Биофизические характеристики и взаимодействие с рецепторами Dectin-1 и TLR-6 природных полисахаридов из Helianthus tuberosus L Генералов, Евгений Александрович

Краткое описание

Генералов,ЕвгенийАлександрович.БиофизическиехарактеристикиивзаимодействиесрецепторамиDectin-1иTLR-6природныхполисахаридовизHelianthustuberosusL. : диссертация ... кандидата физико-математических наук : 03.01.02, 03.01.08 /ГенераловЕвгенийАлександрович; [Место защиты: Моск. гос. ун-т им. М.В. Ломоносова]. - Москва, 2017. - 192 с. : ил.больше
Цитаты из текста:

стр. 1
ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ НАУКИ ИНСТИТУТ МОЛЕКУЛЯРНОЙ БИОЛОГИИ ИМ. В.А. ЭНГЕЛЬГАРДТА РОССИЙСКОЙ АКАДЕМИИ НАУКГЕНЕРАЛОВЕВГЕНИЙАЛЕКСАНДРОВИЧБИОФИЗИЧЕСКИЕХАРАКТЕРИСТИКИИВЗАИМОДЕЙСТВИЕСРЕЦЕПТОРАМИDECTIN-1 ИTLR-6ПРИРОДНЫХПОЛИСАХАРИДОВИЗHELIANTHUSTUBEROSUSL. 03.01.02

стр. 47
поверхности цитоплазматических мембран клеток, либо ассоциируются с мембранами лизосом и других везикул, кромеTLR-4. При этомрецепторыTLR-1,TLR-2,TLR-4,TLR-5,TLR-6 иTLR-10 презентируются только на цитоплазматической мембране, аTLR-3,TLR-7,TLR-8 иTLR-9 ассоциированы с мембранами лизосом.

стр. 86
к усилению экспрессии как TNF, так и TNFR1. [244] На наружной стороне мембраны HTLP связывается срецепторомDectin1 (илиTLR-6), а затем сTLR-6 (илиDectin-1).ВзаимодействиеHTLP сDectin-1 приводит к димеризациирецептора. Связывание срецепторамиDectin-1 иTLR-6 приводит к синтезу цитокина TNF

