Калиевые каналы гладкомышечных клеток артерий крыс в раннем постнатальном онтогенезе Швецова Анастасия Алексеевна

Короткий опис

Швецова,АнастасияАлексеевна.Калиевыеканалыгладкомышечныхклетокартерийкрысвраннемпостнатальномонтогенезе: диссертация ... кандидата биологических наук : 03.03.01 /ШвецоваАнастасияАлексеевна; [Место защиты: Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова]. - Москва, 2019. - 159 с. : ил.больше
Цитаты из текста:

стр. 1
МОСКОВСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ имени М.В.ЛОМОНОСОВА Биологический ФАКУЛЬТЕТ На правах рукописиШвецоваАнастасияАлексеевнаКАЛИЕВЫЕКАНАЛЫГЛАДКОМЫШЕЧНЫХКЛЕТОКАРТЕРИЙКРЫСВРАННЕМПОСТНАТАЛЬНОМОНТОГЕНЕЗЕСпециальность 03.03.01 Физиология Диссертация на соискание ученой степени кандидата

стр. 2
входящего выпрямления (Kir) .............................................................. 22 1.1.4 ATP-чувствительныекалиевыеканалы(KATPканалы) .................................................... 24 1.1.5Калиевыеканалы, имеющие две порообразующие петли (K2Pканалы) ........................ 25 1.2 Регуляция активностикалиевыхканаловпротеинкиназами вгладкомышечныхклеткахсосудов...

стр. 14
гладкой мышцеартерий1.1.1 Потенциал-зависимыекалиевыеканалы(Kvканалы) Потенциал-зависимыекалиевыеканалы(Kvканалы) обширное семействокалиевыхканалов, активность которых возрастает при деполяризации мембраны. Пора Kvканалаобразована четырьмя α-субъединицами, каждая из которых образована шестью

Оглавление диссертациикандидат наук Швецова Анастасия Алексеевна
ВВЕДЕНИЕ
1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1 Строение и функции различных семейств калиевых каналов в гладкой мышце артерий
1.1.1 Потенциал-зависимые калиевые каналы (Kv каналы)
1.1.1.1 Потенциал-зависимые калиевые каналы первого и второго подсемейств (К^1 и ^2 каналы)
1.1.1.2 Потенциал-зависимые калиевые каналы седьмого подсемейства (К^7 каналы)
1.1.2 Кальций-активируемые калиевые каналы большой проводимости (BKCa каналы)
1.1.3 Калиевые каналы входящего выпрямления (Kir)
1.1.4 ATP-чувствительные калиевые каналы (КАТр каналы)
1.1.5 Калиевые каналы, имеющие две порообразующие петли (К2Р каналы)
1.2 Регуляция активности калиевых каналов протеинкиназами в гладкомышечных клетках сосудов
1.2.1 Регуляция активности К,1 и К2 каналов
1.2.2 Регуляция активности К,7 каналов
1.2.3 Регуляция активности ВКСа каналов
1.2.4 Регуляция активности К- каналов
1.2.5 Регуляция активности КАТР каналов
1.2.6 Регуляция активности К2Р каналов
1.3 Изменения антиконстрикторной роли калиевых каналов в различных регионах сосудистого русла при взрослении организма
1.3.1 Возрастные изменения калиевых каналов в сосудах легких
1.3.2 Возрастные изменения калиевых каналов в сосудах мозга
1.3.3 Возрастные изменения калиевых каналов в артериях эластического типа
2 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
2.1 Экспериментальные животные
2.1.1 Возрастные группы крыс для изучения функционирования сердечно-сосудистой системы в постнатальном онтогенезе
2.1.2 Экспериментальная модель неонатальной десимпатизации крыс с использованием гуанетидина
2.1.2.1 Протокол введения гуанетидина
2.1.2.2 Визуализация адренергических нервных волокон в стенке артерий
2.2 Исследование сократительных ответов изолированных артерий в изометрическом режиме

