Изучение транспорта Ti-плазмида pGV3850 из Agrobacterium tumefaciens в Escherichia coli Великов, Владимир Александрович

Короткий опис

Великов,ВладимирАлександрович.ИзучениетранспортаTi-плазмидаpGV3850изAgrobacteriumtumefaciensвEscherichiacoli: диссертация ... кандидата биологических наук : 03.00.07. - Пущино, 1999. - 112 с. : ил.больше
Цитаты из текста:

стр. 1
ИМ. АКАДЕМИКОВ М.М.ШЕМЯКИНА И Ю . А . О В Ч И Н Н И К О В А РАН На правах рукописи БЕЛИКОВВЛАДИМИРАЛЕКСАНДРОВИЧИ З У Ч Е Н И ЕТРАНСПОРТАTi-ПЛАЗМИДЫpGV3850ИЗAGROBACTERIUMTUMEFACIENSВESCHERICHIACOLI03.00.07 - микробиология диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук

стр. 4
перенос Ti-плазмидыpGV3850изAgrobacteriumtumefaciensвEscherichiacoli. 3.2. Перенос Ti-плазмидыpGV3850изAgrobacteriumtumefaciensвEscherichiacoliв условиях, индуцирующих экспрессию уг>-генов. 3.3. А н а л и з трансконъюгантов. 3.4. Рестрикционный и гибридизационный анализплазмид, полу­ ченных

стр. 53
конъюгативных скрещиваний. 53 54 РЕЗУЛЬТАТЫ 3.1. Конъюгационный перенос Ti-плазмидыpGV3850изAgrobacteriumtumefaciensвEscherichiacoli. П р и проведении межродовых скрещиваний ш т а м м а А.tumefaciensC58Cl(pGV3850) с тремя различными реципиентными ш т а м м а м и Е.соН в каждом эксперименте наблюдалось

Оглавление диссертациикандидат биологических наук Великов, Владимир Александрович
СОДЕРЖАНИЕ
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
ВВЕДЕНИЕ
ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1. Взаимоотношения фитопатогенных агробактерий с растениями
1.1.1. "Генетическая колонизация"
1.1.2. Структурно-функциональная организация Тьплазмид
1.2. Гены коньюгационного переноса Тьплазмид и регуляция
их экспрессии
1.2.1. Перенос Тьплазмид при конъюгации бактерий
1.2.2. Организация генов коньюгационного переноса Тьплазмид
1.2.3. Экспрессия генов коньюгационного переноса Тьплазмид
1.2.4. Гомология системы коньюгационного переноса Тьплазмид
с другими системами
1.3. Хромосомные гены вирулентности агробактерий
1.3.1. Хромосомные мутации, влияющие на патогенность микроорганизма
1.3.2. Сходство ранних этапов взаимодействия Agrobacterium и ЯкггоЫит с растениями
1.4. Ть и Ил-плазмидные гены вирулентности агробактерий и регуляция их экспрессии
1.4.1. Организация у/У-генов Тьплазмид
1.4.2. Экспрессия угУ-генов Тьплазмид
1.5. Процессинг Т-ДНК в бактериальной клетке и ее перенос в клетки растений
1.5.1. Формы процессированной Т-ДНК
1.5.2. Конъюгативная модель переноса Т-ДНК
1.6. Структурно-функциональное сходство vir- и /га-генов как доказательство конъюгативной модели
1.7. Взаимодействие систем переноса ДНК Ti-плазмид
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Материалы
2.1.1. Оборудование
1.1.2. Реактивы и ферменты
2.1.3. Бактериальные штаммы и плазмиды
2.1.4. Растения
2.1.5. Среды, растворы
2.2. Методы
2.2.1. Проведение скрещиваний между Agrobacterium tumefaciens и Escherichia coli
2.2.2. Проведение скрещиваний в условиях, индуцирующих экспрессию v/л-генов
2.2.3. Анализ трансконъюгантов
2.2.4. Быстрое выделение небольших количеств плазмидной
ДНК методом щелочного лизиса
2.2.5. Модифицированный метод скрининга плазмид в геле
по Секару
2.2.6. Модифицированный метод выделения плазмидной ДНК
по Бирнбойму и Доли
2.2.7. Скрингинг плазмид в геле по Экхардту
2.2.8. Выделение тотальной ДНК из клеток E.coli
2.2.9. Приготовление компетентных клеток E.coli и их трансформация препартами плазмидной ДНК
2.2.10. Выделение фрагментов ДНК из агарозного геля
2.2.11. Приготовление ДНК-зондов и и блот-гибридизация ДНК
2.2.12. Введение векторных плазмид в Erwinia carotovora и эксперименты по трансформации растений
2.2.13. Клонирование ДНК
РЕЗУЛЬТАТЫ
3.1. Конъюгационный перенос Ti-плазмиды pGV3850 из Agrobacterium tumefaciens в Escherichia coli
3.2. Перенос Ti-плазмиды pGV3850 из Agrobacterium tumefaciens в Escherichia coli в условиях, индуцирующих экспрессию уг>-генов
3.3. Анализ трансконъюгантов
3.4. Рестрикционный и гибридизационный анализ плазмид, полученных при скрещиваниях в условиях экспрессии Wr-генов
3.5. Клонирование у/>-области Ti-плазмиды pGV3850
3.6. Введение Wr-генов Agrobacterium tumefaciens в Erwinia carotovora и использование эрвинии в экспериментах по трансформации растений
3.7. Способ предотвращения размножения клеток Agrobacterium и Erwinia на среде для культивирования трансформируемых тканей растений
3.8. Скрещивания штаммов Agrobacterium tumefaciens, содержащих плазмиды бинарной векторной системы трансформации растений, с Escherichia coli
ОБСУЖДЕНИЕ
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