Изучение полиморфизма гена метилентетрагидрофолатредуктазы у больных с кардиоваскулярной патологией Дегаева Татьяна Алексеевна

Короткий опис

Дегаева Татьяна Алексеевна. Изучение полиморфизма гена метилентетрагидрофолатредуктазы у больных с кардиоваскулярной патологией: диссертация ... кандидата Медицинских наук: 14.01.05 / Дегаева Татьяна Алексеевна;[Место защиты: ФГБОУ ВО «Самарский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации], 2019
Изучение полиморфизма гена метилентетрагидрофолатредуктазы у больных с кардиоваскулярной патологией Дегаева Татьяна Алексеевна
ОГЛАВЛЕНИЕ ДИССЕРТАЦИИ
кандидат наук Дегаева Татьяна Алексеевна
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

Глава 1. Обзор литературы

1.1. Сердечно-сосудистые заболевания как медико-социальная проблема Государства

1.2. Роль гена метилентетрагидрофолатредуктазы в развития тромботических осложнений у больных с кардиоваскулярной патологией

1.2.1.Молекулярно-генетические основы гипергомоцистеинемии и гена метилентетрагидрофолатредуктазы

1.2.2. Изучение полиморфного варианта гена метилентетрагидрофолатредуктазы в позиции 677 С^Т у больных артериальной гипертонией

1.2.3. Полиморфизм гена МТ№^ в позиции 677 С^-Т и риск кардиоваскулярной патологии

1.2.4. Полиморфизм гена МТ№^ в позиции 1298 Л^С и риск кардиоваскулярной патологии

1.3. Артериальная гипертония, как фактор риска «тромбогенных» осложнений

1.4. Острый инфаркт миокарда, как социальная проблема современного общества

1.5. Острое нарушение мозгового кровообращения

Глава 2. Материалы и методы

2.1. Алгоритм отбора больных артериальной гипертонией, инфарктом миокарда, острым нарушением мозгового кровообращения

2.1.1. Клинико-гемодинамическая характеристика больных первичной артериальной гипертонией

2.1.2. Характеристика выборки больных с острым инфарктом миокарда

2.1.3. Клинико-гемодинамическая характеристика выборки больных с острым нарушением мозгового кровообращения по ишемическому типу

2.1.4. Контрольная группа

2.2. Лабораторное-инструментальное обследование больных с

кардиоваскулярной патологией

2.2.1. Молекулярно-генетические методы исследования

2.3. Статистические методы исследования

Глава 3. Результаты исследований

3.1. Изучение полиморфных вариантов гена метилентетрагидрофолатредуктазы в позициях 677 С^Т и 1298 А^С у больных первичной артериальной гипертонией в Республике Мордовия

3.2. Развитие тромбогенных осложнений у больных артериальной гипертонией в течение трехлетнего наблюдения

3.3. Гендерные и этнические особенности носительства генотипов гена метилентетрагидрофолатредуктазы в позициях 677 С^Т и 1298 А^С у

больных с острым инфарктом миокарда

3.4 Особенности носительства полиморфизма гена

метилентетрагидрофолатредуктазы позициях 677 С^Т и 1298 А^С у

больных с острым нарушением мозгового кровообращения

3.5. Выявление критериев стратификации риска развития тромбогенных осложнений у больных с кардиоваскулярной патологией на основании

