Клонирование и характеристика мРНК, содержащей повторяющийся элемент В2 и богато представленной в печени мыши Иванов, Павел Леонидович

Краткое описание

Иванов,ПавелЛеонидович.КлонированиеихарактеристикамРНК,содержащейповторяющийсяэлементВ2ибогатопредставленнойвпеченимыши: диссертация ... кандидата биологических наук : 03.00.03. - Москва, 1984. - 135 с. : ил.больше
Цитаты из текста:

стр. 1
(7 ~~ Р ^ -^ ' / /1 ;. -1 О / -" -у" • <у ИНСТИТУТ МОЛЕКУЛЯРНОЙ БИОЛОГИИ АКАДЕМИИ НАУК СССР На правах рукописиИВАНОВПавелЛеонидовичКЛОНИРОВАНИЕИ ХАРАКТЕРИСШСАмРНК,СОДЕРЖАЩЕЙПОВТОРЯЮ­ ЩИЙСЯЭЛЕМЕНТВ2 ИБОГАТОПРИСТАВЛЕННОЙ ВПЕЧЕНИМЫШИ. 03.00.03 - Молекулярная биология Лдссертация на соискание

стр. 3
четырех клони­ рованных кДНК,содержащихповторяющийсяэлементВ2 ; полная копия Б2-по следовательно стипредставленав одной из мажорных.полиадени-... . лированныхмРНКпеченимыши..".•. 82 4; B2%PHKjj. - основной тип В2-содержащихмРНКпеченимыши, Соседствование пов­ тора В2 и уникальной (слабоповторяющейся)

стр. 6
цитоплазматической поли(А)'*РНКпеченимы­ шии соответствующие неидентифицированноймРНК,содержащейповторяющийсяэлементВ2. Определен размер этой: РНК; пока­ зана ее принадлежность к мажорному классу полисомноймРНКпе­ ченимыши. Изучение структзгрной организации шюнированноймРНКпрямо продемонстрировало

Оглавление диссертациикандидат биологических наук Иванов, Павел Леонидович
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
ВВЕДЕНИЕ.
ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ. Рассеянные повторяющиеся.элементы. генома эукариот.
Общая характеристика рассеянных повторяющихся эле-*-. ментов.
Длинные рассеянные.повторы: элементыварьирующей. локализацией.
Короткие рассеянные повторы ; вездесущие последователь-г-. ности генома млекопитающих.
Экспрессия рассеянных повторяющихся.элементов.генома. эукариот
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.
1. Бактериальные штаммы и.векторы.для.клонирова-. ния.
2. Получение поли (А)-содержащей мРНК из клеток. асцитной карциномы Эрлиха и.печени.мыши.;.;;.v
3. Получение ядерной: пре-мРНК
4. Электрофоретическое фракционирование РНК.в. агарозном геле и перенос на ДБМ^фильтры.
5. Выделение ДНК плазмиды pBR
6. Получение библиотеки клонов кДНК на основе. цитогшазматической поли(А)*РНК печени мыши.
7. Приготовление меченых,тест-проб для гибрида-., зации
8. Детектирование и отбор рекомбинантных.клонов;. Метод гибридизации с колониями.
9. Выделение рекомбинантной ДНК
10. Обработка.ДНК.рестрикционными эндонуклеа-. зами.
11. Фракционирование ДНК с помощью электрофореза.
12. Перенос ДНК из агарозного геля на нитроцел-. люлозные фильтры ; блотт-гибридизация.
13* Выделение вставочных фрагментов ДНК
14. Концевое мечение.32Р.двуцепочечных.фраг-. ментов ДНК.
15. Разделение цепей ДНК в ШАГ
16. Выделение меченых дву- и.одноцепочечных. фрагментов ДНК из ПААГ.
17. Определение первичной структуры ДНК
РЕЗУЛЬТАТЫ.
1. Получение библиотеки клонов кДНК на основе цитоплазматической поли(А)+РНК печени мыши и отбор рекомбинантов, содержащих.повторы. BI и В
2. Рестрикционный анализ рекомбинантных клонов, содержащих последовательности, гомологичные В-элементам: определение.типа. клонированных В-элементов
3. Анализ первичной структуры четырех клонированных кДНК, содержащих повторяющийся элемент В2 ; полная копия В2-последовательности представлена в одной из мажорных.полиадени-. лированных мРНК печени мыши
4; Вг+мРНКд. - основной тип В2-содержащих мРНК печени мыши. Соседствование повтора В2 и уникальной (слабоповторяющейся). последовательности внутри транскрипта • •.
5. Универсальная ориентация повторяющихся последовательностей семейства В2 в полисомных и цитоплазматических полиШ^РНК. клеток асцитной карциномы и печени мыши
ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
ВЫВОДЫ.