в области ферментативного гидролиза ком-понентов пищевого сырья легли в основу промышленных биотехнологиче-ских способов получения пищевых продуктов, таких как хлеб, мясные и мо-лочные продукты, вино, пиво, сахаристые вещества и т.д.
В данной работе считали целесообразным исследовать возможность использования биокатализа для усовершенствования традиционных техноло-гий: эфирных масел, пищевых экстрактов, различных видов чая, агара из морских водорослей.
Не менее перспективным считали использование биокатализа в техно-логии пищевых ингредиентов белковой и углеводной природы, получаемых, в основном, из вторичных сырьевых ресурсов (ВСР). Это позволит решить некоторые вопросы создания новых видов ингредиентов и пищевых продук-тов на их основе.
Необходимо отметить, что дефицит белка наблюдается в настоящее время во многих странах мира. В связи с этим направление работ крупных учёных: академика РАСХН Рогова И.А., Титова Е.И, к.т.н. Крохи Н.Г., про-фессоров: Браудо Е.Е., Жаринова А.И., Токаева Э.С., Грачевой И.М., Гернет М. В., Ивановой Л.А., Траубенберг С.Е., Колпаковой В.В. — в области полу-чения новых промышленных видов пищевого белка и в настоящее время со-храняет актуальность.
В последние годы отмечается тенденция использования нетрадицион-ных источников белка - вторичных сырьевых ресурсов, таких как пшенич¬ные отруби, горчичный и подсолнечный жом и т.д., наряду с традиционны¬ми, как, например, соя.
Вовлечение в технологический процесс вторичных сырьевых ресурсов способствует повышению эффективности основного производства, является предпосылкой к созданию безотходных перерабатывающих предприятий, а также позволяет получить разообразные продукты пищевого назначения.
Наиболее яркими представителями таких продуктов наряду с белковыми являются добавки углеводной природы: пектин и нерастворимые пищевые во¬локна, которые обладают уникальными физиологическими показателями. Их полезные свойства многочисленны: они нормализуют содержание холестерина, повышают устойчивость к аллергии, снимают раздражение и воспалительные процессы слизистых оболочек, интенсифицируют общий обмен веществ.
Усилиями российских профессоров: Кочетковой А.А., Донченко Л.В., Карпович Н.С., Нелиной В. В., Голубева В.Н., Шелухиной Н.П., Колесникова А.Ю., к.т.н. Матрёничевой В.В. и др. совершенствуются технологии получе-ния растительных полисахаридов, в частности за счёт улучшения экстракци-онных свойств пектина, а также современных методов очистки и сушки пи-щевых волокон.
Источниками получения пектина и пищевых волокон являются вто-ричные сырьевые ресурсы сокового и сахарного производств: яблочные и цитрусовые отжимы, свекловичный жом; при получении пищевых волокон за рубежом используют, в основном, пшеничные отруби.
Одним из наиболее ценных продуктов переработки вторичных сырье-вых ресурсов является пектин.
Свойство пектина трудно переоценить: это его способность выводить из организма человека и животных радиоактивные элементы, в т.ч. ионы тя-жёлых металлов, способность сорбировать токсины.
В пищевой промышленности используется основное свойство пектина - образовывать студни, связывая при этом большое количество жидкости.
В отличие от других студнеобразователей, пектин желируется в присутст¬вии сахара и кислоты, поэтому, прежде всего он нашёл применение в производ¬стве кондитерских изделий пастило-мармеладной группы, коцфет, желейных из¬делий, конфитюров, джемов, повидла, низкосахаристых консервов.
При производстве безалкогольных напитков специального назначения, перспективно использовать низкоэтерифицированный пектин как физиологи-чески активную профилактическую добавку. Разработаны десятки рецептур соков, фруктовых вод, газированных и негазированных тонизирующих на-питков, на основе пектина, выпуск которых ограничен только отсутствием оте-чественного продукта. В хлебопечении применяют растительные полисаха-риды: пектин и ПВ, используя их поверхностноактивные свойства. При внесе-нии их в тесто происходит укрепление клейковины, в готовом хлебе улучша-ются такие показатели, как объёмный выход, пористость и сжимаемость мякиша, формоустойчивость, удлиняется сохранение свежести и срок годности хлеба.
