Исследование актин-связывающих белков мозга крупного рогатого скота Верховский, Александр Борисович

Краткое описание

Верховский,АлександрБорисович.Исследованиеактин-связывающихбелковмозгакрупногорогатогоскота: диссертация ... кандидата биологических наук : 03.00.03. - Москва, 1984. - 216 с. : ил.больше
Цитаты из текста:

стр. 1
М.В.ЛОМОНОСОВА БИОЛОГИЧЕСКИЙ ФАКУЛЬТЕТ На правах рукописи ВЕРХОВСКЙЙАЛЕКСАНДРБОРИСОВИЧУДК 577.15.072ИССЛЕДОВАНИЕАКГИН-СВЯЗЫВАЩЙХБЕЛКОВМОЗГАКРУПНОГОРОГАТОГОСКОТА(03.00.03 - молекулярная биология) Д и с с е р т а ц и я на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель:

стр. 3
зовывать актиновый гель 1.2. Обнаружение в экстрактемозгабелка, понижающего вязкостьактинаГЛАВА 2. В В Д Е Ш Ш ; АКГИН-СВЯЗЫВМПЩБЕЛКОВМОЗГА1У1ЕТ0Д0М АФФИННОЙ ХРОМАТОГРАФИИ ИИССЛЕДОВАНИЕИХ АКТИВНОСТИ 2.1. Тубулин - основнойактин-связывающийбелокмозга...... Стр. 75 77 78 78 79 80 81 81 81 81 82 84

стр. 90
отвечает каЕшй-то термолабильныйбелок. Ш поставили задачу выделения этогобелка. ГЛАВА 2. ВЬЩЕЛЕНИЕ ККШЕ-СВЯШВМЩИ.БЕЛКОВМОЗГАГЛЕТОДОМ АФФИННОЙ ХРОтТОГРАФШ! И ИССЛВДОВАШй! Ш[ А1ШШН0СТЙ 2.1. Тубулин - основнойактин-связывающийбелокмозгаОчевидно, чтобелок, понижающий вязкость актина, должен об­ ладать

Оглавление диссертациикандидат биологических наук Верховский, Александр Борисович
ВВЕДЕНИЕ
Список принятых сокращений
ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1. ОБЩИЕ ПРЕДСТАВЛЕНИЯ ОБ АКТИНОШХ МИКРОФИЛАМЕНТАХ И ИХ ФУНКЦИЯХ В КЛЕТКЕ.
2. СТРУКТУРА И СВОЙСТВА МОНОМЕРА АКТИНА.
3. СТРУКТУРА И СВОЙСТВА F -АКТИВА.
4. ПОЛИМЕРИЗАЦИЯ АКТИНА.
4.1. Значение полимеризации и общая характеристика реакции.
4.2. Стадии полимеризации актина.
4.3. Влияние цитохалазинов и фаллоидина на полимеризацию актина
5. ВЗАИМОДЕЙСТВУЮЩИЕ С АКТИНОМ БЕЛКИ НШШШНЫХ КЛЕТОК
5.1. Белки, взаимодействующие с G-актином и ингиби-рующие его полимеризацию.
5.2. Белки, сшивающие актиновые филаменты между собой
5.3. Белки, укорачивающие актиновые филаменты
5.4. Возможные биологические функции актин-связываюпщх белков.
5.5. Направления дальнейших исследований биохимии аж-тин-связывающих белков
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.
1. МАТЕРИАЛЫ.
2. МЕТОДЫ.
2.1. Получение ацетонового порошка из скелетных мышц кролика.
2.2. Получение актина.
2.3. Получение тубулина.
2.4. Получение экстракта мозга для аффинной хроматографии и для получения фактора, понижающего вязкость актина.
2.5. Иммобилизация актина на сефарозе, активированной
2.6. Подготовка ионообменников.
2.7. Определение кажущейся вязкости актина с помощью вискозиметра с падающим шариком.
2.8. Определение удельной активности фактора, понижающего вязкость актина.
2.9. Определение ДНКазной активности.
2.10. Определение полимеризации актина оптическим методом
2.11. Аналитическое ультрацентрифугироваяие.
2.12. Электронная микроскопия.
2.13. Электрофорез в полиакриламидном геле.
2.14. Получение одномерных пептидных карт
2.15. Определение концентрации белка.
2.16. Перевивка асцитной карциномы Эрлиха и получение экстракта клеток карциномы.
РЕЗУЛЬТАТЫ.
ГЛАВА I. ИССЛЕДОВАНИЕ ВЛИЯНИЯ БЕЛКОВ ЭКСТРАКТА МОЗГА НА
СОСТОЯНИЕ АКТИНА.
1.1. Отсутствие у экстракта мозга способности образовывать актиновый гель.
1.2. Обнаружение в экстракте мозга белка, понижающего вязкость актина
ГЛАВА 2. ВВДЖЕНИЕ АКГИН-СВЯЗЫВМЩИХ БЕЛКОВ МОЗГА МЕТОДОМ
АФФИННОЙ ХРОМАТОГРАФИИ И ИССЛЕДОВАНИЕ ИХ АКТИВНОСТИ
2.1. Тубулин - основной актин-связывающий белок мозга
2.2. Тубулин не обладает способностью понижать вязкость
F -актина.
2.3. Влияние тубулина на седиментационные свойства актина.
2.4. Выделение белкового фактора, ответственного за понижение вязкости актина экстрактом мозга . . . III
2.5. Фактор, понижающий вязкость актина, представляет собой комплекс актина и белка с молекулярным весом 90 кД.
ГЛАВА 3. ИССЛЕДОВАНИЕ МЕХАНИЗМА ДЕЙСТВИЯ КОМПЛЕКСА АКТИНА
И БЕЛКА С МОЛЕКУЛЯРНЫМ ВЕСОМ 90 кД
3.1. Понижение вязкости актина комплексом обусловлено уменьшением длины актиновых филаментов
3.2. Комплекс из мозга ингибирует элонгацию актиновых филаментов на предпочтительном для полимеризации конце.
3.3. Влияние ионов Са на активность белкового комплекса из мозга.
3.4. Комплекс из мозга отличается по механизму действия от цитохалазина D - он способен укорачивать актиновые филаменты, стабилизированные фаллоидином и тропомиозином.
ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.
ВЫВОДЫ