Молекулярные механизмы резистентности к ингибиторам метилтрансферазы EZH2 при светлоклеточной карциноме яичника с мутацией в гене ARID1A Фатхутдинов Наиль Рамилевич

Короткий опис

Фатхутдинов,НаильРамилевич.МолекулярныемеханизмырезистентностикингибиторамметилтрансферазыEZH2присветлоклеточнойкарциномеяичникасмутациейвгенеARID1A: диссертация ... кандидата биологических наук : 03.01.04 /ФатхутдиновНаильРамилевич; [Место защиты: ФГАОУ ВО «Казанский (Приволжский) федеральный университет»]. - Казань, 2020. - 137 с. : ил.больше
Цитаты из текста:

стр. 1
рукописиФатхутдиновНаильРамилевичМолекулярныемеханизмырезистентностикингибиторамметилтрансферазыEZH2присветлоклеточнойкарциномеяичникасмутациейвгенеARID1A 03.01.04 биохимия Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: д.б.н., доцент Киямова

стр. 71
SMARCA4 отвечает зарезистентностькингибиторамEZH2присветлоклеточнойкарциномеяичникасмутациейвгенеARID1A (Рис. 17). Следовательно, представляет интерес выявлениегенов, вовлеченных вмеханизмыхимиорезистентности клетоксветлоклеточнойкарциномыяичникасмутациейвгенеARID1A среди техгенов,

стр. 88
[95]. Однако, через какое-то время опухолевые клетки становятся резистентны к действиюингибиторовметилтрансферазыEZH2, поэтому целью данной работы было идентифицироватьмолекулярныемеханизмырезистентностикингибиторамметилтрансферазыEZH2присветлоклеточнойкарциномеяичникасмутациейвгенеARID1A и подборингибиторовдля преодоления этойрезистентности. Для начала...

Оглавление диссертациикандидат наук Фатхутдинов Наиль Рамилевич
ВВЕДЕНИЕ
ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1 Рак яичника: общие сведения и клиническая картина
1.1.1 Эпителиальный рак яичника
1.2.1 Светлоклеточная карцинома яичника
1.2 Белковый комплекс ремоделирования нуклеосом SWI/SNF
1.2.1 Отроение и функции комплекса ремоделирования нуклеосом SWI/SNF18
1.2.2 Функциональная роль SMARCA2 и SMARCA4
1.2.3. Функциональная роль ARID1A
1.3 Строение и функции комплекса регуляции структуры хроматина РЯО2
1.3.1. Метилтрансфераза Е7Н2 как каталитическая субъединица комплекса РЯО2
1.3.1 Роль метилтрансферазы Е7Н2 в онкогенезе
1.3.2. Антагонизм между белковыми комплексами РЯО2 и SWI/SNF
1.3.3. Резистентность к ингибиторам Е7Н2 при светлоклеточной карциноме яичника
1.3.4. Резистентность к принятным методам лечения при раке яичника
1.4. Клеточные пути регуляции апоптоза
1.4.1. Общий обзор клеточных путей регуляции апоптоза
1.4.2. Семейство белков BCL2 в регуляции апоптоза
1.4.3. Ингибиторы ВН3-белков
1.4.4. Апоптоз и рак яичника
1.5 Заключение
ГЛАВА 2. Материалы и методы исследования
2.1. Объект и предмет исследования
2.2. In vitro эксперименты на культурах клеток ЭРЯ человека
2.2.1. Исследование пролиферации опухолевых клеток in vitro
2.2.2. Расчет комбинационного индекса
2.2.3. Инфекция лентивирусными частицами
2.2.4. Нокдаун с использованием кшРНК
2.2.5. Анализ экспрессии белков методом вестерн-блоттинга
2.2.6. Анализ коиммунопреципитации белков
2.2.7. Анализ композиции комплексов SWI/SNF в градиенте сахарозы
2.2.8. Анализ коиммунопреципитации хроматина
2.2.9. Выделение РНК и количественная полимеразная цепная реакция
2.2.10. Секвенирование РНК и биоинформатический анализ
2.2.11. Иммуногистохимическое окрашивание и анализ
2.2.12. Статистическая обработка данных
2.3. Реактивы и оборудование
ГЛАВА 3. Результаты исследований
61
3.1. Определение роли комплекса ремоделирования хроматина SWI/SNF в выработке резистентности к ингибиторам метилтрансферазы Е7Н2 на модели светлоклеточной карциномы яичника с мутацией в гене ARID1A
3.1.1. Получение и характеристика модельной клеточной линии светлоклеточной карциномы яичника ТОУ2Ш, резистентной к ингибиторам метилтрансферазы Е7Н2
3.1.2 Определение влияния резистентности к ингибиторам Е7Н2 на состав комплекса SWI/SNF
3.1.3 Влияние SMARCA4 на изменение экспрессии каталитических субъединиц SWI/SNF и резистентность к ингибиторам EZH2
3.2. Выявление потенциальных мишеней для фармакологического воздействия в клетках светлоклеточной карциномы яичника с мутацией в гене ARID1A, резистентных к ингибиторам метилтрансферазы EZH2
3.2.1 Определение мишеней SMARCA4, с повышенной экспрессией в резистентных клетках светлоклеточной карциномы яичника
3.2.2. Определение эффективности ингибирования BCL2 in vitro на моделях светлоклеточной карциномы яичника, резистентных к ингибиторам EZH2
3.2.3 Определение эффективности ингибирования BCL2 in vivo на моделях светлоклеточной карциномы яичника, резистентных к ингибиторам EZH2
3.3. Выбор ингибиторов для увеличения эффективности таргетной терапии светлоклеточной карциномы яичника с мутацией в гене ARID1A
3.3.1. Определение эффективности комбинации ингибиторов ABT263 и GSK126 клетках светлоклеточной карциномы яичника с мутацией в гене ARID1A in vitro и in vivo
3.3.2. Определение влияния экспрессии ARID1A на эффективность комбинации ингибиторов АВТ263 и GSK126 на клетки светлоклеточной карциномы яичника
ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ
ПРИЛОЖЕНИЕ