Молекулярно-генетические характеристики рибосомных генов и процессы гибели клеток у больных ревматоидным артритом Шубаева, Наталья Олеговна

Краткое описание

Шубаева,НатальяОлеговна.Молекулярно-генетическиехарактеристикирибосомныхгеновипроцессыгибеликлетокубольныхревматоиднымартритом: диссертация ... кандидата биологических наук : 03.00.26. - Москва, 2004. - 131 с. : ил.больше
Цитаты из текста:

стр. 1
QilOS'-^Mr^ РОССИЙСКАЯ АКАДЕМ1Ш МЕДИЦИНСКИХ НАУК ГУ Медико-гепетическин научный центр На правах рукописи УДК 577.21ШубаеваНатальяОлеговнаМОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКИЕХАРАКТЕРИСТИКИРНБОСОМНЫХГЕНОВИПРОЦЕССЫГИБЕЛИКЛЕТОКУ БОЛЬНЬКРЕВМАТОИДНЫМАРТРИТОМДиссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Специальность 03.00.26 —молекулярнаягенетика Научный руководитель: доктор...

стр. 5
однонитевой разрыв ПДРФ - полиморфизм длин рестрикционных ферментов ПКГ - программированная клеточнаягибельПСБ - прочно связанные с рДНК белки РА -ревматоидныйартритРГ -рибосомныегеныРеА - реактивныйартритРО -рибосомныйоперон РП -рибосомныйповтор РФ -ревматоидныйфактор СКВ - системная красная

стр. 109
1. Впервые охарактеризован комплексрибосомныхгеновбольныхревматоиднымартритомв сравнении с комплексомрибосомныхгеновпрактически здоровых доноров. Установлено, что 1)больныев среднем содержат такое же общее числорибосомныхповторов, что и здоровые доноры; 2)больныев среднем содержат меньшее

Оглавление диссертациикандидат биологических наук Шубаева, Наталья Олеговна
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.
ВВЕДЕНИЕ.
ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ. Структурно - функциональная организация рибосомных повторов человека (млекопитающих).
1. Структура рибосомных повторов человека.
2. Число копий рибосомных повторов в геноме человека
2.1. Определение содержания рДНК в геноме человека.
2.2. Изменение числа копий рДНК при патологии и при старении.
3. Метилирование рибосомных повторов.
3.1. Метилирование рибосомных повторов человека и мл екопитаю щих.
3.2. Влияние метилирования на транскрипцию РГ. Изменение метилирования рДНК при патологии и старении.
4. Активные копии рибосомных генов в геноме человека.
Ag - окраска ЯОР хромосом.
5. Генные болезни, связанные с нарушением транскрипции и процессинга рРНК.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.
1. Пациенты.
2. Определение биохимических и иммунологических показателей.
3. Определение общего числа копий РГ в геномной ДНК человека.
3.1 Выделение ДНК из лейкоцитов периферической крови.
3.2. Определение концентрации ДНК.
3.3. Нерадиоактивная дот-гибридизация образцов ДНК с зондом на рДНК.
3.4. Определение гибридизационного сигнала.
3.5. Построение калибровочных зависимостей для зонда.
3.6. Определение количественного показателя метилирования.
3.7. Стандартная ошибка метода.
4. Исследование ответа культивируемых фибробластов на окислительный стресс.
4.1. Культуры клеток.
4.2. Схема эксперимента.
4.3. Определение общего количества РНК и ДНК.
4.4. Определение количества рРНК в образцах нуклеиновых кислот, выделенных из клеток.
4.5.0пределение ферментативной активности каспазы 3.
5. Выделение и анализ фрагментов ДНК сыворотки больных РА и среды культивирования фибробластов кожи.
6. Определение относительного количества активных РГ (АкРГ).
7. Статистическая обработка результатов.
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ.
1. Характеристика комплекса рибосомных генов больных ревматоидным артритом.
1.1. Общее число копий РГ в геномах больных РА.
1.2. Относительные количества активных копий РГ в геномах больных РА.
1.3. Кластеры молчащих рибосомных генов в геномах больных РА.
1.4. Уровень метилирования транскрибируемой области РГ больных РА.
1.5. Количество продукта транскрипции РГ в лимфоцитах больных РА.
1.5.1. Сопоставление относительного количества АкРГ (а) и количества РНК (рРНК) в неделящихся клетках.
1.5.2. Уровень РНК (рРНК) в лимфоцитах больных РА.
2. Разработка количественного метода оценки уровня апоптоза клеток организма.
2.1. Определение концентрации и размера фрагментов ДНК в сыворотке крови больных РА.
2.2. Изменение концентрации ДНК сыворотки в процессе лечения.
2.3. Определение фрагмента гена рРНК в сыворотке крови больных РА.
3. Характеристики комплекса РГ больных РА и количественные показатели гибели клеток организма.
4. Ответ культивируемых фибробластов кожи здоровых доноров и больных РА на окислительный стресс. Взаимосвязь скорости гибели клеток и количества активных копий РГ в геноме.
4.1. Ответ культивируемых фибробластов кожи здоровых доноров на окислительный стресс.
4.2. Количество активных рибосомные генов в геноме и интенсивность гибели клеток при действии хромата калия.