Водосвязывающая и водоудерживающая способность пектина и пище-вых волокон обусловили их применение в производстве молочных и мясных изделий, в том числе лечебно-профилактического назначения. В йогуртах, майонезах, маргарине полисахариды используют в качестве структурообра- зователя и стабилизатора.
Теоретическим исследованиям в области биокатализа и разработке био¬каталитических технологий получения пищевых продуктов и ингредиентов по¬священа данная работа, обобщающая многолетний опыт автора.
В России в настоящее время препараты пектина, нерастворимых ПВ, а также белка в очищенной форме не производят - отечественная пищевая про-мышленность использует зарубежные аналоги.
Актуальной проблемой технологии белков и полисахаридов является за¬мена химических методов — кислотного и щелочного гидролиза — на фермента¬тивный, имеющий неоспоримые преимущества: увеличение выхода продукции, сохранение природных функциональных свойств, мягкие условия pH и темпе¬ратуры, отсутствие потребности в специальном оборудовании, улучшение эко¬логических условий производства.
Усилиями российских ученых: А.А. Кочетковой, Л.В. Донченко, Н.П. Не¬чаева, Г.А. Ермолаевой, В.В. Нелиной, В.Н. Голубева, Н.П. Шелухиной и дру¬гих совершенствуется технология ингредиентов углеводной природы, в частно¬сти, за счет использования современных методов гидролиза, очистки и сушки.
Работы И.А. Рогова, Е.И. Титова, Н.И. Дунченко, Ю.А. Ивашкина, В.Г. Высоцкого, Э.С. Токаева, Н.К. Журавской, В.И. Ганиной, И.В. Квитко, К.К. По¬
лянского, В.А. Лосевой, Т.В. Саниной, Л.А. Ивановой, D. Burkit, Н. Trowell сви¬детельствуют о целесообразности использования растительных полисахаридов для получения продуктов общего и функционально-профилактического питания.
Проблема биокаталической переработки традиционных видов расти-тельного сырья, таких как бобовые, зерновые, эфиромасличные культуры, чайное и плодоовощное сырье, морские водоросли, остается актуальной и в настоящее время. Для каждой конкретной технологии необходим научно обоснованный выбор ферментных препаратов, специфичных к субстратам сы¬рья и наиболее полно отвечающий требованиям производства.
Одной из важных задач является исключение из технологического про-цесса вредных с экологической точки зрения химических реагентов, напри-мер, растворителей (эфир), осадителей (этиловый спирт), а также замена кис-лотного и щелочного гидролиза на ферментативный, имеющий неоспоримые преимущества: щадящие условия, которые позволяют сохранить природные свойства сырья, улучшить качество и увеличить выход продукции.
Анализ литературных и патентных источников позволил оценить пер-спективы промышленного биокатализа как способа интенсификации техно-логических процессов получения пищевых продуктов и ингредиентов. Одна¬ко обобщающие работы в этой области представлены всего несколькими из-даниями И.А. Рогова и Л.В. Антиповой, О.В. Кислухиной, М.В. Гернет, Л.А. Ивановой, Л.И. Войно.
В данной работе представлялось целесообразным обобщить накопленный опыт отечественных и зарубежных исследователей, а также собственный экспе¬риментальный материал в области биокатализа применительно к растительным объектам, выявить особенности и закономерности этого биотехнологического направления, сформулировать концепцию направленного биокаталнза и опре¬делить пути её реализации.
Работа выполнена в МГУ прикладной биотехнологии в рамках Федера¬льной научно-технической программы «Научные исследования высшей школы по приоритетным направлениям науки и техники», включая подпрограмму «Технология живых систем», а также на базе НПО «Биотехнология», Института биохимии им. А.Н. Баха РАН, по хоздоговорам с фирмами и предприятиями.
Цель и задачи исследований.
Целью исследования явилась разработка теоретических и практических основ направленного биокатализа в технологии пищевых продуктов и ингредиентов белковой и углеводной природы, получаемых в том числе из нетрадиционного сырья и ВСР.
