β–Галактозидаза бактерий Escherichia fergusonii: выделение и характеристика Букуру Лиз Криста

Краткое описание

Букуру,ЛизКриста.βГалактозидазабактерийEscherichiafergusonii:выделениеихарактеристика: диссертация ... кандидата биологических наук : 03.01.04 /БукуруЛизКриста; [Место защиты: Казанский (Приволжский) федеральный университет]. - Казань, 2020. - 146 с. : ил.больше
Цитаты из текста:

стр. 1
«Казанский (Приволжский) федеральный университет» ИНСТИТУТ ФУНДАМЕНТАЛЬНОЙ МЕДИЦИНЫ И БИОЛОГИИ На правах рукописиБукуруЛизКристаβгалактозидазабактерийEscherichiafergusonii:выделениеихарактеристика03.01.04 - биохимия ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный

стр. 4
βгалактозидаз.. 81 3.6 Динамика роста и образования β-галактозидазыбактериямиEscherichiafergusoniiЕ3 83 3.7 Подбор оптимальной среды для роста и образования β-галактозидазыбактериямиEscherichiafergusoniiЕ3.. 85 3.8Выделение

стр. 80
бактерийКультуральная жидкость Клеточные экстракты βгалактозидаза α-амилаза β-амилаза αглюкозидазаEscherichiaсoliEscherichiafergusoniiEscherichiaсoliEscherichiafergusoniiEscherichiaсoliEscherichiafergusoniiEscherichiaсoliEscherichiafergusoniiАктивность , МЕ/мл 1,72±0,03 5,49±0,32 3,23±0,31

Оглавление диссертациикандидат наук Букуру Лиз Криста
ВВЕДЕНИЕ
ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1 Строение, характеристика и классификация ß-галактозидазы
1.2 Определение активности ß - галактозидазы
1.3 Источники ß-галактозидазы
1.4 Физико-химические свойства ß- галактозидаз
1.5 Применение ß-галактозидаз в промышленности
1.5.1 Применение ß-галактозидаз в пищевой промышленности
1.5.2 Применение ß-галактозидаз в медицине
1.6 Микрофлора желудочно-кишечного тракта в норме и при патологии
1.6.1 Микрофлора желудочно-кишечного тракта
1.6.2 Характеристика кишечной микробиоты в норме
1.6.3 Характеристика кишечной микробиоты при патологии
1.7 Общая характеристика бактерий рода Escherichia
1.8 Активность ферментов желудочно-кишечного тракта
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
2.1 Объекты исследования
2.2 Состав питательных сред и культивирование микроорганизмов
2.3 Определение общего количества анаэробных бактерий
2.4 Идентификация доминирующих бактерий ЖКТ с помощью MALDI Biotyper
2.5 Идентификация изолята бактерий и определение его физиологических свойств
2.6 Определение фитотоксичности изолята Е3
2.7 Молекулярно-генетическое определение видовой принадлежности иолята бактерий, выделенного из ЖКТ больного с заболеванием Крона
2.7.1 Выделение ДНК бактерии
2.7.2 ПЦР-амплификация фрагмента гена 16S рРНК
2.7.3 Анализ и выделение фрагмента гена 16S рРНК
2.8 Сравнительное определение активности ферментов углеводного обмена у бактерий Escherichia fergusonii E3 и Escherichia coli
2.8.1 Определение а-амилазной и Р-амилазной активностей
2.8.2 Определение а-глюкозидазной и Р-глюкозидазной активностей
2.8.3 Определение сахаразной активности
2.8.4 Определение Р-галактозидазной и целлюлазной активностей
2.9 Определение способности микроорганизмов к синтезу Р-галактозидаз
2.10 Определение белка по методу Лоури
2.11 Получение бесклеточного экстракта бактерий различными методами
2.12 Очистка белка Р-галактозидазы с помощью ионообменной
хроматографии
2.12.1 Определение молекулярной массы Р-галактозидазы методом SDS-
электрофореза
2.13 Физико-химические свойства фермента Р-галактозидазы
2.13.1 Определение значений рН-оптимума и стабильности pH Р-галактозидазы
2.13.2 Определение значений температурного оптимума и термостабильности Р-галактозидазы
2.13.3 Влияние ионов металлов и ЭДТА на активность Р-галактозидазы
2.13.4 Определение оптимальной концентрации субстрата и значений Km и Vmax
2.14 Гидролиз молока ферментом Р-галактозидазы Escherichia fergusonii E3. Хроматографическое исследование гидролизатов молока
2.14.1 Приготовление гидролизатов для хроматографии
2.14.2 Анализ гидролизатов молока методом ВЭЖХ
2.15 Статистическая обработка данных
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
3.1 Определение общего содержания анаэробных бактерий микрофлоры ЖКТ
в норме, при неспецифическом язвенном колите и болезни Крона
3.2 Определение доминирующих видов микроорганизмов при воспалительных заболеваниях ЖКТ
3.3 Выделение и идентифицикация изолята бактерий из доминирующих видов больных с заболеванием Крона
3.3.1 Микробиологическое исследование изолята Е3
3.3.2 Определение токсичности изолята E3
3.3.3 Определение физиологической активности изолята Е3
3.3.4 Определение видовой принадлежности бактерий рода Escherichia с помощью молекулярно-генетического метода
3.4 Сравнительное определение активности ферментов углеводного обмена у бактерий Escherichia fergusonii E3 и Escherichia coli
3.5 Скрининг микроорганизмов по способности к синтезу ß-галактозидаз
3.6 Динамика роста и образования ß-галактозидазы бактериями Escherichia fergusonii Е3
3.7 Подбор оптимальной среды для роста и образования ß-галактозидазы бактериями Escherichia fergusonii Е3
3.8 Выделение ß-галактозидазы Escherichia fergusonii Е3 из биомассы клеток
3.9 Этапы получения очищенного белка ß-галактозидазы Escherichia fergusonii Е3
3.10 Определение степени очистки фермента ß-галактозидазы Escherichia fergusonii Е3 и его молекулярной массы
3.11 Исследование некоторых физико-химических свойств ß-галактозидазы бактерий Escherichia fergusonii Е3
3.11.1 Определение рН-оптимума и диапазона стабильности ß-галактозидазы Escherichia fergusonii Е3
3.11.2 Определение температурного оптимума и диапазона стабильности ß-
галактозидазы Escherichia fergusonii Е3
3.11.3. Влияние ионов металлов на активность ß-галактозидазы Escherichia
fergusonii Е3
3.11.4 Оптимизация концентрации субстрата и определение Km и Vmax ß-
галактозидазы Escherichia fergusonii Е3
3.12 Гидролиз молока ферментом ß-галактозидазы Escherichia fergusonii Е3.
Хроматографическое исследование гидролизатов молока
ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
ВВЕДЕНИЕ