Комплексы полинуклеотидов с белками рибосомы Escherichia coli и их свойства Сарапуу, Таго Викторович

Краткое описание

Сарапуу,ТагоВикторович.КомплексыполинуклеотидовсбелкамирибосомыEscherichiacoliиихсвойства: диссертация ... кандидата биологических наук : 03.00.03. - Тарту, 1984. - 147 с. : ил.больше
Цитаты из текста:

стр. 1
S/: iS'-j/f^J''ИНСТИТУТ ХИМИЧЕСКОЙ и БИОЛОГИЧЕСКОЙ ФИЗИКИ АН ЭССР На правах рукописиСарапууТагоВикторовичУДК 547.96.04 КОШЛЕКСЫПОЛИНУКЛЕОТИДОВСБЕЛКАМИРИБОСОМЫESCHERICHIAСОLI И ИХСВОЙСТВА03.00.03. Молекулярная биология Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный

стр. 11
белков. В изучении этих взаимодействий применяют разные методические подходы: химическую модификацию рибосомныхбелков, аффинную модификацию матричногополинуклеотида, аффинную хромато­ графию рибосомныхбелковна иммобилизованномполинуклеотиде(в качестве мРНК), УФ-индуцированные сшивки между мРНК

стр. 21
связывания poly(U) с субчастицей, лишеннойбелкаS1, на два-три порядка (Кириллов и др., 1979; Katunin et al., 1980). Из­ вестно, чторибосомыиз бактерии Baoillus stearothermophilus не содержатбелка, аналогичногобелкуS1. Добавление этогобелкаизрибосомEschert-ehia аоЪг в реакционный раствор увеличивает

Оглавление диссертациикандидат биологических наук Сарапуу, Таго Викторович
СПИСОК УПОТРЕБЛЯЕМЫХ СОКРАЩЕНИЙ
ВВЕДЕНИЕ . . . . . . . . . . . . . . . .:.
ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
Глава I. ВЗАИМОДЕЙСТВИЕ мРНК С РИБОСОМОЙ
1. Связывание мРНК в инициаторном комплексе
2. Взаимодействие мРНК с рибосомными белками во время элонгации
Глава II. ВЗАИМОДЕЙСТВИЕ тРНК С 30S СУБЧАСТИЦЕЙ .:.
Глава III. МЕХАНИЗМ ОТБОРА аа-тРНК
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ .:.
Глава I. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
1. Использованные реактивы и материалы
2. Выделение суммарного белка субчастиц и рибосомы Е. со Ъъ
3. Выделение рибосомного белка S
4. Изолирование тРНК Е.ооЪг
5. фосфорилирование TPHKPhe и тРНК^а
6. Выделение препарата аминоацил-тРНК--синтетазы
7. Иммобилизация полинуклеотидов на гидразидагарозе
8. Аффинная хроматография рибосомных белков на колонках с иммобилизованными поли-нуклеотидами :. . . . .:.
9. Аффинная хроматография тРНК на колонках с преформированными мРНК -белковыми комплексами
10. Видовой анализ тРНК, связанной с мРНК -белковыми комплексами
11. Равновесное связывание тРНК на преформированном мРНК -белковом комплексе и определение константы диссоциации образующегося комплекса
12. Определение распределения мРНКИ-белкового комплекса в пределе колонки с мРНК-агарозой
Глава II. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
1. Результаты иммобилизации полинуклеотидов.
2. Аффинная хроматография СБ70 на колонках с иммобилизованными полинуклеотидами
3. Связывание тРНК на колонках с преформированными мРНК -белковыми комплексами
3.1. Связывание тРНК на мРНКИ-СБ70 комплексы .:.
3.2. Анализ тРНК, связанной на колонках с иммобилизованными полинуклеотидами без рибосомных белков
3.3. Селекция деацилированной и аминоацилированной тРНК на колонках с преформированным мРНК -СБ70 комплексом
3.4. Связывание деацилированной тРНК на преформированные мРНК -СБ30 и мРНКИ-СБ50 комплексы . .
А. Равновесное связывание тРНК на преформированном мРНКИ-белковом комплексе и определение константы диссоциации образующегося комплекса
4.1. Определение константы диссоциации мРНКИ-СБ30)-тРНК комплекса
4.2. Определение константы диссоциации mPHKh-S13)-tPHK комплекса
Глава III. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
1. Аффинная хроматография СБ70 на колонках с иммобилизованными полинуклеотидами
2. Связывание тРНК на колонках с преформированными мРНКи-белковыми комплексами
2.1. Связывание тРНК на мРНКи-СБ70 комплексах
2.2. Связывание тРНК на мРНКи-СБ и мРНКи-СБ50 комплексах :.:.:.
2.3. Связывание тРНК на MPHK-S4, -S9 и
-S13 комплексах