Структурная характеристика клонированных генов (кДНК) кодирующих альфа- и гамма-кристаллины лягушки Rana temporaria Зиновьева, Рина Дмитриевна

Короткий опис

Зиновьева,РинаДмитриевна.Структурнаяхарактеристикаклонированныхгенов(кДНК)кодирующихальфа-игамма-кристаллинылягушкиRanatemporaria: диссертация ... кандидата биологических наук : 03.00.15. - Москва, 1984. - 168 с. : ил.больше
Цитаты из текста:

стр. 1
/Л </V - f v.- ^.,v АКАДЕМИЯ НАУК СССР ИНСТИТУТ БИОДОГИИ РАЗВИТИЯ им, Н.К.КОЛЬЦОВА На правах рукописиЗИНОВЬЕВАРинаДмитриевнаУДК 577.1СТРУКТУРНАЯХАРАКТЕРИСТИКАКЛОНИРОВАННЫХГЕНОВ( к Д Н К ) , КОДИРУЩИХ еС" И (f-КРИСТАЛЛИНЫЛЯГУЖИRANATEMPORARIA03,00,15 - генетжа Диссертация на соискание ученой

стр. 2
организациягенов, входящих в состав семейств 1.8, Сравнение нуклеотидных последовательностейгенов, входящих в состав семейств 1.9, Семействагенов,кодирующихкристаллиныхруста­ лика глаза • . , , , , , , , , , , , , • , , • 1.9.1,Гены,кодирующие^-кристаллины, • , , , , 1.9.2, 1.9.3, 1.9.4, 1.9.5,Гены,кодирующие/ff-кристаллиныГены,кодирующие(^-кристаллины, , , , . .Гены,...

стр. 9
последовательности ДНК. Результатом настоящей работы явилось выделениеклонированныхкДНК-генов, кодиррэщих полипептиды ^ - и ^-кристалликов, дока­ зательство множественностигенов,кодирующих/-кристаллиныля­ гушки, определение первичной структуры двухгенов, один из кото­ рыхкодирует/-кристаллин, а другой «з^А2~кристаллин, Детальный анализ полученныхструктурныхданных позволил сде­ лать выводы о структуре...

Оглавление диссертациикандидат биологических наук Зиновьева, Рина Дмитриевна
ВВЕДЕНИЕ.
I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ: Семейства генов: организация и структура.
1.1. ВВЕДЕНИЕ.
1.2. Определение семейства генов.
1.3. Как образуются семейства генов?.II
1.4. Гены и псевдогены.
1.5. Размеры семейства генов.
1.6. Организация семейств генов
1.7. Интронно-экзонная организация генов, входящих в состав семейств.
1.8. Сравнение нуклеотидных последовательностей генов, входящих в состав семейств.
1.9. Семейства генов, кодирующих кристаллины хрусталика глаза
1.9.1. Гены, кодирующие ^-кристаллины.
1.9.2. Гены, кодирующие yff-кристаллины.
1.9.3. Гены, кодирующие ^-кристаллины.
1.9.4. Гены, кодирующие И -кристаллины.
1.9.5. Регуляция активности кристаллиновых генов, 47 П. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.
П.1. Объект исследования.
П. 2. Препаративное выделение плазмидной ДНК . 50 П.З. Очистка плазмидной ДНК центрифугированием в градиенте плотности хлористого цезия.
П.4. Расщепление ДНК с помощью рестрикционных эндонуклеаз.
П. 5. Электрофоретический анализ ДНК.
П. 5.1. Электрофорез ДНК в агарозном геле.
П. 5.2. Электрофорез ДНК в полиакриламидном геле
П. 6. Детекция фрагментов ДНК.
П. 7. Гибрид-селектированная трансляция.
П.7.1. Иммобилизация плазмидной ДНК на нитроцеллюлозных фильтрах
П.7.2. Гибридизация поли(А+)РНК с иммобилизованной на нитроцеллюло зных фильтрах
32Р]-ДНК.
П.7.3. Трансляция индивидуальной мНЖ в бесклеточной системе ретикулоцитов кролика . 59 П.8. Электрофорез продуктов трансляции в 12,5^
ПААГ-ДДС-На
П. 9. Иммунопрецшштация продуктов трансляции РНК. . 61 П. 10. Детекция меченых полипептидов в ПААГ-ДДС-тта . 63 П.II. Мечение ДНК in vitro с помощью метода никтрансляции.
П. 12. Перенос РНК на нитроцеллюлозу и гибридизация с [32Р]-ДНК.
П. 13. Мечение 3—концов рестрикционных фрагментов ДНК с помощью Кленовского фрагмента ДНК-полимеразы I е, coli.
П. 14. Мечение рестрикционных фрагментов ДНК по 5'концам с помощью полинуклеотидкиназы.
П. 15. Разделение комплементарных цепей меченых фрагментов ДНК в ПМГ.
П. 16. Элвдия меченых фрагментов ДНК из ПААГ
П. 17. Определение нуклеотидной последовательности ДНК.
П.17.1. Химические реакции специфической модификации и расщепления меченых фрагментов
П. 17.2. Секвенирувдие (структурные) ПААГ.
Ш. РЕЗУЛЬТАТЫ ЖСЛЕЩОВАНШ
Ш.1. Выделение и характеристика клонов, кодирующих
J,- и ^-кристаллины лягушки.
Ш.2. Рестрикционное картирование кДНК вставки клона pRt (1 ) 27.
Ш.З. Первичная структура кДНК вставки клона pRt (1 ) 27.
Ш.4. Анализ последовательности кДНК клона pRt (1 ) 27.
Ш.5. Рестрикционное картирование и частичное сек-венирование кДНК вставок клонов pRt (1 ) и pRt (1 ) 57. . Ill
Ш.6. Сравнительный анализ генов, кодирующих /fкристаллины.
Ш.7. Сравнение аминокислотных последовательностей
-кристаллинов.
Ш.8. Сравнение /-кристаллинов с другими белками. . 122 Ш.9. Идентификация клона рекомбинантной кДНК, кодирующей ^А2-крис Таллин.
Ш.9.1. Рестрикционное картирование кДНК вставки клона pRt (1 ) 297 . . •
Ш.9.2. Нуклеотидная последовательность кДНК вставки клона pRt (1 )
ШЛО. Сравнение генов, кодирувдих с/^-кристаллины различных позвоночных ♦ . ♦.
Ш.П. Наличие частичной гомологии ^./^-кристаялинов с другими белками
17. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.