Изучение свойств глутаматных рецепторов АМПА-типа мозга крысы на модели эпилепсии, вызванной имплантацией кобальта Гранстрем, Олег Константинович

Краткое описание

Гранстрем,ОлегКонстантинович.ИзучениесвойствглутаматныхрецепторовАМПА-типамозгакрысынамоделиэпилепсии,вызваннойимплантациейкобальта: диссертация ... кандидата биологических наук : 03.00.04. - Санкт-Петербург, 1999. - 145 с. : ил.больше
Цитаты из текста:

стр. 1
РОССИЙСКАЯ АКАДЕМИЯ НАУК ИНСТИТУТМОЗГАЧЕЛОВЕКА На правах рукописиГРАНСТРЕМОлегКонстантиновичИЗУЧЕНИЕс в о й с т вГЛУТАМАТНЫХРЕЦЕПТОРОВАМРАТИП>.МОЗГАКРЫСЫНАМОДЕЛИЭПИЛЕПСИИ,ВЫЗВАННОЙИМПЛАНТАЦИЕЙКОБАЛЬТАСпециальность 03.00.04. Биохимия Диссертация на соискание ученой степени кандидата

стр. 5
вмозгекрысГлава 6 СОПОСТАВЛЕНИЕ ДИНАМИКИ GLUR1 АУТОАНТИТЕЛ В СЫВОРОТКЕ КРОВИКРЫССЭПИЛЕПСИЕЙ,ВЫЗВАННОЙИМПЛАНТАЦИЕЙКОБАЛЬТА, И ДАННЫХ ЭКоГ 6.1 ЭКоГ мониторинг укрыссэпилепсией,вызваннойимплантациейкобальта6.2. Динамика накопления GluRl аутоантител в кровикрыссэпилепсией,вызваннойимплантацией

стр. 9
ЭКГ, ЯМР и позитронно-эмиссионная томография). ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ: Целью настоящей работы являетсяизучениесвойствглутаматныхАМРАрецепторовмозгакрыснамоделиэпилепсии,вызваннойимплантациейкобальта. Конкретные задачи исследования сводились к следующему: 1. Выделить и идентифицировать 01иК1 субъединицу АМРАрецепторамозгакрысыи сравнить ее иммунологическиесвойствасо...

Оглавление диссертациикандидат биологических наук Гранстрем, Олег Константинович
ОГЛАВЛЕНИЕ:
ВВЕДЕНИЕ
ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
Глава 1 ГЕТЕРОГЕННОСТЬ ГЛУТАМАТНЫХ РЕЦЕПТОРОВ И
ИХ ФУНКЦИИ В ЦНС
1.1. Свойства семейства глутаматных рецепторов и их роль в ЦНС
1.2. Классификация глутаматных рецепторов
1.3. Молекулярная организация глутаматных рецепторов
1.4. Распределение и локализация глутаматных рецепторов в ткани 24 мозга • - ,
1.5. Функциональная роль глутаматных рецепторов в мозге 25 Глава 2 РОЛЬ ГЛУТАМАТНЫХ РЕЦЕПТОРОВ В
ПАТОГЕНЕЗЕ ЗАБОЛЕВАНИЙ ЦНС
2.1. Роль глутаматных рецепторов в эпилептогенезе
2.2. Участие глутаматных рецепторов в развитии ишемии, алкоголизма, 35 шизофрении, и болезни Альцгеймера
2.3. Экспериментальные модели эпилепсии у животных
2.4. Изменение экспрессии генов ОЫЯб при эпилепсии
2.5. Особенности ЭКоГ при эпилепсии 44 Глава 3 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
3.1. Характеристика модельных животных
3.2. Выделение синаптических мембран из мозга крыс
3.3. Выделение ГМБ из синаптических мембран мозга крыс
3.3.1. Солюбилизация мембранных белков
3.3.2. Аффинная хроматография ГМБ на глутамат-сефарозе
3.3.3. Выделение субъёдиниц АМРА рецептора методом 50 препаративного электрофореза
3.4. Аналитический электрофорез
3.4.1. Электрофорез в денатурирующих условиях
3.4.2. Окраска гелей при помощи Кумасси R-250
3.4.3. Окраска гелей серебром
3.4.4. Аналитический электрофорез ДНК
3.5. Техника выполнения Вестерн блота
3.5.1. Перенос белков на нитроцеллюлозную мембрану
3.5.2. Выявление фракций белка с использованием специфичных 57 антител после электропереноса на нитроцеллюлозную мембрану
3.6. Техника выполнения ДОТ блота. 58 3.6.1. Перенос белков и пептидов на нитроцеллюлозную мембрану
3.7. ELISA. ;.■
о
3.8. Определение специфического связывания [°Я] АМРА с фракциями 59 GluRs
3.9. Определение концентрации белка в растворе
3.10.Выделение тотальной мРНК из мозга крыс 62 3.10.1 .Очистка препарата мРНК от примесей ДНК
3.11. Методика проведения прямой ЯТ-РСЯ
3.12. Количественный анализ продуктов ЯТ-РСЯ
3.13.. Иммуноцитохимическое окрашивание
3.13.1. Предварительная подготовка ткани
3.13.2. Приготовление и окрашивание срезов
3.14. Имплантация кобальта и регистрация ЭКоГ
3.15. Методы статистического анализа результатов исследования
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ Глава 4 ВЫДЕЛЕНИЕ И ИДЕНТИФИКАЦИИ СУБЪЕДИНИЦ АМРА РЕЦЕПТОРА
4.1 Выделение глутаматсвязывающих мембранных белков и 71 субъединиц АМРА рецептора из мозга крысы
4.2. Идентификация субъединиц АМРА рецептора
4.3. Сравнение иммунологических свойств субъединицы 01иЯ1 из
мозга крысы и синтетического №концевого пептида- фрагмента С1иШ Глава 5 РАСПРЕДЕЛЕНИЕ, ИММУНОРЕАКТИВНОСТЬ И
ЭКСПРЕССИЯ ГЕНОВ СУБЪЕДИНИЦ АМРА РЕЦЕПТОРА В КОРЕ И ГИППОКАМПЕ КРЫС С ЭПИЛЕПСИЕЙ, ВЫЗВАННОЙ ИМПЛАНТАЦИЕЙ КОБАЛЬТА
5.1. Иммунореактивность субъединиц АМРА рецептора в мозге крыс
5.2. Распределение субъединиц АМРА рецептора в гиппокампе и коре 84 мозга
5.3. Экспрессия гена 01иШ в мозге крыс 85 Глава 6 СОПОСТАВЛЕНИЕ ДИНАМИКИ ОШЮ АУТОАНТИТЕЛ В
СЫВОРОТКЕ КРОВИ КРЫС С ЭПИЛЕПСИЕЙ, ВЫЗВАННОЙ ИМПЛАНТАЦИЕЙ КОБАЛЬТА, И ДАННЫХ ЭКоГ 6.1 ЭКоГ мониторинг у крыс с эпилепсией, вызванной имплантацией 89 кобальта
6.2. Динамика накопления ОЫШ аутоантител в крови крыс с 90 эпилепсией, вызванной имплантацией кобальта
6.3. Сравнение изменений уровня ОШИ аутоантител у различных 94 моделей эпилепсии: генетической, аудиогенной и индуцированной электрическими стимулами
ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
ВЫВОДЫ
ЛИТЕРАТУРА