Множественные формы ядерных ДНК-зависимых РНК-полимераз Crithidia Oncopelti Асеев, Виктор Васильевич

Краткое описание

Асеев,ВикторВасильевич.МножественныеформыядерныхДНК-зависимыхРНК-полимеразCrithidiaOncopelti: диссертация ... кандидата биологических наук : 03.00.03. - Москва, 1984. - 151 с. : ил.больше
Цитаты из текста:

стр. 2
тивность ядер 1.1.3. Внутриядерная локализацияРНК-полимеразных актив­ ностей 1.2. Разделение и очисткамножественныхформДНК-за­ висимыхРНК-полимераз1.2.1. Экстржция ферментов 1.2.2. РазделениеформДЕЖ-зависимыхРНК-полимераз. , 1.2.3. ОчисткаДНК-зависимыхРНК-полимераз1.3. СвойстваДНК-зависимыхРНК-полимераз1.3.1. Оптимальные условия реакции 1.3.2....

стр. 4
полиакрилаг^1идном геле в дена­ турирующих условиях Определение содержания белка иДНКРНК-полимеразная активность ядер Внутриядерная локализацияРНК-полимеразных активностей ВыделениеДНК-зависимыхРНК-полимераз. . . . РазделениеформДНК-зависимойРНК-пожмеразы Аффинная хроматографияРНК-полимеразОчисткаРНК-полшлераз при помощи гель-фильтра­ ции ОчисткаРНК-полимеразс...

Оглавление диссертациикандидат биологических наук Асеев, Виктор Васильевич
ВВЕДЕНИЕ.
Глава I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.
1.1. РНК-полимеразная активность ядер.
1.1.1. Общая характеристика.
1.1.2. Действие ингибиторов на РНК-полимеразную активность ядер.
1.1.3. Внутриядерная локализация РНК-полимеразных активностей.
1.2. Разделение и очистка множественных форм ДНК-зависимых РНК-полимераз.
1.2.1. Экстракция ферментов.
1.2.2. Разделение форм ДНК-зависимых РНК-полимераз
1.2.3. Очистка ДНК-зависимых РНК-полимераз.
1.3. Свойства ДНК-зависимых РНК-полимераз.
1.3.1. Оптимальные условия реакции.
1.3.2. Зависимость активности от концентрации субстратов
1.3.3. Действие ингибиторов на ядерные РНК-полимеразы
1.4. Субъединичное строение ядерных ДНК-зависимых РНК-полимераз.
1.4.1. Большие субъединицы
1.4.2. Мелкие субъединшда.
1.4.2.1. Субъединицы, общие для всех трех классов. . . РНК-полимераз.
1.4.2.2. Субъединицы, общие для двух классов РНК-полимераз
1.4.3. Субъединицы промежуточного размера.
Глава П. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.
2.1. Объект исследования.
2.2. Культивирование.
2.3. Выделение субклеточных структур.
2.3.1. Выделение ядер в изотонической среде
2.3.2. Выделение ядер в гипертонической среде
2.3.3. Выделение ядрышек.
2.4. Выделение и очистка ферментов^.
2.4.1. Экстракция ферментов из ядер
2.4.2. Разделение форм РНК-полимеразы.
2.4.3. Аффинная хроматография РНК-полимераз
2.4.3.1. Синтез аффинных сорбентов.
2.4.3.2. Очистка РНК-полимераз на аффинных сорбентах
2.4.4. Гель-фильтрация РНК-полимераз.
2.5. Методы получения ДНК.
2.5.1. Выделение ядерной ДНК.
2.5.2. Получение различных форм ДНК плазмиды рСО
2.5.3. Электрофорез ДНК
2.6. Определение активностей ферментов.
2.6.1. Определение активности ДНК-зависимых РНК-полимераз
2.6.2. Определение РНК-полимеразной активности субклеточных структур.
2.6.3. Определение нуклеазных активностей
2.7. Определение молекулярной массы белков.
2.7.1. Электрофорез в полиакриламидном геле в неде-натурирующих условиях.
2.7.2. Гель-фильтрация на колонках с сефакрилом
2.7.3. Электрофорез в полиакриламидном геле в денатурирующих условиях.
2.8. Определение содержания белка и ДНК.
Глава Ш. РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ.
3.1. РНК-полимеразная активность ядер.
3.2. Внутриядерная локализация РНК-полимеразных активностей.
3.3. Выделение ДНК-зависимых РЕК-полимераз
3.3.1. Разделение форм ДНК-зависимой РНК-полимеразы
3.3.2. Аффинная хроматография РНК-полимераз.
3.3.3. Очистка РНК-полимераз при помощи гель-фильтрации
3.3.4. Очистка РНК-полимераз с использованием сефакрила Б
3.4. Свойства ДНК-зависимых РНК-полимераз.
3.4.1. Влияние матрицы на активность РНК-полимераз
3.4.2. Зависимость активности от субстратов.
3.5. Структура ДНК-зависимых РНК-полимераз сгИ;Ма1а опсореИ;!.
3.5.1. Размеры молекул ферментов
3.5.2. Субъединичная структура РНК-полимераз
ЗАКЛШЕНИЕ.
ВЫВОДЫ.