Природные каталитические антитела человека и синтетические аналоги активного центра РНКазы А как инструменты исследования структуры РНК Власов, Александр Валентинович

Краткое описание

Власов,АлександрВалентинович.ПриродныекаталитическиеантителачеловекаисинтетическиеаналогиактивногоцентраРНКазыАкакинструментыисследованияструктурыРНК: диссертация ... кандидата химических наук : 03.00.04. - Новосибирск, 1999. - 101 с. : ил.больше
Цитаты из текста:

стр. 1
РОССИЙСКАЯ АКАДЕМИЯ НАУК СИБИРСКОЕ ОТДЕЛЕНИЕ НОВОСИБИРСКИЙ ИНСТИТУТ БИООРГАНИЧЕСКОЙ ХИМИИ на правах рукописиВЛАСОВАЛЕКСАНДРВАЛЕНТИНОВИЧПРИРОДНЫЕКАТАЛИТИЧЕСКИЕАНТИТЕЛАЧЕЛОВЕКАИСИНТЕТИЧЕСКИЕАНАЛОГИАКТИВНОГОЦЕНТРАРНКазыАКАКИНСТРУМЕНТЫИССЛЕДОВАНИЯСТРУКТУРЫРНК03.00.04. - Биохимия ДИССЕРТАЦИЯ

стр. 11
РНКаза3РНКаза4РНКаза5РНКазаКбРНКазаАРНКаза1РНКаза2РНКаза3РНКаза4 РНКаза5РНКазаКбРНКазаАРНКаза1РНКаза2РНКаза3РНКаза4РНКаза5РНКазаКбРНКазаАРНКаза1РНКаза2РНКаза3РНКаза4РНКаза5РНКазаКб 10 2 0 1 2345678901 2345678901 23456 КЕТАААКРЕРОНМОЗЗТЗААЗЗЗМУС КЕЗРАККРОРаНМОЗОЗЗРЗЗЗЗТУС

стр. 40
40 3.ПРИРОДНЫЕКАТАЛИТИЧЕСКИЕАНТИТЕЛАЧЕЛОВЕКАИСИНТЕТИЧЕСКИЕАНАЛОГИАКТИВНОГОЦЕНТРАРНКазыАКАКИНСТРУМЕНТЫИССЛЕДОВАНИЯСТРУКТУРЫРНК(Результаты и их обсуждение) 3.1.АНТИТЕЛАЧЕЛОВЕКА, ОБЛАДАЮЩИЕ РИБОНУКЛЕАЗНОЙ АКТИВНОСТЬЮ В 1992 г в сыворотке крови больных системной красной волчанкой были

Оглавление диссертациикандидат химических наук Власов, Александр Валентинович
ОГЛАВЛЕНИЕ
СПИСОК ПРИНЯТЫХ СОКРАЩЕНИЙ
ВВЕДЕНИЕ
1. РИБОНУКЛЕАЗЫ ЧЕЛОВЕКА (Обзор литературы)
1.1. Введение В
1.2. РНК-гидролизующие ферменты
1.2.1. Семейство РНКазы А
1.2.1.1. Субстратная специфичность РНКаз
1.2.1.2. Деполимеризация РНК и расщепление циклофосфатов
1.2.1.3. Биологические функции
1.2.2. РНКазаН
1.2.3. РНКаза Ь
1.2.4. Лактоферрин
1.2.5. РНКаза, специфично гидролизующая двуцепочечные РНК
1.2.6. РНКазаР
1.2.7. РНКаза Т84
1.2.8. РНКаза, специфично гидролизующая поли(А) 23 1.2.9.1-РНКаза 24 1.2.10. Каталитические антитела
1.3. Использование РНКаз в диагностике и терапии
1.4. Заключение
2. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
2.1. РЕАКТИВЫ И МАТЕРИАЛЫ
2.2. МЕТОДЫ
2.2.1. Выделение иммуноглобулинов из сыворотки крови
2.2.2. Электрофоретический анализ белков
2.2.3. Тестирование нуклеазной активности в полиакриламидном геле, содержащем субстрат
2.2.4. Введение [32Р] метки в РНК
2.2.5. Расщепление РНК и ДНК препаратами антител
2.2.5.1. Гидролиз тРНК препаратами и РНКазами
2.2.5.2. Гидролиз ДНК плазмиды рВК-322 препаратами 1§0
2.2.5.3. Гидролиз тРНК имидазолом
2.2.5.4. Гидролиз тРНК синтетическими соединениями, моделирующими активный центр рибонуклеазы А
2.2.6. Фракционирование антител и РНКазы А на фильтрах СепШсоп-100
2.2.7. Определение термостабильности антител и РНКазы А
3. ПРИРОДНЫЕ КАТАЛИТИЧЕСКИЕ АНТИТЕЛА ЧЕЛОВЕКА
И СИНТЕТИЧЕСКИЕ АНАЛОГИ АКТИВНОГО ЦЕНТРА РНКазы А
КАК ИНСТРУМЕНТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ СТРУКТУРЫ РНК
(Результаты и их обсуждение)
3.1. АНТИТЕЛА ЧЕЛОВЕКА, ОБЛАДАЮЩИЕ
РИБОНУКЛЕАЗНОЙ АКТИВНОСТЬЮ
3.1.1. Выделение иммуноглобулинов из сыворотки крови человека
3.1.2. РНК- и ДНК- гидролизующая активность препаратов антител
3.1.3. Доказательство РНК-гидролизующей активности антител
3.1.3.1. Фракционирование антител и РНКазы А на фильтрах СеШпсоп-100
3.1.3.2. Термическая денатурация антител
3.1.3.3. Тестирование РНК- гидролизующей активности препаратов иммуноглобулинов после электрофоретического разделения в
полиакриламидном геле, содержащем субстрат
3.1.4. Многообразие рибонуклеазных активностей препаратов антител
3.1.5. Влияние ионной силы, катионов двухвалентных металлов и рН на РНК-гидролизующую активность антител
3.1.6. Структурная специфичность РНК-гидролизующей активности антител
37
38
38
39
39
40 40
3.2. СИНТЕТИЧЕСКИЕ МОЛЕКУЛЫ, ИМИТИРУЮЩИЕ АКТИВНЫЙ ЦЕНТР РНКазы А, КАК ИНСТРУМЕНТЫ
ИССЛЕДОВАНИЯ СТРУКТУРЫ РНК
3.2.1. Имидазол как простейшая модель активного центра РНКазы А
3.2.1.1. Исследование расщепления имидазолом тРНКА8р
3.2.1.2. Исследование расщепления имидазолом тРНКРЬе
3.2.1.3. Исследование расщепления имидазолом тРНКРЬе в комплексе
с олигонуклеотидами
3.2.2. Исследование расщепления РНК конъюгатами на основе олиголизина и гистидина
75
5. ВЫВОДЫ
6. СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
Трис трис (гидроксиметил) аминометан
вББ додецилсульфат натрия
ЭДТА этилендиамин тетраацетат
ПААГ полиакриламидный гель
СКВ системная красная волчанка