Халахакун Мудиянселаге Амила Дживанта Халахакун Получение и стандартизация эритроцитарных носителей, инкапсулированных терпено-индольными алкалоидными противоопухолевыми препаратами

Краткое описание

Халахакун Мудиянселаге Амила Дживанта Халахакун Получение и стандартизация эритроцитарных носителей, инкапсулированных терпено-индольными алкалоидными противоопухолевыми препаратами

ОГЛАВЛЕНИЕ ДИССЕРТАЦИИ

кандидат наук Халахакун Мудиянселаге Амила Дживанта Халахакун

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Классификация противоопухолевых

препаратов растительного происхождения

1.2. Алкалоиды Катарантуса розового

(Catharanthus roseus (L.) G. Don)

1.2.1. Фитохимический состав C. roseus

1.2.2. Бисиндольные алкалоиды VCR и VLB

1.2.2.1. Химические и физико-химические свойства

1.2.3. Методы качественного и количественного определения

ТИА препаратов C. roseus

1.2.3.1. Методы выделения и идентификации ТИА

1.2.3.2. Методы анализа ТИА (VCR и VLB)

1.2.3.2.1. Методы установление подлинности VCR

1.2.3.2.2. Методы количественного определения VCR

1.2.4. Методы анализа C. roseus алкалоидов VCR и VLB in vivo

и in vitro

1.2.4.1. Физико-химические методы определения ТИА

1.2.4.1.1. Метод тонкослойная хроматография (ТСХ)

1.2.4.1.2. Газо-жидкостная хроматография

1.2.4.1.3. Метод высокоэффективной жидкостной хроматографии

(ВЭЖХ)

1.2.4.1.4. Анализ C. roseus алкалоидов методом ВЭЖХ с

электрохимическим детектированием

1.2.4.2. Методы радиоиммунологического анализа

алкалоидов C. roseus

1.2.4.2.1. Методы обнаружения ТИА в живых клетках

1.3. Фармакологические свойства VCR и VLB

1.3.1. Современное положение VCR и VLB в химиотерапии

1.3.2. Фармакокинетика VCR и VLB

1.3.3. Механизм действия VCR и VLB

1.3.4. Токсические действия и лекарственные взаимодействия

ТИА (VCR, VLB и др.)

1.3.5. Новые подходы для улучшения качества ТИА препаратов

VCR и VLB

1.4. Системы доставки лекарственных веществ

1.4.1 Липосомальные носители для доставки

противоопухолевых препаратов (ТИА)

1.4.2. Наноносители для доставки противоопухолевых

препаратов

1.5. Клеточные носители для доставки лекарственных средств

1.5.1. Аутологичные клетки крови, как носители лекарственных

препаратов

1.5.1.1. Физиология и морфология эритроцитов

1.5.2. Эритроциты как система доставки ЛС

1.5.3. Основные методы инкапсулирования лекарственных

веществ в эритроцитах

1.5.3.1. Метод гипотонического лизиса

1.5.4. Действие инкапсулированных эритроцитов на опухоли

1.5.5. Возможности применения клеточных носителей

для доставки ТИА

ВЫВОДЫ К ГЛАВЕ

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

2.1. Объекты исследования

2.2. Материалы и реактивы

2.3. Оборудование

2.4. Методы исследования

2.4.1. Методы выделение плазмы из крови

2.4.2. Выделение аллогенных эритроцитов

2.4.3. Метод изучения взаимодействия ТИА препаратов VCR и VLB с компонентами плазмы и форменными элементами крови

2.4.4. Включение ТИА в клеточные носители

2.4.5. Определение эффективности включения ТИА

(VCR, VLB) в эритроциты

2.4.6. Определение размера и физико-химических свойств

эритроцитов

2.4.7. Методика определение осмотической резистентности

ТИА загруженных эритроцитов

2.4.8. Определение степени гемолиза ТИА инкапсулированных эритроцитов

2.5. Статистическая обработка результатов

ГЛАВА 3. РАЗРАБОТКА МЕТОДИК СПЕКТРОФОТОМЕТРИЧЕСКОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ТЕРПЕНО-ИНДОЛЬНЫХ АЛКАЛОИДОВ В СУБСТАНЦИЯХ И ЛЕКАРСТВЕННОЙ ФОРМЕ

