Структурно-функциональная организация хромосом и изменение генома у трансгенных сельскохозяйственных животных Козикова, Лариса Васильевна

Краткое описание

Козикова,ЛарисаВасильевна.Структурно-функциональнаяорганизацияхромосомиизменениегеномаутрансгенныхсельскохозяйственныхживотных: диссертация ... доктора биологических наук : 03.00.15. - Санкт-Петербург-Пушкин, 2005. - 321 с. : ил.больше
Цитаты из текста:

стр. 1
71:06-3/133 ГОСУДАРСТВЕННОЕ НАУЧНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ВСЕРОССИЙСКИЙ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ ГЕНЕТИКИ И РАЗВЕДЕНИЯСЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХЖИВОТНЫХРОССИЙСКОЙ АКАДЕМИИСЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХНАУК НА ПРАВАХ РУКОПИСИКОЗИКОВАЛАРИСАВАСИЛЬЕВНАСТРУКТУРНО-ФУНКЦИОНАЛЬНАЯОРГАНИЗАЦИЯХРОМОСОМИИЗМЕНЕНИЕГЕНОМАУТРАНСГЕННЫХСЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХЖИВОТНЫХСпециальность 03.00.15 - генетика ДИССЕРТАЦИЯ...

стр. 16
иизменениигеномовсельскохозяйственныхживотных(Ленинград, 1994); I международной конференции "Молекулярно-генетические маркерыживотных" (Киев, 1994); международном симпозиуме "Молекулярная генетика и биотехнология в оценкеизменениягеномовсельскохозяйственныхживотных(С.-Петербург, (Варшава);

стр. 25
белками для различных уровнейструктурнойорганизации, начиная от нуклеосомы и завершая митотическимихромосомами(Лимбарский,2002). 26 1.1.2. Характеристикагеномаптиц Интерес к изучениюструктурно-функциональнойорганизациихромосомптиц вызван с одной стороны консервативностью класса Aves, с другойналичием

