Изменения конформации и окислительно-восстановительного состояния цитохромов дыхательной цепи митохондрий в препаратах in vitro и in vivo Никельшпарг Эвелина Ильинична

Краткое описание

Никельшпарг,ЭвелинаИльинична.Измененияконформациииокислительно-восстановительногосостоянияцитохромовдыхательнойцепимитохондрийвпрепаратахinvitroиinvivo: диссертация ... кандидата биологических наук : 03.01.02; 06.06.01 /НикельшпаргЭвелинаИльинична; [Место защиты: Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова]. - Москва, 2019. - 131 с. : ил.больше
Цитаты из текста:

стр. 1
МОСКОВСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ имени М.В. ЛОМОНОСОВА БИОЛОГИЧЕСКИЙ ФАКУЛЬТЕТ На правах рукописи НикельшпаргЭвелинаИльиничнаИзмененияконформациииокислительно-восстановительногосостоянияцитохромовдыхательнойцепимитохондрийвпрепаратахinvitroи invivoНаправление подготовки 06.06.01

стр. 2
................................................................................................................... 9 1.1. Строение электрон-транспортнойцепимитохондрий......................................................... 9 1.1.1.Окислительноефосфорилирование ................................................................................ 9 1.1.2. Функционирование переносчиков электроновдыхательнойцепи.............................. 9 1.1.3....

стр. 4
4.2.4. Определение чувствительности спектров ГКРмитохондрийк скорости потребления кислородамитохондриями.......................................................................................................... 85 4.3. ИзучениеизмененийконформациигемацитохромаС в липосомах в ответ наизменениямембранного потенциала ................................................................................................................. 86 4.4....

Оглавление диссертациикандидат наук Никельшпарг Эвелина Ильинична
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
ВВЕДЕНИЕ
1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1. Строение электрон-транспортной цепи митохондрий
1.1.1. Окислительное фосфорилирование
1.1.2. Функционирование переносчиков электронов дыхательной цепи
1.1.3. Цитохромы дыхательной цепи митохондрий
1.1.1. Окислительно-восстановительное состояние цитохромов при работе дыхательной цепи
1.1.2. Взаимодействие цитохрома С с редокс-партнерами
1.1.3. Организация комплексов ЭТЦ в респирасомы
1.1.4. Кардиолипин во внутренней мембране митохондрий
1.2. Механизмы регуляции электронного транспорта
1.2.1. Разобщение электронного транспорта и синтеза АТФ
1.2.2. Морфология митохондрий
1.2.3. Митохондрии в условиях гипоксии. Роль АФК
1.2.4. Регуляция электронного транспорта путем посттрансляционной модификации компонентов ЭТЦ
1.3. Спектроскопия комбинационного и гигантского комбинационного рассеяния для исследования митохондрий
1.3.1. Принцип метода КР
1.3.2. Принцип метода ГКР
1.3.3. Спектроскопия КР изолированных митохондрий
1.3.4. Спектроскопия КР клеток
1.3.5. Спектроскопия ГКР клеток и биологических молекул
1.3.6. Определение конформации гемов методами КР и ГКР
2. ЦЕЛИ И ЗАДАЧИ
3. МЕТОДЫ
3.1. Получение наноструктур
3.1.1. Синтез наноструктур типа серебряных колец
3.1.2. Синтез наноструктур SiO2-Ag
3.2. Подготовка препаратов
3.2.1. Выделение митохондрий
3.2.2. Получение липосом
3.2.3. Получение субмитохондриальных частиц (СМЧ)
3.2.4. Культивирование клеточной линии НСТ116
3.3. Протоколы экспериментов
3.3.1. Регистрация спектров ГКР
3.3.2. Регистрация спектров КР живых клеток
3.3.3. Регистрация спектров КР миоцитов
3.3.4. Регистрация спектров КР сосудов мозга
3.3.5. Измерение дзета-потенциала (Z-потенциала)
3.3.6. Измерение потребления кислорода митохондриями методом оксиметрии
3.3.7. Определение окислительно-восстановительного состояния цитохромов митохондрий абсорбционной и дифференциальной абсорбционной спектроскопией
3.3.8. Качественное определение потенциала на внутренней митохондриальной мембране митохондрий
3.3.9. Статистический анализ
4. РЕЗУЛЬТАТЫ
4.1. Разработка подхода на основе ГКР для исследования конформации гема цитохрома С в функционирующих митохондриях
4.1.1. Структура спектра ГКР интактных митохондрий
4.1.2. Спектр ГКР митохондрий представляет собой спектр цитохрома С, но не других цитохромов
4.1.3. Вклад липидов в спектр ГКР митохондрий
4.1.4. Влияние различных факторов на спектры ГКР митохондрий
4.1.5. Сравнение резонансного и предрезонасного спектра ГКР митохондрий
4.1.6. Воспроизводимость спектров ГКР митохондрий в зависимости от типа наноструктур
4.1.7. Наноструктуры серебра не влияют на активность митохондрий и интактность внутренней мембраны в условиях эксперимента ГКР
4.1.8. Электростатические взаимодействия в системе наноструктуры-митохондрии не влияют на спектры ГКР митохондрий
4.1.9. Спектроскопия ГКР митохондрий позволяет селективно исследовать гем окисленного цитохрома С
4.1.10. На спектр ГКР митохондрий в подобранных условиях эксперимента оказывает влияние только состояние митохондрий
4.1.11. Детализация пиков на спектре ГКР митохондрий
4.1.12. Спектроскопические маркеры для детектирования конформационных изменений гема цитохрома С
4.2. Изучение конформационных изменений гема цитохрома С при модуляции активности электронного транспорта в митохондриях
4.2.1. Влияние субстратов и разобщителей на спектр ГКР митохондрий
4.2.2. Сближение мембран приводит к увеличению интенсивности сигнала ГКР митохондрий
4.2.3. Определение чувствительности спектров ГКР митохондрий к электрохимическому потенциалу на внутренней мембране
4.2.4. Определение чувствительности спектров ГКР митохондрий к скорости потребления кислорода митохондриями
4.3. Изучение изменений конформации гема цитохрома С в липосомах в ответ на изменения мембранного потенциала
4.4. Исследование окислительно-восстановительного состояния и конформации гемов цитохромов в живых клетках
4.5. Исследование окислительно-восстановительного состояния цитохромов в клетках при накоплении липидов
4.5.1. Разработка подхода для одновременного исследования состояния цитохромов и липидов в миоцитах
4.5.2. Исследование состояния липидов в миоцитах
4.5.3. Исследование состояния митохондрий в миоцитах
4.5.4. Корреляции между содержанием липидов в клетках и состоянием митохондрий
4.6. Мониторинг степени оксигенации крови in vivo методом КР
5. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
Регуляция конформации гема цитохрома С
5.1. Гипотетические механизмы регуляции конформации гема цитохрома С в митохондриях
5.2. Плоская и скрученная конформация гема цитохрома С как потенциальный регулятор активности электронного транспорта
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