2.2.1 Объект исследования
2.2.2 Оборудование и состав физиологического раствора
2.2.3 Удаление эндотелия
2.2.4 Определение оптимального растяжения препарата
2.2.5 Активация препарата и проверка удаления эндотелия
2.2.6 Протокол эксперимента
2.2.7 Обработка результатов
2.3 Эксперименты по измерению мембранного потенциала гладкой мышцы артерий
2.3.1 Экспериментальная установка
2.3.2 Подготовка микроэлектродов
2.3.3 Оценка положения микроэлектрода относительно клетки и критерии успешной записи мембранного потенциала
2.3.4 Протокол эксперимента
2.3.5 Обработка результатов
2.4 Определение содержания мРНК методом полимеразной цепной реакции в реальном времени
2.4.1 Выделение и хранение материала
2.4.2 Выделение РНК и проведение обратной транскрипции
2.4.3 Проведение полимеразной цепной реакции в реальном времени
2.4.4 Определение эффективности праймеров
2.4.5 Обработка результатов
2.5 Определение содержания белков в ткани артерий методом Western Blotting
2.5.1 Выделение и хранение материала
2.5.2 Приготовление тканевых экстрактов
2.5.3 Разделение белков методом гель-электрофореза и электроперенос белков
2.5.4 Детекция белков с помощью антител
2.5.5 Обработка результатов
2.6 Эксперименты по регистрации артериального давления и частоты сердечных сокращений у наркотизированных крыс
2.6.1 Изготовление катетеров
2.6.2 Операция по имплантации катетеров
2.6.3 Экспериментальная установка
2.6.4 Протокол эксперимента
2.6.5 Обработка результатов
2.7 Статистическая обработка результатов
3 РЕЗУЛЬТАТЫ
3. 1 Исследование роли калиевых каналов в регуляции сократительных ответов артерий крыс в возрасте 2-3 месяцев и 10-15 дней
3.1.1 Характеристики подкожной артерии крыс разного возраста
3.1.2 Влияние блокады КАТР каналов на сократительные ответы подкожной артерии крыс разного возраста
3.1.3 Влияние блокады ВКСа каналов на сократительные ответы подкожной артерии крыс разного возраста
3.1.4 Влияние блокады К каналов на сократительные ответы подкожной артерии крыс разного возраста
3.1.5 Влияние блокады К^ и К2 каналов на сократительные ответы подкожной артерии крыс разного возраста
3.1.6 Влияние блокады К,7 каналов на сокращение артерий крыс разного возраста
3.1.6.1 Влияние блокаторов К,7 каналов на сократительные ответы подкожной артерии крыс разного возраста
3.1.6.2 Влияние трансмурального давления на выраженность эффектов блокады К,7 каналов в артериях крыс в возрасте 2-3 месяцев
3.1.6.3 Влияние размера артерии на выраженность эффектов блокады К,7 каналов
3.1.7 Влияние блокады TASK-1 каналов на сократительные ответы подкожной артерии крыс разного возраста
3.2 Исследование влияния калиевых каналов на уровень мембранного потенциала гладкой мышцы артерий в возрасте 2-3 месяцев и 10-15 дней
3.2.1 Характеристики подкожной артерии крыс разного возраста в экспериментах по измерению мембранного потенциала
3.2.2 Влияние блокады К- каналов на мембранный потенциал гладкой мышцы подкожной артерии крыс разного возраста
3.2.3 Влияние блокады К,7 каналов на мембранный потенциал гладкой мышцы подкожной артерии крыс разного возраста
3.2.4 Влияние блокады TASK-1 каналов на мембранный потенциал гладкой мышцы подкожной артерии крыс разного возраста
3.3 Исследование экспрессии мРНК калиевых каналов в подкожной артерии крыс в возрасте 2-3 месяцев и 10-15 дней
3.4 Исследование содержания белков калиевых каналов в подкожной артерии крыс в возрасте 2-3 месяцев и 10-15 дней
3.4.1 Содержание белка Kv7.4 и Kcne4 субъединиц в артериях крыс разного возраста
3.4.2 Содержание белка TASK-1 в артериях крыс разного возраста
3.5 Исследование роли калиевых каналов в регуляции системного артериального давления у крыс разного возраста
3.5.1 Показатели системной гемодинамики крыс разного возраста
3.5.2 Влияние блокады TASK-1 каналов на показатели системной гемодинамики у крыс разного возраста
3.6 Исследование роли калиевых каналов в регуляции тонуса артерий
у крыс с хронической неонатальной десимпатизацией
3.6.1 Влияние десимпатизации на массу тела животных и характеристики подкожной артерии
3.6.2 Влияние блокады Kir, Kv7 и TASK-1 каналов на сократительные ответы артерий десимпатизированных крыс
3.6.3 Содержание мРНК Kir и K2P каналов в подкожной артерии десимпатизированных крыс
4 ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
4.1 План обсуждения результатов
4.2 Антиконстрикторное влияние калиевых каналов в артериях крыс разного возраста: объект и подходы к исследованию
4.3 KATP каналы не оказывают антиконстрикторного влияния в подкожной артерии крыс обеих возрастных групп
4.4 Антиконстрикторная роль BKCa каналов в подкожной артерии крысы в период раннего постнатального онтогенеза менее выражена, чем во взрослом возрасте
4.5 Антиконстрикторная роль Kir каналов в подкожной артерии крысы более выражена в период раннего постнатального онтогенеза, чем во взрослом возрасте
4.6 Из всех подсемейств Kv, Kv7 каналы обладают наиболее выраженным антиконстрикторным влиянием в подкожной артерии крысы в период раннего постнатального онтогенеза
4.6.1 Kv1 каналы оказывают антиконстрикторное влияние в артериях крысят, а влияние Kv2 каналов отсутствует в обеих возрастных группах
4.6.2 Антиконстрикторное влияние Kv7 каналов в артериях крысят значительно выше, чем во взрослом возрасте
4.6.3 Анализ результатов исследований других авторов, преимущества данной работы
4.7 Антиконстрикторное влияние TASK-1 каналов ярко выражено в период раннего постнатального онтогенеза, но не проявляется в артериях взрослых животных
4.7.1 В развивающемся организме влияние TASK-1 каналов уменьшает сократительные ответы подкожной артерии
4.7.2 В развивающемся организме влияние TASK-1 каналов снижает уровень системного артериального давления
4.8 Снижение антиконстрикторной роли Кц-, К,7 и TASK-1 каналов в ходе постнатального онтогенеза не связано с трофическим влиянием симпатических нервов
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
БЛАГОДАРНОСТИ
ПРИЛОЖЕНИЕ А
ПРИЛОЖЕНИЕ Б
ВВЕДЕНИЕ