Для достижения поставленной цели решались следующие задачи:
• исследовать субстратный состав ранее не используемых в процессах биокатализа ВСР и нетрадиционных видов сырья;
• изучить каталитические свойства исследуемых микробных ферментных препаратов (МФП) на стандартных и природных субстратах, систематизировать их по направленности действия;
• разработать параметрическую модель направленного биокатализа;
• научно обосновать методологию направленного биокатализа;
• изучить эффективность действия МФП на растительное сырье и ВСР;
• разработать технологию пищевых продуктов и ингредиентов белковой и углеводной природы на основе направленного биокатализа, а также техническую документацию на их производство;
• экспериментально обосновать методы ферментативной модификации ФТС ингредиентов и возможность их использования в пищевых продуктах;
• провести опытно-промышленную апробацию и внедрение основных результатов исследований.

Список літератури

ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Анализ литературных данных, отечественных и зарубежных патентов, а также результаты собственных исследований позволили сделать вывод об эффективности направленного биокатализа как способа усовершенствования биотехнологических процессов пищевых производств, позволяющего увеличить выход продукции и/или улучшить ее качество, а также в ряде случаев сократить производственный цикл и снизить материальные и энергозатраты, что в конечном счете позитивно влияет на себестоимость пищевых продуктов и ингредиентов.
Основной отличительной особенностью данной работы является разра¬ботка параметрической модели направленного биокатализа, учитывающей взаимосвязь управляющих и управляемых показателей процесса. Получен¬ные данные о каталитических свойствах используемых микробных фермен¬тов, как на стандартных, так и на природных субстратах, легли в основу сформулированной концепции, представленной в работе, и методологии на¬правленного биокатализа как метода совершенствования технологии пище¬вых продуктов.
Разработанная методология позволила выявить роль основных МФП и их композиций в процессах переработки растительного сырья и ВСР:
- (3-глюкозидаз, осуществляющих гидролиз предшественников ценных компонентов эфиромасличного сырья, а также участвующих в гидролизе нарингина и лимонена, придающих горький вкус цитрусовым сокам и экстрактам;
- ПТЭ и целлюлаз - в процессе выделения агара из морских водорослей и получения пищевых экстрактов из трав и ягод;
- эндо-ПГ и целлюлазы на субстраты чайного сырья с целью улучшения качества черного, зеленого и кирпичного видов чая, а также нового вида продукта - концентрата чая;
- протеолитических ферментов, специфичных к белкам бобовых и
зерновых культур, для улучшения их экстрактивности;
- ПТЭ в технологии пектина для перевода протопектина в раствори-мую форму;
- амилазы и протеазы в технологии ПВ из ВСР для очистки продукта от
»
сопутствующих веществ.
Выбор МФП предусматривает как действие индивидуальных фермен-тов, непосредственно гидролизующих субстрат-предшественник готового продукта (протеаза на белковые вещества, (З-глюкозидаза на гликозиды эфи-ромасличных растений, ПТЭ на протопектин и т.д.), так и комплекса фермен-тов, разрушающих структуру клеточной стенки растений: целлюлазы, ксила- назы, глюканазы и т.д.
Данная методология включает понятие «ограниченного» биокатализа с учетом заданных показателей качества продуктов биокатализа:
- в технологии чая, агара, витамина Р ферментативный гидролиз полисахаридов (пектин, целлюлоза) осуществляется частично - до состояния разрушенных клеток, но не до конечных продуктов - полигалактуроновой кислоты и глюкозы;
- при получении белковых препаратов процесс гидролиза субстратов «ограничивают» получением растворимых форм, но не аминокислот, что обеспечивает максимальный выход и заданные ФТС продукта;
- в технологии высокоэтерифицированного пектина разрушение прото-пектина идет до растворимого состояния: при этом сохраняются природные желирующие свойства. Для получения низкоэтерифицированной формы пектина процесс деэтерификации «ограничивают» достижением заданной СЭ;
- для получения ПВ действие амилазы «ограничивают» до получения растворимых декстринов, а протеазы - до растворимых пептидов.
Показана возможность реализации сформированной разработанной параметрической модели направленного биокатализа в технологии эфирного розового масла, различных видов чая, агара из морских водорослей, продуктов комплексной переработки плодоовощного сырья, и в частности цитрусового: соков, пищевых экстрактов, витамина Р.
