Липазы грибов Cospora lactis и Rhizopus microsporus. Биохимические аспекты Давранов, Кахрамон

Короткий опис

Давранов,Кахрамон.ЛипазыгрибовCosporalactisиRhizopusmicrosporus.Биохимическиеаспекты: диссертация ... доктора биологических наук : 03.00.04. - Ташкент, 1984. - 380 с. : ил.больше
Цитаты из текста:

стр. 1
гI' ssr- ъ/юе -z АКАДЕМИЯ НАУК УЗБЕКСКОЙ ССР ИНСТИТУТ МИКРОБИОЛОГИИ На правах рукописи ДАВРАШВКахрамонУДК 577.153.2^ ЛИПАЗЙГРИБОВOOSPORALACTISИ RHIZQFUS ЖСЮЗрокиз.БИОХИМИЧЕСКИЕАСПЕКТЫСпециальность 0 3 , 0 0 . 0 4 - Биологическая химия Д и с с е р т а ц и я на соискание ученой степени доктора

стр. 3
89-92 92-97 - 4 3.2. ЛокализациялипазСтр. 98-105 3.3. Выделение и очисткалипаз3.3.1. Внутриклеточныелипазы3.3.2. Внеклеточныелипазы3.4. СвойствалипазOospora l a c t i s Ю5-И7 I06-III III-II7 II8-I38 3.4.1. Физико-химические свойствалипазOospora l a c t i s внутриклеточных 1Ю-121 3.4.2. Физико-химические-свойства

стр. 4
различных.молекулярных формлипазгрибаRhizopusmicrosporus. ме­ тодом биоспецифической хроматографии 173 Очистка на бутанол-целлюлозе Очистка на групповом

Оглавление диссертациидоктор биологических наук Давранов, Кахрамон
ВВЕДЕНИЕ.7
ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
ГЛАВА I. СОВРЕМЕННОЕ СОСТОЯНИЕ. ИЗУЧЕНИЯ ЛИПОЛИТИЧЕСКИХ
ФЕРМЕНТОВ .16
1.1. Свойства липаз .20
1.2. Специфичность.24
1.2.1. Влияние физического состояния субстрата на специфичность липаз .25
1.2.2. Специфичность к степени ненасыщенности жирной кислоты субстрата .26
1.2.3. Позиционная специфичность.27
1.2.4. Специфичность-к структуре, ацильного радикала (длине цепи жирных кислот) .30
1.3. Липазы микроорганизмов.31
1.3.1. Распространение .31
1.3.2. Регуляция.37
1.3.3. Локализация .40
1.3.4. Множественные молекулярные. формы липаз и ■ мето*ды их обнаружения.44
1.3.5. Внутриклеточный транспорт и секреция.48
1.3.6. Выделение, очистка и свойства .55
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
ГЛАВА 2. ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.64
2.1. Культуры и условия их выращивания .64
2.1.1. Oospora lactis .64
2.1.2. Rhizopus microsporus .65
2.2. Определение липазной активности .67
2.2.1. Количественное определение .67
2.2.2. Энзимограшш.
2.3. Электронно-микроскопические исследования липаз .68
2.4. Определение углеводного■компонента в молекул лах липаз .74
2.5. Определение концевых аминокислот.76
2.6. Пептидные карты.78
2.7. Выделение гликопептидов .79
2.8. Выявление групп активного центра .81-в
2.9. Методика,получения биоспецифических сорбентов .82а) синтез поликефамида.82б) синтез бутанол-целлкшозы.
2.10. Препаративный электрофорез.84
2.11. Субстратная специфичность
2.12. Определение глубины гидролиза< растительных масел.86
РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСЛСДЕНИЕ
ГЛАВА 3. ЛИПАЗЫ ГРИБА OOSPORA LACTIS.88
3.1. Биосинтез липаз в процессе культивирования. 89
3.1.1. Динамика роста.и изменение липазной.активности .89
3.1.2. Зависимость липазной активности от условий культивирования и множественность форм липазы .92
3.2. Локализация липаз.98
3.3. Выделение и очистка липаз.Ю5
3.3.1. Внутриклеточные липазы .I06-III
3.3.2. Внеклеточные липазы .III-II
3.4. Свойства липаз Oospora lactis .II8-I
3.4.1. Физико-химические свойства внутриклеточных липаз Oospora lactis . .II8-I2I
3.4.2. Физико-химические, свойства внеклеточной ли-f пазы .I2I-I
3.4.3. Каталитические свойства .126
3.4.4. Субстратная специфичность различных форм ли-^ паз Oospora lactis .135
3.5. Молекулярные формы.липазы- Oospora lactis и их взаимосвязь.I38-I4I
3.6. Резюме .I4I-I
ГЛАВА 4. ЛИПАЗЫ ГРИБА RHIZOPUS MICROSPORUS.144
4.1. Изменение активности и изоферментного состава липаз -в процессе культивирования, гриба;, и характеристика липазного комплекса .144
4.1Л. Локализация липаз .148
4.2. Фракционирование липазного комплекса и по^-лучение очищенных форм липаз .156
4.2.1. Выделение и очистка внеклеточных липаз.157
4.2.2? Выделение и очистка внутриклеточных липаз . 160
4.2.3. Разделение и очистка различных молекулярных форм липаз гриба Rhizopus miorosporus. методом биоспецифической хроматографии
Очистка на бутанол-целлюлозе .173
Очистка на групповом сорбенте - поликефамиде .176
4.3. Свойства липаз иЫ-иорив п^огозрогив .183
4.3.1. Физико-химические параметры .183
4.3.2. Специфичность.194
4.3.3. Специфичность к типу реакции .198
4.4. Каталитические свойства .209а) Ионы металлов .209б) Действие солей желчных кислот на активность липаз И111иори.8 паогозрогиз.212в) Альбумин и липазная активность.215
4.5. Структурная характеристика формы 3 липазы . 218-232 4.5.1. Функционально-важные аминокислоты .227
4.6. Ре з юм е.232
ГЛАВА 5. ПШРОДА МНОЖЕСТВЕННОСТИ МОЛЕКУЛЯРНЫХ ФОРМ ЛИПАЗ ГРИБА КШОриБ. МКЛЮЗРСШЗ . И ИХ ВЗАИМОСВЯЗЬ .238
5.1. Белок с я* 0,78 и его характеристика.238
5.1.1. Выделение белка с М 0,78 .244
5.1.2. Свойства белка с ад 0,78 .246
1 1 ' (
5.1.3. Взаимодействие белка о-ВД- 0,78 с различными молекулярными формами липаз .250
5.2. Взаимопревращение различных форм липаз .254
5.3. Гипотетическая схема .возникновения множественности форм липазы .264
5.4. Р е з юм е.270
ГЛАВА 6. РЕЗУЛЬТАТЫ,-ИМЕЮЩИЕ ПРАКТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ . 273
6.1. Новые ферментные препараты .274
6.1.1. Липомикроспорин
6.1.2. Липолактин .274
6.2. Иммобилизованные формы липаз .278
6.3. Применение липаз в пищевой промышленности . 291а) Получение жировых основ .291б) Ферментативный способ расщепления растительных масел.296в) Осветление виноматериалов.и фруктовых соков .298г) Применение, иммобилизованных, форм грибных липаз .300д) Получение заменителя цельного молока . 302-303 6Л. Применение липаз в легкой промышленности . 303-305 6.5. Микрокапсулы с включенными липазами
В Ы В О Д Ы.306
ЛИТ ЕРАТ УРА .309
П ри л о ж е ни я.