Получение и некоторые свойства менингококковой IgAl-протеазы Теймуразов, Марат Георгиевич

Короткий опис

Теймуразов,МаратГеоргиевич.ПолучениеинекоторыесвойстваменингококковойIgAl-протеазы: диссертация ... кандидата биологических наук : 03.00.23. - Оболенск, 2006. - 101 с. : ил.больше
Цитаты из текста:

стр. 1
микробнологни и бнотехнологии На правах рукописиТеймуразовМаратГеоргиевичПолучениеинекоторыесвойстваменннгококковойIgAl-нротеазы Диссертация на соискание

стр. 21
фермента - ккет), которые оказались типичными дляпротеаз. Кинетическое поведениеIgAl-протеазописывается уравнением Михаэлиса-Ментен [45,46]. 1.1.5. ОчисткаIgAl-протеазиIgAlОчисткаIgAl-протеазиз культуральной жидкости описана в ряде экспериментальных и обзорных статей. Например,IgAl-протеаза

стр. 52
СвойстваIgAl-протеазы2.4.1 Определение изоэлектрической точкиIgAl-протеазыОпределение изоэлектрической точкиIgAl-протеазыпроводили методом ИЭФ, Использовался

Оглавление диссертациикандидат биологических наук Теймуразов, Марат Георгиевич
ВВЕДЕНИЕ
1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1 Характеристика IgA-протеаз
1.1.1 Открытие IgA-протеаз
1.1.2 Секреторный иммунитет. Структура сывороточного и секреторного IgA
1.1.3 Структура генов IgA-протеаз и экспрессия их продуктов в грамотрицательных бактериях
1.1.4 Методы обнаружения IgA-протеаз и определение активности
1.1.5 Очистка IgA 1 -протеаз и IgA
1.1.6 Гидролиз IgAl и специфичность IgA-протеаз
1.1.7 IgAl-протеазы как фактор вирулентности
1.2 Проблема вакцинации против менингита и менингококковая IgAl-протеаза
1.3 Факторы патогенности и вирулентности N.meningitidis
1.4 Питательные среды для культивирования менингококков
2 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ 36 2.1 Микроорганизмы, задействованные в работе и методики по работе с ними
2.1.1 Проверка биохимических, морфологических и серологических свойств N. meningitidis
2.1.2 Определение чувствительности штаммов N.meningitidis к антибактериальным препаратам
2.1.3 Подбор питательной среды для штаммов N. meningitidis
2.1.4 Подготовка посевного материала
2.1.5 Глубинное культивирование штаммов N. meningitidis
2.2 Определение ферментативной активности IgAl-протеазы
2.2.1 Выделение иммунохимически чистых IgAl и IgA
2.2.2 Иммунизация животных
2.2.3 Выделение IgG из кроличьей антисыворотки
2.2.4 Получение конъюгата антител к IgA с пероксидазой хрена
2.2.5 Определение разведения конъюгата
2.2.6 Качественный метод определения ферментативной активности IgAl-протеазы методом ИФА
2.2.7 Количественный метод определения ферментативной активности IgAl-протеазы
2.3 Выделение и очистка IgA-иротеазы
2.3.1 Предварительная обработка культуральной жидкости и концентрирование
2.3.2 Очистка на высокопористом силохроме
2.3.3 Очистка на фенилсефарозе
2.3.4 Гель-фильтрация
2.4 Свойства IgAl-протеазы
2.4.1 Определение изоэлектрической точки IgAl-протеазы
2.4.2 Определение констант ингибирования IgAl-протеазы 53 СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
3 Культивирование N. meningitidis
3.1 Проверка морфологических, биохимических и серологических свойств штаммов N. meningitidis
3.2 Определение чувствительности штаммов N. meningitidis к антибактериальным препаратам
3.3 Подбор плотной питательной среды для штаммов
N. meningitidis
3.4 Подбор жидкой питательной среды для штаммов
N. meningitidis
3.5 Выбор штамма N. meningitidis для культивирования
3.6 Подготовка посевного материала
3.7 Глубинное культивирование штаммов N. meningitidis
4 Определение ферментативной активности IgAl- 68 протеазы
4.1 Качественный метод определения ферментативной активности IgA 1 -протеазы
4.2 Количественный метод определения ферментативной активности IgAl-протеазы
5 Выделение и очистка IgAl-протеазы
5.1 Предварительная обработка культуральной жидкости
5.2 Очистка на высокопористом силохроме
5.3 Гидрофобная хроматография на фенилсефарозе
5.4 Гель-фильтрация на сефарозе CL-6B
5.5 Схема очистки и данные по выходу фермента
6 Свойства IgAl-протеазы 85 6.1 Определение молекулярной массы IgAl - протеазы
6.2 Определение изоэлектрической точки IgAl - протеазы