Оглавление диссертациидоктор биологических наук Козикова, Лариса Васильевна
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
ВВЕДЕНИЕ
ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1.Структурно-функциональная характеристика хромосом и гетерохроматина
1Л .2. Характеристика генома птиц
1.1.3. Нарушения структуры и функции хромосом
1.1.4. Использование методов трансгеноза для изучения структурно-функциональных характеристик хромосом
1.2. Линейная дифференцированность хромосом
1.2.1. Дифференциальная окраска хромосом 36 1.2.2.0рганизация генома и линейная дифференцированность хромосом
1.3. Репродукция хромосом 41 1.3.1 .Молекулярные аспекты репликации ДНК
1.3.2.Клеточный цикл
1.3.3.Меж- и внутрихромосомная асинхронность синтеза ДНК
1.4. Трансгеноз
1.4.1. Методы генетической модификации генома млекопитающих
1.4.2. Введение рекомбинантных плазмид в ядро оплодотворенной яйцеклетки
1.4.3. Эффективность трансгеноза у лабораторных и сельскохозяйственных животных
1.4.4. Молекулярные механизмы трансгеноза
1.4.5. Экспрессия генных конструкций
1.4.6. Выведение линий трансгенных животных
1.4.7. Особенности роста трансгенных животных
1.4.8. Активация эмбрионального генома
1.4.9. Перспективы использования трансгенных животных 78 1.5. Заключение к обзору литературы
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ
2.1. Материал исследования
2.2. Приготовление препаратов митотических хромосом 87 2.2.1 .Получение препаратов митотических хромосом из культуры эмбриональных фибробластов кур
2.2.2. Приготовление препаратов хромосом из клеток костного мозга
2.2.3. Культивирование лейкоцитов периферической крови и приготовление препаратов хромосом
2.3 Метод авторадиографии
2.3.1. Применение авторадиографии для исследования репродукции хромосом.
2.3.2. Анализ радиоавтографов
2.3.3. Авторадиографический анализ зигот кроликов и получение ультратонких срезов
2.4. Методы, выявляющие линейную дифференцированность хромосом
2.4.1. G-окраска хромосом кур и свиней
2.4.2. RBA-окраска хромосом кролика
2.5. Деиситометрия
2.6. Морфометрический анализ и статистическая обработка материала
2.7. Кариотипирование хромосом кроликов и свиней
2.8. Получение вазектомированных кроликов
2.9. Получение зародышей кролика на стадии двух пронуклеусов
2.10. Подготовка доноров и реципиентов свиней
2.11. Метод микроиньекции генов в пронуклеусы зигот
2.12. Трансплантация зародышей
2.13. Получение эмбрионов коров in vitro
2.13.1. Созревание ооцитов in vitro
2.13.2. Оплодотворение ооцитов коров in vitro и получение зигот
2.13.3. Культивирование in vitro эмбрионов коров
2.14. Методы, используемые при анализе экспрессии репортерных генов
2.14.1 .Экспрессия GFP-гена
2.14.2. Экспрессия LacZ гена
2.15. Скрининг трансгенных животных
2.16. Генетические конструкции, использованные для микроиньекции в ранние эмбрионы
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
3.1. Морфометрический анализ макрохромосом кур
3.1.1. Размеры и морфология макрохромосом кур
3.1.2. Аберрации хромосом у эмбрионов кур
3.1.3. Влияние криоконсервации и сроков хранения семени на частоту и спектр хромосомных аберраций у кур
3.2. Линейная дифференцированность хромосом кур
3.2.1. Характеристика G-полос в макрохромосомах кур
3.2.2. Картирование G-полос первой пары аутосом домашних кур
3.3. Репродукция хромосом кур
3.3.1. Определение параметров G2- и S- периодов
3.3.2. Включение 3Н-тимидина в макро- и микрохромосомы цыплят 136 3.3.2.1.Репродукция хромосом кур в культуре эмбриональных фибробластов
3.3.3. Межхромосомная асинхронность синтеза ДНК
3.3.3.1. Межхромосомная асинхронность репликации ДНК в эмбриональных фибробластах кур
3.3.3.2. Межхромосомная асинхронность репликации ДНК в клетках костного мозга цыплят
3.3.4. Внутрихромосомная асинхронность синтеза ДНК
3.3.4.1. Внутрихромосомная асинхронность репликации ДНК в начале S-периода
3.3.4.2. Внутрихромосомная асинхронность синтеза ДНК в конце S-периода
3.3.5. Взаимосвязь линейной структуры хромосом с внутрихромосомной асинхронностью репликации ДНК на примере 1-й аутосомы кур
3.4. Характеристика репликационной активности генома кролика методом RBA-маркирования
3.4.1.Идентификация хромосом кролика и кариотипирование
3.4.2. Характеристика репликационной активности генома кролика во второй половине S-периода
3.4.3. Сравнительная характеристика хромосом разных уровней конденсации
3.5.Первый раунд репликации ДНК в пронуклеусах кроликов
3.6. Перенос генов соматотропной оси в зиготы кроликов
3.6.1. Получение ранних эмбрионов на стадии зиготы с оценкой их качества
3.6.2. Влияние процесса микроинъекции и величины микроигл на выживаемость эмбрионов
3.6.3. Влияние различных манипуляций, включая трансплантацию, на жизнеспособность зародышей до момента рождения
3.6.4.Анализ интеграции генетических конструкцций
МТ-1 / bGH и МТ-1 /hGRF в геном кроликов
3.6.5. Фенотипические показатели трансгенных кроликов с перенесенными генами hGRF и bGH
3.6.6. Характер наследования трансгенов hGRF и bGH и фенотипический анализ
3.6.7. Изучение стабильности генома кроликов, полученных из эмбрионов, в которые микроинъецировали генную конструкцию МТ-1 /hGRF.
3.7. Введение гена рилизинг фактора гормона роста человека в оплодотворенные яйцеклетки свиней с последующим генетическим анализом
3.7.1. Получение ранних эмбрионов свиней и оценка их качества
3.7.2 Визуализация пронуклеусов и микроинъекция генной конструкции hGRF в зиготы свиней
3.7.3. Гибридизационный анализ интеграции гена hGRF в геном свиней
3.7.4. Фенотипические показатели трансгенных свиней
3.7.5. Цитогенетический анализ и изучение уровня стабильности генома свиней, полученных из эмбрионов, в которые микроинъецировали ген hGRF
3.7. Экспрессия репортерных генов у доимплантационных зародышей сельскохозяйственных животных
3.7.1. Экспрессия генов Lac Z у ранних эмбрионов кроликов
3.7.2. Экспрессия GFP гена у эмбрионов коров, полученных in vitro