Исследование структурно-функциональной роли С-конца молекулы гамма-интерферона Цивковский, Руслан Юрьевич

Короткий опис

Цивковский,РусланЮрьевич.Исследованиеструктурно-функциональнойролиС-концамолекулыгамма-интерферона: диссертация ... кандидата биологических наук : 03.00.03. - Кольцово, 1999. - 147 с.больше
Цитаты из текста:

стр. 1
Министерство здравоохранения России Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии "Вектор" На правах рукописицивковскийРусланЮрьевичИССЛЕДОВАНИЕСТРУКТУРНО-ФУНКЦИОНАЛЬНОЙРОЛИС-КОНЦАМОЛЕКУЛЫГАММА-ИНТЕРФЕРОНАспециальность 03.00.03 - "молекулярная биология" Диссертация на соискание

стр. 6
прежде всего из-за их трудоемкости. Цель и задачиисследования. Целью настоящей работы является всестороннееисследованиесвойств полученных С-концевых аналогов у-интерферона, установлениеролиС-концамолекулыв проявлении различных свойств белка, а также разработка новых эффективных методов локализованного

стр. 41
уИФН, поскольку удаление этого кластера приводит к повышению биологической активностимолекулы. — 42 — Рисунок 1.8.4. Возможнаяфункциональнаярольсвязывания уИФН с гепаран сульфатом. — 43 — Итак, С-конецуИФН играет ключевуюрольво взаимодействии белка с гепаран сульфатом. Это взаимодействие, вероятно,

Оглавление диссертациикандидат биологических наук Цивковский, Руслан Юрьевич
ОГЛАВЛЕНИЕ
стр
Введение
Глава 1. Обзор литературы. Механизмы реализации биологических 10 свойств гамма-интерферона и роль в этом С-конца молекулы.
1.1. Введение
1.2. Связывание уИФН с клеточным рецептором и передача сигна- 12 ла в клетку.
1.3. Иммуномодулирующие свойства уИФН
1.4. Антивирусная активность уИФН
1.5. Антипролиферативное действие уИФН
1.6. Роль уИФН в усилении фагоцитоза
1.7. Адъювантные свойства уИФН
1.8. Роль С-конца в реализации различных функций уИФН
1.9. Формулировка задач по уточнению структурно- 44 функциональной организации С-конца уИФН.
Глава 2. Материалы и методы
2.1. Модификация олигонуклеотида 4-аминооксибутиламином
2.2. Методика определения субстратных свойств модифицирован- 47 ных дезоксицитидин-5'-трифосфатов,
2.3. Получение С-концевого фрагмента гена а-фетопротеина
2.4. Выделение гибридного белка ИФН-АФП
2.5. Определение димерной структуры белков методом ковалент- 49 ной сшивки.
2.6. Определение констант связывания гамма-интерферона и его 50 аналогов со специфическим клеточным рецептором.
2.7. Определение фагоцитоз-стимулирующей и антипролифера- 51 тивной активности белков.
2.8. Иммунизация кроликов и определение титров сывороток ка- 52 фетопротеину.
Глава 3. Результаты и обсуждение
3.1. Изучение структурно-функциональной организации С-конца 54 у-интерферона.
3.1.1. Получение продуцента гибридного белка ИФН-АФП в E.coli
3.1.2. Очистка гибридного белка ИФН-АФП
3.1.3. Исследование физико-химических свойств С-концевых анало- 66 гов уИФН.
3.1.4. Исследование биологических свойств аналогов уИФН
3.1.5. Изучение иммуностимулирующих свойств уИФН в составе 82 гибридного белка ИФН-АФП.
3.2. Разработка методов статистического мутагенеза с использова- 91 нием 4-аминооксибутиламина и его производных.
3.2.1. Разработка способа введения мутаций в ограниченный район 93 ДНК с использованием олигонуклеотида, модифицированного АОБА.
3.2.2. Получение мутаций в протяженном районе целевого гена пу- 101 тем создания одноцепочечного района необходимой длины и
его дальнейшей модификации АОБА.
3.2.3. Получение АОБА-производного dCTP (dC** TP) и изучение 105 его субстратных свойств в полимеразной системе in vitro.
3.2.4. Исследование мутагенных свойств dC**TP
Заключение
Выводы
Литература