Молекулярно-генетический анализ моногенных форм атеросклероза и рака молочной железы у жителей Санкт-Петербурга Мандельштам, Михаил Юрьевич

Короткий опис

Мандельштам,МихаилЮрьевич.Молекулярно-генетическийанализмоногенныхформатеросклерозаиракамолочнойжелезыужителейСанкт-Петербурга: диссертация ... доктора биологических наук : 03.00.04. -Санкт-Петербург, 2005. - 241 с. : ил.больше
Цитаты из текста:

стр. 1
71:06-3/154 РОССИЙСКАЯ АКАДЕМИЯ МЕДИЦИНСКИХ НАУК Научно-исследовательский институт экспериментальной медицины На правах рукописиМАНДЕЛЬШТАММихаилЮрьевичМОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКИИАНАЛИЗМОНОГЕННЫХФОРМАТЕРОСКЛЕРОЗАИРАКАМОЛОЧНОЙЖЕЛЕЗЫУЖИТЕЛЕЙСАНКТ-НЕТЕРБУРГА 03.00.04-Биохимия Диссертация на

стр. 12
12 Цель исследования: На основе данных о снектре мутаций гена рецептора ЛНП у больных СГ и гена BRCA1 у больныхракоммолочнойжелезывСанкт-Петербургеразработать подходы к ДНК-диагностике социально значимыхмоногенныхформатеросклерозаиракамолочнойжелезы. Задачи работы: 1. Изучить спектр мутаций

стр. 58
преобладающие мутации в гене рецептора ЛНП. Ответу на этот вопрос и будет посвящена экспериментальная часть настоящей диссертации. 59 1.2.Ракмолочнойжелезы, обусловленный мутациямн в гене BRCA1. 1.2,1. Особенности семейныхформракамолочнойжелезы. Характерными чертами семейныхформракамолочнойжелезы, в отличие от спорадических, является не только регистрация многих случаев заболевания в родословной, но также...

Оглавление диссертациидоктор биологических наук Мандельштам, Михаил Юрьевич
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
ВВЕДЕНИЕ
Актуальность проблемы
Цель исследования
Задачи работы
Научная новизна
Теоретическое значение работы
Практическое значение работы
Положения, выносимые на защиту
Личный вклад автора
Апробация
Публикации
Структура и объем диссертации
1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1. Семейная гиперхолестеринемия
1.1.1. Общая характеристика заболевания
1.1.2. Риск развития ишемической болезни сердца у носителей 20 мутаций в гене рецептора ЛНП
1.1.3. Место семейной гиперхолестеринемии среди моногенных гиперхолестеринемий
1.1.4. Рецептор липопротеинов низкой плотности - ключевой белок метаболизма холестерина в организме человека. Механизм атеросклероза при семейной гиперхолестеринемии
1.1.5. Диагностика семейной гиперхолестеринемии. Особенности и трудности разных видов диагностики
1.1.6. Структура гена рецептора ЛНП и кодируемого им белка; регуляция работы гена; взаимодействующие с рецептором белки
1.1.7. Спектры мутаций гена рецептора ЛНП в разных этнических группах
1.2. Рак молочной железы, обусловленный мутациями в гене
1.2.1. Особенности семейных форм рака молочной железы
1.2.2. Риск развития рака молочной железы у носительниц мутаций в гене BRCAJ в течение жизни
1.2.3. Структура гена BRCA1 и кодируемого им белка
1.2.4. Белок BRCA1 - ключевой участник репарации двунитевых разрывов в ДНК
1.2.4.1. Механизм развития заболевания при дефектах BRCA
1.2.4.2. Тканеспецифичность возникновения опухолей при мутациях в гене BRCA
1.2.5. Роль гена BRCA1 в развитии рака молочной железы в сопоставлении с другими генами
1.2.6. Современные подходы к клинической диагностике и профилактике семейных форм рака молочной железы
1.2.7. Спектры мутаций гена BRCA1 в разных этнических группах
1.3. Молекулярная диагностика семейной гиперхолестеринемии и семейных форм рака молочной железы: сравнительный аспект 87 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Пациенты
2.2. Выделение ДНК
2.3. Молекулярное клонирование
2.4. Амплификация и анализ ДНК 99 2.4.1. Полимеразная цепная реакция
2.4.2. Идентификация мутации R3500Q (с. 10658 G>A; CGG>CAG) в гене АРОВ с помощью сайт-направленного мутагенеза
2.4.3. Электрофорез продуктов амплификации ДНК в полиакриламидном геле (ПААГ)
2.4.4. Протокол получения и идентификации гетеродуплексов для определения мутаций 185delAG и 5382insC в гене BRCA
2.4.5. Проведение анализа конформационного полиморфизма однонитевых фрагментов ДНК (SSCP-анализ)
2.4.6. Окрашивание ДНК серебром
2.4.7. Проведение электрофореза в агарозном геле 109 ^ 2.4.8. Секвенирование и анализ последовательностей ДНК
2.5. Компьютерный анализ и статистическая обработка данных
3. РЕЗУЛЬТАТЫ
3.1. Изучение спектра мутаций в гене рецептора ЛНП и в гене BRCA1 в популяции Санкт-Петербурга. Общая стратегия исследования
3.2. Поиск мутаций в гене рецептора ЛНП. Особенности идентификации отдельных мутаций в гене рецептора ЛНП
3.3. Идентификация и изучение частоты встречаемости полиморфных маркеров в гене рецептора ЛНП
3.4. Изучение встречаемости широко распространенной мутации
R3500Q в гене АРОВ у больных семейной гиперхолестеринемией
Санкт-Петербурга
3.5. Поиск часто встречающихся в мире мутаций в гене BRCA1: 185delAG, 5382insC и C61G
3.6. Характеристика мутаций, найденных в одиннадцатом экзоне гена BRCA
3.7. Идентификация и изучение частоты встречаемости полиморфных маркеров в гене BRCA
3.8. Подготовка Интернет-ресурсов по молекулярной генетике семейной гиперхолестеринемии и наследуемых форм рака молочной железы
4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
4.1. Значение мутаций в гене рецептора ЛНП для развития семейной гиперхолестеринемии
4.2. Значение обнаруженных мутаций в гене BRCA1 для развития 154 рака молочной железы
4.3. Особенности спектра мутаций гена рецептора ЛНП и гена
BRCA1 России и Санкт-Петербурга
4.3.1. Сравнение спектра мутаций гена рецептора ЛНП в Санкт-Петербурге и в других популяциях мира
4.3.2. Сравнение спектра мутаций гена BRCA1 в Санкт-Петербурге и в других популяциях мира
4.3.3. Сравнение генетического разнообразия гена рецептора ЛНП и гена BRCA
4.4. Особенности и трудности ДНК-диагностики семейной гиперхолестеринемии и семейных форм рака молочной железы. Практическое значение работы
4.4.1. О наличии преобладающих мутаций в гене рецептора ЛНП и в генqBRCAI
4.4.2. Эффективность ДНК-диагностики
4.4.2.1. Возможный вклад других локусов в развитие моногенных форм гиперхолестеринемий и рака молочной железы у жителей Санкт-Петербурга
4.4.2.2. Проблемы эффективности поиска мутаций внутри генов
4.4.3. Результаты консультирования в семьях пробандов.
Перспективы в диагностике семейной гиперхолестеринемии и семейных форм рака молочной железы