Изучение вторичной и третичной структуры рибосомных белков из малой 30S субчастицы Escherichia coli Гогия, Зураб Валерьянович

Краткое описание

Гогия,ЗурабВалерьянович.Изучениевторичнойитретичнойструктурырибосомныхбелковизмалой30SсубчастицыEscherichiacoli: диссертация ... кандидата биологических наук : 03.00.03. - Пущино, 1984. - 206 с. : ил.больше
Цитаты из текста:

стр. 1
Cf •• cftr- ф^;1 .,/ АКАДЕМИЯ НАУК ССССР ИНСТИТУТБЕЛКАО) G'bU. ГОГИЯЗурабВалерьяновичИЗУЧЕНИЕВТОРИЧНОЙИТРЕТИЧНОЙСТРУКТУРЫРИБОСОМНЫХБЕЖОВ ИЗ М Л Й30SСУБЧАСТИЦЫESCHERICHIACOLIАО 03.00,03 - Молекулярная биология Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный

стр. 2
и в составе30Sсубчастицы2. Состав и некоторые физико-химические характерис­ тикирибосомныхбелков30SсубчастицыE.coli... 3. Конформациярибосомныхбелковв составе30Sсубчастицырибосом Ц-, Конформация изолированныхрибосомныхбелковв растворе 1У. Выделение индивидуальныхбелковиз30Sсубчасти­ цырибосом 1. Введение 2. Экстракциярибосомныхбелковиз...

стр. 47
включает в себя две стадии: I) экстракциярибосомныхбелковизсубчастиц, 2) хроматографическое разделение полученных смесейбелкови очистка индивидуальныхрибосомныхбелков.. 2. Экстракциярибосомныхбелковизсубчастиц. Экстракциярибосомныхбелковиз30Sсубчастицпреследует двоякую цель. Кроме задачи

Оглавление диссертациикандидат биологических наук Гогия, Зураб Валерьянович
ВВЕДЕНИЕ . б
ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ. Структура малой субчастицы бактериальной рибосомы и ее компонентов
I. Универсальные принципы структурной организации рибосом.
1. Общая характеристика рибосом
2. Построение рибосом из двух неравных субчастиц.
3. Другие характерные особенности структуры рибосом
Разборка и самосборка рибосомных субчастиц
П. Взаимное расположение белков и РНК в 30s субчастице
Ш. Структура компонентов 30s субчастицы рибосом
1. Конформация 16S РНК в растворе и в составе 30S субчастицы.
2. Состав и некоторые физико-химические характеристики рибосомных белков 30S субчастицы E.coli.
3. Конформация рибосомных белков в составе 30S субчастицы рибосом
Ц-. Конформация изолированных рибосомных белков в растворе.
1У. Выделение индивидуальных белков из 30S субчастицы рибосом.4
1. Введение.4
2. Экстракция рибосомных белков из субчастиц
3. Ионообменная хроматография белков из 30S субчастицы рибосом.4
4. Сравнение методов выделения.
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
1. Выращивание бактерий
2. Выделение рибосом.
3. Выделение рибосомных субчастиц
4-, Выделение тотального белка рибосомных ЗОБ субчастиц методом экстракции 67% уксусной кислотой.
5. Двумерный гель-электрофорез белков ЗОБ субчастицы рибосом.
6. Полиакриламидный гель-электрофорез рибосомных белков в К- ацетатном буфере рН 4,5 в присутствии 6,5 М мочевины.
7. Полиакриламидный гель-электрофорез рибосомных белков в присутствии додецилсульфата натрия в пластинах.
8. Хроматографические процедуры при фракциониро вании белков рибосомной ЗОБ субчастицы
9. Концентрирование белковых препаратов
10. Получение чистых препаратов индивидуальных рибосомных белков из малой ЗОБ субчастицы рибосом
11. Выход индиввдуальных белков и оценка чистоты полученных препаратов
12. Определение Я-концевых аминокислот
13. Анализ аминокислотного состава белков
14. Равновесное центрифугирование
15. Приготовление белков для физических исследований
16. Определение концентрации белка в растворе
17. Вычисление коэффициентов молярной экстинкции.
18. Спектрофотометрические измерения
19. Измерение спектров кругового дихроизма
20. Определение вторичной структуры из спектров кругового дихроизма
21. Спектры протонного магнитного резонанса
ПМР).
22. Сканирующая микрокалориметрия
23. Нейтронное рассеяние
24. Малоугловое рассеяние рентгеновских лучей
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
I. Растворимость рибосомных белков
1. Введение.
2. Постановка задачи
3. Подбор буферов для оптических исследований рибосомных белков
Подбор буферов для изучения третичной структуры рибосомных белнов методами ПМР-спектро-скопии и нейтронного рассеяния. 9'
5. Резюме.
П. Спектры поглощения в ближней ультрафиолетовой области и коэффициенты молярной экстинкции индивидуальных рибосомных белков из ЗОБ субчастицы
1. Постановка задачи
2. Спектры поглощения индивидуальных белков в ближней ультрафиолетовой области
3. Коэффициенты молярной экстинкции индивидуальных белков ЗОБ субчастицы
Ш. Спектры кругового дихроизма индивидуальных белков ЗОБ субчастицы рибосом
1. Введение.
2. Постановка задачи
3. Характеристика спектров кругового дихроизма белков ЗОБ субчастицы рибосом
Расчет содержания различных типов вторичной структуры белков ЗОБ субчастицы рибо
IV. Третичная структура и компактность "сердцевинных" белков Б4, 37, ¡38, Б15 и 316 из малой субчастицы рибосом Е.соИ в растворе.
1. Введение.
2. Конформация белка Э4 в растворе.Л
3. Конформация белка 315 в растворе .хзо
4. Конформация белка Э? в растворе.
5. Конформация белка 38 в растворе.
6. Конформация белка 316 в растворе.
V. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ .-.-. . *
1. Спектры поглощения рибосомных белков ЗОБ субчаст ицы.
2. Вторичная структура рибосомных белков 30Э субчастицы
3. Третичная структура сердцевинных белков Э4, 37,
Эв, Э15 и Б16.
Заключительные замечания
ВЫВОДЫ V ;.1бб