Протеомный анализ белковых комплексов и экзосом плаценты человека Буркова Евгения Евгеньевна

Краткое описание

Буркова,ЕвгенияЕвгеньевна.Протеомныйанализбелковыхкомплексовиэкзосомплацентычеловека: автореферат дис. ... кандидата биологических наук : 03.01.04 /БурковаЕвгенияЕвгеньевна; [Место защиты: Институт химической биологииифундаментальной медицины Сибирского отделения Российской академии наук]. - Новосибирск, 2020. - 21 с.больше
Цитаты из текста:

стр. 1
На правах рукописиБУРКОВАЕВГЕНИЯЕВГЕНЬЕВНАПРОТЕОМНЫЙАНАЛИЗБЕЛКОВЫХКОМПЛЕКСОВИЭКЗОСОМПЛАЦЕНТЫЧЕЛОВЕКА03.01.04 биохимия Автореферат диссертации

стр. 3
свойства ее компонентов в формировании развивающегося организма, важным является исследованиебелковых1комплексовиэкзосомплаценты. Характеризацияэкзосоми стабильныхбелковыхкомплексовплацентыявляется важным шагом в исследовании функциональных особенностейплацентычеловека, которые реализуются

стр. 6
размером пор 0,22 мкм. Полученный экстракт использовали для выделениябелковыхкомплексовиэкзосом.Белковыекомплексывыделяли изплаценттрех женщин,экзосомы изплацентвосьми женщин. 2.Анализбелковогосостава и каталитических активностей стабильного высокомолекулярногобелковогокомплексаплаценты

Оглавление диссертациикандидат наук Буркова Евгения Евгеньевна
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
ВВЕДЕНИЕ
1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1. Строение плаценты
1.2. Функции плаценты
1.3. Белки плаценты
1.3.1. Белки беременности
1.3.2. Растворимые белки плаценты
1.3.3. Белки, связанные с мембраной
1.4. Экзосомы плаценты: биогенез, состав, методы выделения
1.4.1. Типы внеклеточных везикул
1.4.2. Структура и биогенез экзосом
1.4.2.3. Секреция экзосом
1.4.3. Механизмы взаимодействия экзосом с клетками-мишенями
1.4.4. Методы выделения экзосом
1.4.5. Состав плацентарных экзосом
1.4.6. Роль плацентарных экзосом при беременности
1.4.7. Экзосомы плаценты как маркеры патологий беременности
Заключение к разделу
2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
2.1. Материалы
2.2. Методы
2.2.1. Получение экстракта плаценты человека
2.2.2. Выделение высокомолекулярного белкового комплекса из экстракта плаценты
2.2.3. Выделение экзосом из экстракта плаценты человека
2.2.4. Аффинная хроматография экзосом на анти-CD81-сефарозе
2.2.5. Электронно-микроскопический анализ препаратов экзосом и белковых комплексов плаценты
2.2.6. Проточная цитометрия
2.2.7. Определение концентрации белка
2.2.8. Анализ стабильности высокомолекулярного белкового комплекса
2.2.9. Одномерный электрофоретический анализ белков
2.2.10. Двумерный электрофоретический анализ белков
2.2.11. Трипсинолиз белков после электрофореза
2.2.12. MALDI-TOF масс-спектрометрический анализ
2.2.13. Обращенно-фазовая хроматография пептидов экзосом плаценты
2.2.14. Перенос белков на PVDF-мембрану и окрашивание коллоидным серебром
2.2.15. Иммуноферментное окрашивание белков
2.2.16. Определение ДНКазной активности стабильного высокомолекулярного белкового комплекса
2.2.17. Спектрофлуориметрическое определение кажущихся констант диссоциации белкового комплекса с олигонуклеотидом
2.2.18. Тестирование ДНК-гидролизующей активности стабильного высокомолекулярного белкового комплекса in situ в геле, содержащем субстрат
2.2.19. Определение РНКазной активности стабильного высокомолекулярного белкового комплекса
2.2.20. Определение АТРазной активности стабильного высокомолекулярного белкового комплекса
2.2.21. Определение фосфатазной активности стабильного высокомолекулярного белкового комплекса
2.2.22. Определение протеолитической активности стабильных высокомолекулярных белковых комплексов
2.2.23. Определение амилолитической активности стабильных высокомолекулярных белковых комплексов
2.2.24. Анализ каталазной активности стабильных высокомолекулярных белковых комплексов
2.2.25. Определение пероксидазной и оксидоредуктазной активностей стабильных высокомолекулярных белковых комплексов
2.2.26. Определение цитотоксичности стабильного высокомолекулярного белкового комплекса
2.2.27. Выделение и анализ РНК
3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
3.1. Анализ белкового состава и каталитических активностей стабильного
высокомолекулярного белкового комплекса плаценты человека
3.1.1. Выделение высокомолекулярного белкового комплекса из экстракта плаценты человека69
3.1.2. Анализ стабильности высокомолекулярного белкового комплекса плаценты человека
3.1.3. Идентификация белков стабильного высокомолекулярного комплекса плаценты человека
3.1.4. Анализ РНК стабильного высокомолекулярного белкового комплекса плаценты человека
3.1.5. Анализ каталитических активностей препаратов стабильного высокомолекулярного белкового комплекса плаценты человека
3.1.6. Анализ цитотоксичности стабильного высокомолекулярного белкового комплекса плаценты человека
3.2. Экзосомы плаценты человека: выделение, анализ морфологии и белков
3.2.1. Выделение экзосом из экстракта плаценты
3.2.2. Исследование препаратов экзосом плаценты человека на различных стадиях очистки с помощью просвечивающей электронной микроскопии
3.2.3. Проточная цитофлуориметрия экзосом плаценты человека
3.2.4. Анализ белков экзосом плаценты человека
3.2.5. Анализ пептидов и малых белков экзосом
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