Оглавление диссертациикандидат наук Генералов, Евгений Александрович
ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ
1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1. Классификация и строение углеводов
1.2. Биологическая активность полисахаридов
1.2.1. Функции и активности полисахаридов
1.2.2. Обзор биологически активных полисахаридов, применяемых
в медицине
1.2.3. Иммуномодулирующая активность растительных полисахаридов, взаимосвязь со структурой
1.2.3.1. Глюканы
1.2.3.2. Пектиновые и арабиногалактановые полисахариды
1.2.3.3. Гиалуронаны
1.2.4. Механизмы иммуномодулирующей активности полисахаридов
1.2.5. Антиоксидантная активность
1.2.6. Противоопухолевая активность растительных полисахаридов
1.3. Взаимосвязь структуры и противоопухолевого воздействия полисахаридов
1.4. Полисахаридные рецепторы
1.4.1. Толл-подобные рецепторы (TLR)
1.4.2. НОД-подобные рецепторы (NLR)
1.4.3. Рецепторы-мусорщики (SR)
1.4.4. Лактозилцерамидный рецептор (LacCer)
1.4.5. Рецепторы системы комплемента (CR)
2
1.4.6. С-тип лектин-подобные рецепторы (CTLR)
2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
2.1. Материалы
2.2. Методы
2.2.1. Химические методы анализа
2.2.2. Экстракция и ультрафильтрация Helianthus tuberosus L
2.2.3. Хроматографическое фракционирование
2.2.4. Физико-химические характеристики
2.2.4.1. УФ-спектроскопия
2.2.4.2. Инфракрасная спектроскопия
2.2.4.3.ЯМР-спектроскопи я
2.2.5. Анализ моносахаридного состава
2.2.6. Обработка ферментами
2.2.7. Биологическая активность
2.2.7.1.Пирогенност ь
2.2.7.2. Стимуляция антителообразующих клеток
2.2.7.3. Культивирование клеток RAW 264.7
2.2.7.4. Оценка цитотоксичности HTLP на клетки линии RAW 264.7
2.2.7.5. Определение МТТ редуктазной активности для исследования токсичности HTLP на клетки линии RAW 264.7
2.2.7.6. Влияние HTLP на количество клеток линии RAW 264.7
2.2.7.7. Иммуномодулирующая активность
2.2.7.7.1. Определение активности TNF-a
2.2.7.7.2. Определение активности IL-ip
2.2.7.7.3. Определение активности IL-6
2.2.7.7.4. Индукция интерферона in vivo и in vitro
2.2.7.7.5. Стимуляция натуральных киллеров
2.2.7.8. Инактивация генов целевых рецепторов
2.2.7.9.Посадка антител anti-TLR-6, anti-CR3, anti-Dectin-1 на клетки RAW 264.7
2.2.7.10. Противовирусная активность
2.2.7.11. Противоопухолевая активность
2.2.7.11.1. Изучение противоопухолевой активности HTLP in vitro
2.2.7.11.2. In vivo антиметастатическая активность в модели карциносаркомы Уокера
2.2.7.11.3. In vivo противоопухолевая и антиметастатическая активность полисахарида в карциноме легких Льюиса
2.2.7.12. Радиопротекция
2.2.7.12.1. Экспериментальная модель абсолютной выживаемости
2.2.7.12.2. Экспериментальная модель выживаемости гемопоэтических стволовых клеток
2.2.8. Биофизическое моделирование бифуркации
3. РЕЗУЛЬТАТЫ
3.1. Выделение и очистка полисахарида
3.1.1. Выделение грубой фракции из Helianthus tuberosus L
3.1.2. Очистка грубой фракции из Helianthus tuberosus L. хроматографическими методами
3.1.2.1. Анионообменная хроматография фракции с молекулярной массой более 300 кДа полученной из Helianthus tuberosus L
3.1.2.2. Гель-фильтрационная хроматография фракции с анионообменника
из Helianthus tuberosus L
3.1.2.3.ВЭЖХ-ГПХ фракции из Helianthus tuberosus L
3.2. Физико-химические характеристики HTLP
3.2.1. Спектральные характеристики
3.2.1.1. УФ-спектр HTLP
3.2.1.2. ИК-спектр HTLP
3.2.1.3. ЯМР-спектр HTLP
3.2.2. Моносахаридный состав HTLP
3.2.3. Обработка ферментами, специфичными к Р-(1—^4) и
к Р-(1—3)-гликозидным связям
3.3. Биологическая активность
3.3.1. Стимуляция антителообразующих клеток в селезенках мышей после совместного введения HTLP с ЭБ
3.3.2. Стимуляция антителообразующих клеток в селезенках мышей после введения HTLP, обработанного литиказой и целлюлазой
3.3.3. Оценка цитотоксичности HTLP для клеток линии RAW 264.7
3.3.4. Определение МТТ редуктазной активности для исследования токсичности HTLP на клетки линии RAW 264.7
3.3.5. Влияние HTLP на продукцию TNF, IL-ip, IL-6 в культуре мононуклеарных клеток человека
3.3.6. Инактивация генов целевых рецепторов и продукция TNF-a
3.3.7. Блокирование рецепторов антителами и продукция TNF-a
3.3.8. Индукция интерферона in vivo и in vitro
3.3.9. Стимуляция активности натуральных киллеров
3.3.10. Противовирусная активность
3.3.11. Противоопухолевая активность HTLP
3.3.11.1. Противоопухолевая активность in vitro
3.3.11.2. Антиметастатическая активность HTLP в модели карциносаркомы Уокера in vivo
3.3.11.3. In vivo противоопухолевая и антиметастатическая активность в модели карциномы легких Льюиса
3.3.12. Радиозащита
3.3.12.1. Экспериментальная модель выживаемости гемопоэтических стволовых клеток
3.3.12.2. Экспериментальная модель абсолютной выживаемости
3.3.13. Биофизическое моделирование бифуркации
4. ОБСУЖДЕНИЕ
ОСНОВНЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ И ВЫВОДЫ
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
БИБЛИОГРАФИЯ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
БЛАГОДАРНОСТИ