Учитывая основные положения концепции и параметрической модели направленного биокатализа, разработаны технологии препаратов растительных белков и полисахаридов: пектина и нерастворимых ПВ.
Особое внимание уделялось выбору сырьевых источников, в основном ВСР, и поиску новых технологических решений на основе выбора МФП и режимов их использования.
Следует заметить, что, помимо традиционно используемых за рубежом бобов сои, культура гороха, широко культивируемая в России, содержит значи¬тельное количество белка, в связи с чем представленный в работе способ рацио¬нального ее использования можно считать своевременным и перспективным.
Установлена эффективность и целесообразность зерновых ВСР, таких, как пшеничные отруби и солодовая дробина. Использование метода направ-ленного биокатализа для этих видов ВСР позволил получить белковые кон-центраты и изоляты с выходом более 20%.
Использование ВСР для получения белковых препаратов решает в зна-чительной степени экологические проблемы и является основанием для соз-дания безотходных производств.
Разработана новая технология пектина, включающая ферментативный катализ взамен кислотного гидролиза и ультрафильтрационную очистку экс-тракта взамен спиртоосаждения. Суть предложенного технологического ре-шения - биокатализа заключается в специфичности действия ферментов на нерастворимый пектин с целью снижения его молекулярной массы и перевода в экстракт. При этом за счет действия комплекса ферментов, разрушающую клеточную растительную стенку достигается максимальный выход этого цен¬ного полисахарида при сохранении высоких желирующих свойств.
Не менее значимым является создание новой технологии пищевых во-локон из ВСР пищевых производств: плодовых (яблочные выжимки и тык-венные ВСР) и зерновых зерновых (пшеничные отруби, солодовая дробина). В настоящее время в России производство очищенных препаратов пищевых волокон практически отсутствует.
Основой предложенной технологии является биокаталитический про-цесс, включающий специфические воздействия на субстраты сырья амилоли-тических и пектолитических ферментных препаратов. Использование ука-занных ферментов или их композиций позволяет очистить растительные во-локна от сопутствующих веществ и добиться практически полного их выде-ления по отношению к исходному содержанию в сырье.
Все три предложенные технологии (белок, пектин, пищевые волокна) запатентованы. Разработаны ТИ и ТУ на получение яблочного пектина, со-евого и горохового белка, растительных пищевых волокон: ячменных, тык-венных, яблочных.
Выражаю благодарность научному консультанту, первому проректору МГУПБ, акад. РАЕН, проф. Н.И. Дунченко, зав. кафедрой «Химия пищи и пищевая биотехнология» проф. А.И. Жаринову, акад. РАСХН, проф. И.А. Рогову - руководителю государственной целевой научно-технической программы «Технология живых систем», акад. РАСХН, проф. Е.И. Титову — руководителю программы «Создание обогащенных продуктов питания, корректирующих витаминно-минеральный статус организма школьников первой возрастной группы». Благодарю директора НТЦ «Лекбиотех» Г.Б. Бравову, зав. лабораторией Н.М. Павлову, Удалову Э.В. за предоставление опытно-промышленных образцов ферментных препаратов, генерального директора ООО «Зеленые линии» Черникова Д.Л., директора НПФ «Гелла- ТЭКО» А.А. Свитцова за организацию работ по получению опытно-промышленных партий пектина, белка и ПВ, зам. директора по научной работе ГосНИИ хлебопекарной промышленности Р.Д. Поландову и зав. лабораторией ВНИИ мясной промышленности А.А. Семенову за организацию испытаний пищевых ингредиентов в составе хлебо- и мясопродуктов, к.т.н. О.А. Варфоломееву, к.т.н. М.Н. Евсеичеву, к.т.н. М.И. Осадько, к.т.н. С.В. Макурину за помощь в совместной экспериментальной работе. Выражаю благодарность директору Батумского института аграрных биотехнологии и бизнеса Папунидзе Г.Р., директору НИИ чая, субтропических культур и чайной промышленности Абхазии Ревишвили Т.О., а также Юришовой Э. - ведущему специалисту Объединения крахмальных предприятий Дольна Крупа (Словакия) за организацию работ по внедрению биокаталитических технологий на предприятиях отрасли.