Механизм локализации мРНК нового гена Germes в оогенезе шпорцевой лягушки Xenopus laevis Пономарев, Максим Борисович

Краткое описание

Пономарев,МаксимБорисович.МеханизмлокализациимРНКновогогенаGermesвоогенезешпорцевойлягушкиXenopuslaevis: диссертация ... кандидата биологических наук : 03.00.03. - Москва, 2006. - 86 с. : ил.больше
Цитаты из текста:

стр. 1
61:06-3/481 РОССИЙСКАЯ АКАДЕМИЯ НАУК ИНСТИТУТ МОЛЕКУЛЯРНОЙ БИОЛОГИИ им. В.А. ЭНГЕЛЬГАРДТА На правах рукописи НОНОМАРЕВМаксимБорисовичМЕХАНИЗМЛОКАЛИЗАЦИИмРНКНОВОГОГЕНАGERMESВООГЕНЕЗЕШНОРЦЕВОИ ЛЯТУШККXENOPUSLAEVIS03.00.03 — Молекулярная биология ДИССЕРТАЦИЯ иа соискаиие учеиой стеиеии кандидата

стр. 5
полного понимания функционированиямеханизмовлокализацииРНК. Несмотря на продолжающиеся исследования, вдентификацияновыхлокализующихся РНК и траис-действующнх белковых факторов остается актуальной задачей. В настоящей работе исследуетсямеханизмлокализациимРНКновогогенаGermesвоогенезещпорцевой

стр. 49
клеток. ЦЕЛН Н ЗАДАЧИ РАБОТЫ С целью изучениямеханизмовлокализацииРНК на вегетативный нолюс яйцаXenopuslaevisбыли поставлены следующие задачи: 1) Идентификация и клонирование кДНКновогогена,мРНКкоторого локализована на вегетативном полюсе ооцитов и ранних эмбрионовXenopuslaevis. 2) ИсследованиемеханизмалокализациимРНКна вегетативный полюс яйца. 3) Поиск цис-действующих последовательностей,...

Оглавление диссертациикандидат биологических наук Пономарев, Максим Борисович
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
ВВЕДЕНИЕ
ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
Биологическая роль локализованных РНК
Локализующиеся РНК как детерминанты развития
Drosophila
Xenopus
Асцидии
Daniorerio 10 Роль локализующихся РНК в специализации клеток половой линии
Формирование зародышевой плазмы у Drosophila
Формирование зародышевой плазмы у Xenopus
Зародышевая плазма у других организмов
Механизмы локализации РНК в клетке
Свободная диффузия и локальное заякоривание
Локализация РНК с помощью деградации
Активный транспорт
Drosophila
Xenopus
Активный транспорт в соматических клетках
Регуляция транспорта и локализации РНК
Цис-действующие последовательности
Транс-действующие факторы
Staufen hnRNP
Регуляция трансляции локализующихся мРНК
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Получение зародышевого материала лягушки 35 Анализ пространственной и временной экспрессии транскриптов, соответствующих кДНК фрагментам, с помощью метода обратной транскрипции РНК и
ПЦР амплификации (RT-PCR)
Клонирование полноразмерной кДНК Germes
Получение 3 '- области кДНК Germes с помощью 3 '-RACE
Получение 5 '- области кДНК Germes с помощью 5 '-RACE 38 Клонирование полноразмерной кДНК Germes с помощью RT-PCR
Приготовление ДНК конструктов для синтеза РНК
Микроинъекции
Получение ооцитов для микроинъекций
Синтез флуоресцентной РНК 42 Получение конфокального изображения живых ооцитов инъецированных флуоресцентной РНК
Метод сшивки с помощью ультрафиолета
Получение белкового экстракта из ооцитов
Синтез радиоактивно меченой РНК
Связывание белковых факторов с РНК
Манипуляции с ДНК, клонирование ДНК
Электрофорез в агарозном геле
Рестрикция
Зачистка концов фрагментом Кленова
Дефосфорилирование
Лигирование
Трансформация компетентных клеток
НАУЧНАЯ НОВИЗНА И ПРАКТИЧЕСКАЯ ЦЕННОСТЬ РАБОТЫ
ЦЕЛИ И ЗАДАЧИ РАБОТЫ
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ 49 Идентификация и клонирование кДНК нового гена, транскрипт которого локализован на вегетативном полюсе ооцитов и ранних эмбрионов Xenopus laevis 49 Исследование механизма локализации мРНК Germes на вегетативный полюс ооцита
Поиск цис-действующих последовательностей мРНК Germes 54 Исследование белковых факторов, взаимодействующих с З'НТО мРНК Germes
ВЫВОДЫ