носительства полиморфизма гена метилентетрагидрофолатредуктазы

Глава 4. Обсуждение результатов

ВЫВОДЫ

Список літератури

Молекулярно-генетические основы гипергомоцистеинемии и гена метилентетрагидрофолатредуктазы
Во второй половине 20 века были сделаны открытия, которые позволили «понять» казалось бы «несвойственные» ситуации для детского возраста. В 1965 году Schmike R.N. et ah. обнаружили, что у детей, смерть которых наступила от сосудистых заболеваний, имеется повышенный уровень содержания гомоцистеииа (ГЦ) [65,67]. В этом же году Carson N.AJ, et al при обследовании 20 семей выявили, что у 38 членов этих семей имеется сочетание повышенного уровня гомоцистена в крови и сосудистые заболевания по типу атеросклеротических. В дальнейшем, в 1969 году было сделано сообщение, что МсСипу в Гарвардской медицинской школе при вскрытии двух умерших детей, страдавших гомоцистинурией и гипергомоцистеинемией (более 100 мкмоль/л), нашел атеросклеретическое поражение артерий и признаки тромбоза. Boushey CJ. et al (1995) провели углублённый анализ ранее проведенных 27 исследований (case-control study), который показал, что у лиц с гипергомоцистеинемией относительный риск развития коронарной болезни выше в 1,7 раза, цереброваскулярной патологии - в 2,5 раза, окклюзионных поражений периферических артерий - в 6,8 раз [170]. При возрастании концентрации ГЦ на каждые 5 мкмоль/л отмечается увеличение риска развития коронарной болезни на 40%.
Известно, что ГЦ - серосодержащая аминокислота, не входящая в состав белков, которая образуется в ходе метаболизма незаменимой аминокислоты метионина, поступающей с пищей [98,142,179]. В норме содержание общего ГЦ в плазме крови натощак составляет 5-15 мкмоль/л (8-10 мкг/л). Kang S.S. et al. (1992) предложили свою классификацию степени выраженности гипергомоцистеинемии: умеренная или мягкая - 15-30 мкмоль/л, промежуточная - от 30 до 100 мкмоль/л, выраженная - более 100 мкмоль/л. Умеренное увеличение содержания ГЦ может отмечаться в популяции в 5-7% случаев и многими авторами считается фактором риска цереброваскулярных заболеваний [78,107,127,183]. К настоящему моменту наиболее полно изучен внутриклеточный обмен ГЦ, происходящий под влиянием ферментов, в качестве кофакторов которых выступают витамины группы В: В2 (рибофлавин), В6 (пиридоксин), В9 (фолиевая кислота) и В12 (цианокобаламин) [78].
При гипергомоцистеинемии в эндотелии сосудов происходят изменения, повреждающие эндотелиоциты и эластическую мембрану:
стимулируется образование свободных радикалов;
повышается концентрация ЛПНП и ЛПОНП;
снижается продукция эндотелиального релаксирующего фактора и сульфатированных глюкозаминогликанов -геприноидов;
активируются сериновые протеиназы;
снижается синтез простациклина;
стимулируется рост гладкомышечных клеток сосудистой стенки и пролиферация эндотелия.
Так формируется сосудистый компонент тромбоваскулярной болезни, аналогичный естественному развитию атеросклеротического процесса [96,105].
Коагуляционный (тромботический) компонент гипергомоцистеинемии связан с угнетением синтеза тромбомодулина - эндотелиального мембранного белка, без которого тромбин не образует комплекса, активирующего естественные белковые антикоагулянты (протеин С и S), которые не оказывают прессорного воздействия на активность факторов Va и Villa. Одновременно происходит модификация V фактора свёртывания крови, в результате он становится нечувствительным по отношению к протеину С, падает активность антитромбина III и эндогенного гепарина, в результате происходит повышение активности тромбина. Снижается выработка тканевого активатора плазминогена. Макрофаги усиленно вырабатывают тканевый фактор. Описанные процессы приводят к дополнительному повышению коагуляционных свойств крови. При гипергомоцистеинемии возрастает агрегационная способность тромбоцитов вследствие активации арахидонового каскада и повышения чувствительности тромбоцитов к АДФ (результат угнетения экто-АДФ-азы) и тромбину (следствие ускорения мобилизации арахидоната из липидов мембраны). В крови возрастает антигенность по отношению к активатору ингибитора плазмина-1 [10,26,37, 71]. Данный фермент катализирует превращение 5,10 метилентетрагидрофолата в 5-метилтетрагидро-фолат. Последний является донором метильных групп для реметилирования гомоцистеина в синтезе метионина [98,174]. В эти же годы доказано, что повышение уровня ГЦ в плазме крови является независимым фактором риска развития сосудистых осложнений. В 1993 году ген MTHFR был клонирован, что сделало возможным изучение его вариантов. Ген MTHFR расположен на коротком плече 1-й хромосомы. Он состоит из 11 экзонов [67]. Среди распространенных полиморфных вариантов наиболее изученными являются варианты 677 CТ и 1298 АС гена MTHFR. В первом случае нуклеотид цитозин (С) в позиции 677 CТ экзона 4 заменён на тимидин (Т), что ведёт к замене аминокислотного остатка аланина на остаток валина в сайте связывания фолата. Такой полиморфизм обозначается символом 677 CТ [73]. У лиц, гомозиготных и гетерозиготных по данной мутации, отмечается термолабильность MTHFR и снижении активности фермента примерно до 70 и 35% соответственно [67,72,77,104,174]. Кроме того, у лиц, гомозиготных по 677-аллелю, отмечается развитие гипергомоцистеинемии. Однако уровень гомоцистеина у лиц с генотипом ТТ может быть снижен при добавлении в пищу фолиевой кислоты [98,125,137,141]. Распространенность мутантного аллеля 677Т гена MTHFR в популяциях мира характеризуется географической и этнической вариабельностью. Данные, опубликованные Ergbersenet A. et al. (1995), Kang S.S.et al. (1991) [128], говорят о том, что частота гетерозиготного носительства этого аллеля в популяции достигает 40%, гомозиготного носительства - от 5 до 14% у лиц европейской расы, при сосудистых заболеваниях цифра намного выше - от 17 до 28% [93,116]. Чаще данный аллель встречается у испанцев, достигая 55%, и снижаясь до 6% у африканцев, аборигенов Австралии и Шри-Ланки [70,74]. В Европе наименьшая частота аллеля 677Т обнаружена у скандинавов. В ряде европейских популяций (французская, турецкая, английская) частота встречаемости данной мутации высока [7,67]. Интересно, что в Европе частота встречаемости аллеля 677Т имеет тенденцию к увеличению от севера к югу, возможно, это связано с более высоким содержанием фолатов в питании жителей Средиземноморья. Независимо от региона, наличие аллеля 677Т связано с повышением уровня ГЦ в плазме крови [70,116], у гомозиготных носителей это повышение выражено в большей степени, чем у гетерозиготных носителей [122,128].
Другим вариантом полиморфизма гена MTHFR является миссенс мутация аденина (А) на цитозин (С) в позиции 1298 АС (А1298С). Это приводит к замене остатка глутамина на остаток аланина в регуляторном домене фермента, что сопровождается небольшим снижением его активности. У лиц, гомозиготных по мутации 1298 АС, отмечается снижение активности фермента MTHFR до 60%. Гетерозиготность или гомозиготность по данной мутации не сопровождается ни повышением концентрации общего ГЦ, ни снижением уровня фолата в плазме [73,164,179,185]. Однако комбинация гетерозиготности аллелей 677Т и 1298С сопровождается снижением активности фермента, повышением концентрации ГЦ в плазме и снижением уровня фолата, как при гомозиготности 677Т [87]. Наследственно обусловленные нарушения обмена ГЦ могут быть связаны с мутационными повреждениями в гене цистатионин-р-синтазы. Гетерозиготные мутации в этом гене встречаются в популяции менее чем в 1% случаев и вызывают умеренное или выраженное повышение уровня ГЦ в крови. Гомозиготное носительство - редкое явление. Оно сопровождается выраженным повышением ГЦ в плазме крови и гомоцистинурией [112]