3.1. Изучение спектральных характеристик VCR и VLB

3.2. УФ-спектральные характеристики VCR и VLB в разных растворителях

3.3. Разработка методики количественного определения ТИА

препаратов VCR и VLB

3.3.1. Определение аналитических пределов обнаружения

3.3.2. Разработка методики количественного определения

3.3.3. Определение прецизионности аналитической методики

3.3.4. Определение робастности аналитической методики

3.4. Методики количественного определения VCR и VLB в ГЛФ

ВЫВОДЫ К ГЛАВЕ

ГЛАВА 4. РАЗРАБОТКА МЕТОДИК КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕ-

НИЯ ТЕРПЕНО-ИНДОЛЬНЫХ АЛКАЛОИДОВ

В БИОЛОГИЧЕСКОМ МАТЕРИАЛЕ

4.1. Разработка методики количественного определения

ТИА в биожидкостях

4.1.1. Определение оптимальных условий удаления белка

4.1.2. Выбор оптимальных условий гель-хроматографического выделения ТИА

4.1.3. Распределение ТИА при гель-хроматографии

ВЫВОДЫ К ГЛАВЕ

ГЛАВА 5. ПОЛУЧЕНИЕ КЛЕТОЧНЫХ НОСИТЕЛЕЙ ДЛЯ НАПРАВЛЕННОГО ТРАНСПОРТА В ОРГАНИЗМЕ ТИА ПРЕПАРАТОВ ВИНКРИСТИНА И ВИНБЛАСТИНА

5.1. Изучение взаимодействия ТИА VCR и VLB с компонентами плазмы и форменными элементами крови

5.1.1. Изучение взаимодействия ТИА VCR и VLB с компонентами плазмы крови

5.1.2. Изучение взаимодействия ТИА VCR и VLB с форменными элементами крови

5.2. Метод получения эритроцитарных клеточных форм ТИА препаратов

VCR и VLB

5.2.1. Включение ТИА препаратов в клеточные носители

5.3. Определения эффективности инкапсулирования ТИА препаратов VCR и VLB в эритроцитах

5.3.1. Методика количественного определения клеточных форм ТИА препаратов

5.3.2. Изучения возможности увеличения эффективности «загрузки» эритроцитов ТИА препаратами

5.3.2.1. Изучение эффективности загрузки ТИА препаратов в клеточные носители в среде, модифицированной ПЭГ

5.3.2.2. Изучение эффективности загрузки ТИА препаратов в клеточные носители в среде, модифицированной ДМСО

5.3.2.3. Изучение эффективности загрузки ТИА препаратов в клеточные носители в среде, модифицированной АТФ

ВЫВОДЫ К ГЛАВЕ

ГЛАВА 6. ИЗУЧЕНИЕ СВОЙСТВ ТИА ИНКАПСУЛИРОВАННЫХ ЭРИТ-РОЦИТАРНЫХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ФОРМ IN VITRO

6.1. Изучение свойств ТИА инкапсулированных эритроцитарных носителей in vitro

6.1.1. Изучение морфологии инкапсулированных ЭН

6.1.2. Определения размера и физико-химических свойств эритроцитов

6.1.3. Изучение устойчивости клеточных носителей к десорбции и высвобождению ТИА препаратов

6.2. Определение стабильности клеточных носителей и клеточных форм ТИА препаратов

6.2.1. Определения осмотической резистентности ТИА загруженных эритроцитов

6.2.2. Определение турбулентной хрупкости ТИА загруженных эритроцитов

6.3. Изучение условий высвобождения гемоглобина из ТИА загруженных эритроцитов

6.4. Определение стабильности клеточных носителей и клеточных форм VCR и

VLB при хранении

ВЫВОДЫ К ГЛАВЕ

ОБЩИЕ ВЫВОДЫ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

ПРИЛОЖЕНИЯ