Ключевые ферменты биосинтеза пуринов в сетчатке млекопитающих: Особенности регуляции процесса в различных клетках Киян, Юлия Александровна

Краткое описание

Киян,ЮлияАлександровна.Ключевыеферментыбиосинтезапуриноввсетчаткемлекопитающих:Особенностирегуляциипроцессавразличныхклетках: диссертация ... кандидата биологических наук : 03.00.04. - Санкт-Петербург, 1999. - 119 с.больше
Цитаты из текста:

стр. 1
Р0ССИЙ^|САЯ АКАДЕМИЯ НАУК / Институт эволюционной физиологии и биохимии им. И.М. Сеченова На правах рукописи УДК 576.8.851.155+577.123.383КиянЮлияАлександровнаКЛЮЧЕВЫЕФЕРМЕНТЫБИОСИНТЕЗАПУРИНОВВСЕТЧАТКЕМЛЕКОПИТАЮЩИХ;ОСОБЕННОСТИРЕГУЛЯЦИИПРОЦЕССАВРАЗЛИЧНЫХКЛЕТКАХ(03.00.04-биохимия) Диссертация

стр. 2
Многообразие функцийпуринов1.2. Реакциибиосинтезапуринов1.2.1. Фосфорибозилпирофосфат-синтетаза 1.2.2. Амидофосфорибозилтрансфераза 1.2.3. Другиеферментыбиосинтезапуринов1.3.Особенностирегуляциибиосинтезапуринову £ . coli, в печени и мозге позвоночных 1.3.1.Регуляциябиосинтезапуринову Е. coli

стр. 75
аденозина может быть не только дефосфорилирование нуклеотидов, но ибиосинтезпуриновde novo, было изучено распределениеферментовбиосинтезапуриноввклеткахсетчатки. Посколькуферментыбиосинтезапуриновлокализованы в цитоплазмеклеток, для выяснения локализациибиосинтезапуриноввсетчаткеизмеряли

Оглавление диссертациикандидат биологических наук Киян, Юлия Александровна
ОГЛАВЛЕНИЕ
Введение
Глава 1. Обзор литературы
1.1. Многообразие функций пуринов
1.2. Реакции биосинтеза пуринов
1.2.1. Фосфорибозилпирофосфат-синтетаза
1.2.2. Амидофосфорибозилтрансфераза
1.2.3. Другие ферменты биосинтеза пуринов
1.3. Особенности регуляции биосинтеза пуринов у Е. coli,
в печени и мозге позвоночных
1.3.1. Регуляция биосинтеза пуринов у Е. coli
1.3.2. Особенности регуляции биосинтеза пуринов
в тканях позвоночных
1.3.3. Особенности биосинтеза пуринов в ткани мозга
1.4. Циркадианные ритмы в сетчатке
Глава 2. Материалы и методы исследования
2.1. Материалы
2.2. Методы получения исследуемых препаратов
2.2.1. Получение препаратов амидофосфорибозилтрансферазы и фосфорибозилпирофосфат синтетазы из сетчаток крупного рогатого скота
2.2.2. Получение препаратов наружных и внутренних
сегментов палочек
2.2.3. Получение субклеточных фракций
2.3. Общие методы исследований
2.3.1. Измерение активности амидофосфорибозилтрансферазы
2.3.2. Измерение активности фосфорибозилпирофосфат синтетазы
2.3.3. Измерение активности глюкозо-6-фосфат дегидрогеназы
2.3.4. Измерение активности сукцинат дегидрогеназы
2.3.5 Измерение скорости поглощения [14С]-рибозы
клетками Е. coli
2.3.6. Определение содержания белка
2.3.7. Определение содержания родопсина
2.3.8. Определение содержания неорганического фосфата
2.3.9. Определение содержания пирофосфата
2.3.10. Электрофорез в ПААГ
2.4. Генетические и молекулярно-биологические
методы исследований
2.4.1. Культивирование клеток
2.4.2. Выделение ДНК плазмид из клеток Е. coli
2.4.3. Получение компетентных клеток
2.4.4. Трансформация
2.4.5. Расщепление ДНК рестрикционными эндонуклеазами, электрофорез ДНК в агарозном геле, элюция ДНК из гелей
2.4.6. Мутагенез М-метил-Ы'-нитро-К-нитрозогуанидином
Глава 3. Результаты исследования
3.1. Изучение особенностей биосинтеза пуринов в сетчатке млекопитающих
3.1.1. Изучение цикличности процесса биосинтеза пуринов в сетчатке крыс
3.1.2. Очистка и характеристика амидофосфорибозилтрансферазы
из сетчатки быка
3.1.3. Очистка и характеристика фосфорибозилпирофосфат-синтетазы из сетчатки быка
3.1.4. Изучение распределения ферментов биосинтеза пуринов
в различных субклеточных фракциях сетчатки быка
3.2. Изучение роли рибозо-5-фосфата в регуляции биосинтеза пуринов
de novo у Е. coli
3.2.1. Конструкция использованных в работе плазмид
3.2.2. Изучение влияния содержания RbsD белка в клетке на рост штаммов
3.2.3. Роль рибозо-5-фосфата в ингибировании роста клеток
в присутствии избыточного количества RbsD белка
3.2.4. Влияние RbsD белка на образование фосфорибозилпирофосфата
3.2.5. Измерение активности фосфорибозилпирофосфат-синтетазы в клетках,
содержащих избыточное количество RbsD белка
3.2.6. Влияние RbsD белка на биосинтез пуринов de novo
3.2.7. Измерение активности амидофосфорибозилтрансферазы в клетках, содержащих избыточное количество RbsD белка
3.2.8. Изучение внутриклетояной локализации RbsD белка
Глава 4. Обсуждение результатов
Выводы
Список цитируемой литературы