Изучение свойств и функции Ca2+-атвивируемого канала митохондрий Павлов, Евгений Владимирович

Краткое описание

Павлов,ЕвгенийВладимирович.ИзучениесвойствифункцииCa2+-атвивируемогоканаламитохондрий: диссертация ... кандидата биологических наук : 03.00.02. - Пущино, 1999. - 101 с. : ил.больше
Цитаты из текста:

стр. 1
РОССИЙСКАЯ АКАДЕМИЯ НАУК ИНСТИТУТ ТЕОРЕТИЧЕСКОЙ И ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ БИОФИЗИКИ На правах рукописиПАВЛОВЕвгенийВладимировичИЗУЧЕНИЕСВОЙСТВИФУНКЦИИСа^^- АКТИВИРУЕМОГОКАНАЛАМИТОХОНДРИЙ03.00.02.- биофизика Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научные руководители:

стр. 2
КРЕМНИЕВОЙ КИСЛОТОЙ. 2.6. ШТОДИКА ПРОВЕДЕНИЯ АНАЛИШЧЕСКОЙ и ПРЕПАРАТИВНОЙ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОЕРАФИИ. 2.7. МЕТОДИКАИЗУЧЕНИЯСА^*- СВЖЬШАЮЩИХ с в о й с т в ВЕЩЕСТВА. 2.8. ШУЧЕНИЕИОН- ТРАНСПОРТИРУЮПРХсвойств. 2.9. ПОЛУЧЕНИЕМИТОХОНДРИЙВ РАЗЛИЧНЫХ ФУНКЩЮНАЛЬНЫХ с о с т о я н и я х . 2.10. М5ТОДЫ ШУЧЕНИЯ

стр. 6
настоящей работы было: выделение, очистка иизучениесвойствнизкомолекулярного гидрофобного каналообразующего компонента внутренней мембранымитохондрий, а также выяснение его возможной роли в формировании вмитохондрияхСа^*- активируемой неселективной поры. В диссертации были поставлены и решены следующие

Оглавление диссертациикандидат биологических наук Павлов, Евгений Владимирович
СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ.-----------------4
ГЛАВА 1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР.------------------------------------8
1.1. Роль митохондрий в регуляции уровня клеточного кальция. ---------------------------------------------8
1 .2.Митохондриальные системы транспорта кальция.---------------------------------------------------9
1.3. МитохондриальнаяСа2+-акшвируемаянеселекшвнаяпора.----------------------------------------13
1.3.1. Факторы, влияющие на открытие поры.---14
1.3.2. Молекулярные механизмы функционирования поры.--------------24
1.3.3. Физиологическая роль поры.-----33
1.4. Фазовые переходы липидных мембран.-----------------------------------------------------------------------38
1.5. Осцилляции концентрации внутриклеточного кальция в электюневозбудимых клетках.-----42
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.---45
2.1. Метод выделения митохондрий из печени крыс.-------------------------------------------------------45
2.2. Определение митохондриального белка.--------------------------------------------------------------46
2.3. Метод этанольной экстракции.-------------------------------------------------------------------------46
2.4. Экстракция липидов по методу Фолча.-------------------------------------------------------------------47
2.5. Очистка гидрофобного экстракта на колонке с кремниевой кислотой.------------------------47
2.6. Методика проведения аналитической и препаративной тонкослойной хроматографии.-------48
2.7. Методика изучения Са2+- связывающих свойств вещества.----------------------------------------48
2.8. Изучение ион- транспортирующих свойств.---------------------------------------------------------49
2.9. Получение митохондрий в различных функциональных состояниях.------------------------------50
2. Ю.Методы изучения химической структуры вещества.---------------------------------------------------51
2.11. Анализ активности маркерных ферментов.----------------------------------------------------------51
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ЭКСПЕРИМЕНТОВ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ---------------53
3.1. Выделение и очистка Са2+-связываюгцего, ион- транспортирующего вещества из внутренней мембраны митохондрий.----------------------------------------------------------------------------------------53
3.2. Изучение химической структуры вещества----------------------------------------------------------------57
3.3. Изучение Са^-связывающих свойств вещества.-------------------------------------------------63
3.4. Изучение ион-транспортирующих свойств вещества.---------------------------------------------------68
3.5. Выяснение возможной функциональной роли изучаемого вещества в митохондриях.--------70
3.6. Эффект колебаний проводимости БЛМ, модифицированной суммарным гидрофобным экстрактом.-----------------------------------------------------------------------------------------72
ЗАКЛЮЧЕНИЕ____________________________________________________76
ВЫВОДЫ.---80
ЛИТЕРАТУРА.-------------------82