Генетические последствия интеграции эписомной плазмиды в дрожжевые хромосомы Булат, Сергей Алексеевич

Короткий опис

Булат,СергейАлексеевич.Генетическиепоследствияинтеграцииэписомнойплазмидывдрожжевыехромосомы: диссертация ... кандидата биологических наук : 03.00.15. - Ленинград, 1984. - 191 с. : ил.больше
Цитаты из текста:

стр. 1
(^/•- XT- S/E/- '•/ Академия наук СССР ЛЕШШХРДЦСКИ^! ИНСШТУТ ЯДЕРНОЙ ФИЗИКИ имени Б.П.Константинова На правах рукописи УДК 575.24:576.85БУЛАТСергейАлексеевичГЕНЕТИЧЕСКИЕПОС;ЩСТВИЯИНТЕГРАЦИИЭШСОМНОЙ тшшт вДРОЖЖЕВЫЕХРОМОСОШ Специальность 03.00.15 - генетика Д и с с е р т а ц и я на соиска1ше ученой

стр. 3
Стабильность трансформантов по плазмдцному маркеру 41 3.2, Экстрахромосомяое наследованиеплазмидыpYP9i 45 3.3,Интеграцияэписомнои плазгяиды pYF9i вдрож­ жевыехромосомы47 3.3.1, Эффективностьинтеграцииэписомноиплазмиды47 3.3.2, Специфичность хромосомнойинтеграцииэписомноиплазмиды48 3.3.2.1, Идентификацияхромосом, в которые произошлаинтеграцияплазтлиды , 49 3.3.2.2, Картирование сайтовинтеграции...

Оглавление диссертациикандидат биологических наук Булат, Сергей Алексеевич
ВВЕДЕНИЕ.
1. Актуальность проблемы.
2. Цель и задачи исследования
3. Научная новизна и практическая ценность
4. Апробация работы.
5. Структура и объем работы
Глава I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ Рекомбинация плазмид с дрожжевыми хромосомами
Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.
2.1. Штаммы дрожжей S. cerevisiae.
2.2. Культуральные среды.
2.3. Характеристика использованных пяазмид
2.4. Трансформация дрожжей.
2.5. Методы генетического анализа.
2.5.1. Анализ митотической стабильности трансформантов и интегрантов
2.5.2. Селекция /с±г+/ трансформанта на высокую нестабильность и отбор интегрантов
2.5.3. Определение частоты хромосомной интеграции плазмиды (флуктуационный тест).
2.5.4. Эффективность споруляции гибридов
2.5.5. Получение споровых сегрегантов и метод тетрадного анализа
2.5.6. Анализ митотической стабильности гибридов
2.5.7. Получение дрожжевых штаммов /с±г°/ генотипа.
2.6. Методы биохимического анализа.
2.6.1. Тест на бета-лактамазную активность
2.6.2. Определение 2 мкм ДНК.
2.7. Анализ нуклеотидных последовательностей ДНК
Глава 3. ПОВЕДЕНИЕ ЭШСОМНОЙ Ш1АЗМИДЫ В ТРАНСФОШАНТАХ
И ИНТЕГРАНТАХ.
3.1. Стабильность трансформантов по плазмидному маркеру.
3.2. Экстрахромосомное наследование илазмиды pYP9i.
3.3. Интеграция эписомной плазмиды pYP9i в дрожжевые хромосомы.
3.3.1. Эффективность интеграции эписомной плазмиды.
3.3.2. Специфичность хромосомной интеграции эписомной плазмиды.
3.3.2.1. Идентификация хромосом, в которые произошла интеграция плазмиды
3.3.2.2. Картирование сайтов интеграции плазмиды в химерных хромосомах
А. Картирование сайтов интеграции плазмиды в Ш химерной хромосоме . 56 Б. Картирование сайтов интеграции плазмиды в других химерных хромосомах
3.3.3. Экспрессия и наследование бактериального гена в составе интегрированной плазмиды.
3.3.4. Стабильность химерных хромосом в гаплоидных интегрантах.
Глава 4. МЕЙОТИЧЕСКАЯ РЕКОМБИНАЦИЯ У ДИШЩЦОВ, СОДЕРЖАЩИХ
ИНТЕГРИРОВАННУЮ ПЛАЗМИДУ.
4.1. Выживаемость спор в тетрадах гибридов, содержащих интегрированную плазмиду.
4.2. Нерегулярное расщепление по плазмидным и хромосомным маркерам.•.
4.3. Влияние интегрированной плазмиды на мейотический кроссинговер
Глава 5. МИТОТИЧЕСКАЯ ДЕСТАБИЛИЗАЦИЯ ХИМЕРНЫХ ХРОМОСОМ В
ДИПЛОИДАХ.
5.1. Дестабилизация химерных хромосом в гибридах интегрантов по Ш хромосоме.
5.2. Дестабилизация химерных хромосом в гибридах интегрантов по I, 1У и У хромосомам.
5.2.1. Дестабилизация I химерной хромосомы
5.2.2. Дестабилизация 1У химерной хромосомы
5.2.3. Дестабилизация У химерной хромосомы
5.3. Дестабилизация неидентифицированяых химерных хромосом.
5.4. Дестабилизация химерных хромосом в Rad" диплоидах.
Глава 6. ОБСУЖДЕНИЕ.
ВЬВОДЫ.