Анализ экспрессии клеточных онкогенов в нормальных и опухолевых тканях человека Мелков, Александр Михайлович

Короткий опис

Мелков,АлександрМихайлович.Анализэкспрессииклеточныхонкогеноввнормальныхиопухолевыхтканяхчеловека: диссертация ... кандидата биологических наук : 03.00.03. - Москва, 1984. - 117 с. : ил.больше
Цитаты из текста:

стр. 1
б/: £5''?)/з^'3'0 АКАДЕМИЯ НАУК СССР ИНСТИТУТ МОЛЕКУЛЯРНОЙ БИОЛОГИИ На правах рукописи УДК 547.963.22МЕЛКОВАлександрМихайловичАНАЖЗЭКСПРЕССИИКЛЕТОЧНЫХОНКОГЕНОВВНОРМАЛЬНЫХИОПУХОЛЕВЫХТКАНЯХЧЕЛОВЕКА03.00.03 - молекулярная биология Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических

стр. 3
различных опухолей инормальныхтканей4.1.3. Изменения размеров транскриптов и уровняэкспрессииприопухолевомросте 4.1.4.Анализэкспрессиионкогена^^з в клетках 78нормальнойиопухолевойтканимолочной железы 4.2. Трансформация ifiH ЗТЗ клеток ДНК из опухолейчеловекаи дальнейшее получение опухолей

стр. 61
лаборатории Ф.Л.Киселева /10/, уда­ лось выделить недеградированную РНК из некультивируемых клеток, однако в ней так же ставилась задача сравнительногоанализаэкспрессиионкогеновв клетках различных опухолейчеловека. В данной работе была поставлена цель проанализироватьэкспрес­ сиюонкогеновв клеткахнормальныхиопухолевыхтканейчеловека, причем принципиальными являлись два момента - РНК выделялась толь­ ко из...

Оглавление диссертациикандидат биологических наук Мелков, Александр Михайлович
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.
1. ВВЕДЕНИЕ.
2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.
2.1. Характеристика онкогенов.
2.2. Продукты онкогенов.
2.3. Большие концевые повторы.
2.4. Химический и радиационный канцерогенез в свете концепции онкогена.
2.5. Экспрессия онкогенов в человеческих опухолях.
3. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.
3.1. Выделение РНК.
3.1.1. Центрифугирование в хлористом цезии.
3.1.2. Метод экстракции горячим фенолом.
3.2. Денатурирующий электрофорез РНК в агарозном 50 геле.
3.3. Перенос денатурированной РНК на нитроцеллшозный фильтр.
3.4. Гибридизация РНК.
3.5. Выделение ДНК.
3.6. Электрофорез ДНК.
3.7. Перенос фрагментов ДНК из геля на нитроцеллшозный фильтр.
3.8. Гибридизация ДНК.
3.9. Экспозиция фильтров.
3.10. Выделение плазмидной ДНК.
3.11. Клонирование ДНК.
3.11.1. Приготовление векторной ДНК.
3.11.2. Приготовление вставки.
3.11.3. Лигирование.
3.11.4. Трансформация клеток E.coli
3.12. Рестрикционный анализ ДНК.
3.13. Выделение фрагментов ДНК из агарозных гелей.
3.14. Введение метки в ДНК.
3.15. Трансформация NIH ЗТЗ клеток.
3.16. Получение опухолей на бестимусных мышах.
4. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ.
4.1. Анализ РНК опухолевых и нормальных клеток человека.
4.1.1. Получение онк-специфических зондов.
4.1.2. Транскрипция онкогенов в клетках различных опухолей и нормальных тканей.
4.1.3. Изменения размеров транскриптов и уровня экспрессии при опухолевом росте.
4.1.4. Анализ экспрессии онкогена гаэ в клетках нормальной и опухолевой ткани молочной железы
4.2. Трансформация НШ ЗТЗ клеток ДНК из опухолей человека и дальнейшее получение опухолей на бестимус-ных мышах.
4.3. Гибридизация онк-зондов с ДНК, выделенной из крови больных разными формами лейкозов.
5. ВЫВОДЫ.