Процессы ооплазматической сегрегации и формирования клеточной линии трохобластов в раннем развитии Nereis virens Костюченко, Роман Петрович

Короткий опис

Костюченко,РоманПетрович.ПроцессыооплазматическойсегрегациииформированияклеточнойлиниитрохобластоввраннемразвитииNereisvirens: диссертация ... кандидата биологических наук : 03.00.11. - Санкт-Петербург, 1999. - 132 с. : ил.больше
Цитаты из текста:

стр. 1
САНКТ-ПЕТЕРБУРГСКИ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ На правах рукописи УДК 591КОСТЮЧЕНКОРоманПетровичПРОЦЕССЫООПЛАЗМАТИЧЕСКОЙСЕГРЕГАЦИИИФОРМИРОВАНИЯКЛЕТОЧНОЙЛИНИИТРОХОБЛАСТОВВРАННЕМРАЗВИТИИNEREISVIRENS03.00.11 - э м б р и о л о г и я , гистология и ц и т о л о г и я Диссертация на с о и с

стр. 29
а ц и я в р а с т в о р а х цитохалазина В Д л я в ы я с н е н и я роли а к т и н о в ы х э л е м е н т о в ц и т о с к е л е т а впроцессахооплазматическойсегрегациии для блокированияклеточныхделений во времяраннегоразвитиязародышей культивировали в растворах цитохалазина В (Sigma) н а п а

стр. 112
позволят дать ответ на вопрос, существенны ли межклеточные взаимодействия для спецификацииклеточнойлиниитрохобластов. А вероятно, приблизит применение к методов гибридизации in situ, весьма этого нас пониманию молекулярных механизмовпроцесса. Выяснение реальных механизмов спецификацииклеточнойлиниитрохобластовисследований. в эмбриогенезе полихет составляет задачу дальнейших 113 5. В Ы В О Д Ы 1. В г о т о в о м к о п л о д о т в о р е н и...

Оглавление диссертациикандидат биологических наук Костюченко, Роман Петрович
1. ВВЕДЕНИЕ.2
1.1. От яйца к зародышу: спецификация клеток.2
1.2. Цитоплазматическая локализация.3
1.3. Экспериментальные доказательства цитоплазматической локализации.4
1.3.1. Эксперименты по изоляции бластомеров.4
1.3.2. Факторы, содержащиеся в цитоплазме яйца, могут определять спецификацию бластомеров.6
1.3.3. Цитоплазматические детерминанты действительно существуют.12
1.4. Ооплазматическая сегрегация.14
1.5. Основные черты нормального развития нереид.19
1.6. Трохобласты - модель для изучения клеточной спецификации и дифференциации.20
2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ.23
2.1. Материал. 23
2.1.1. Объект исследования.23
2.1.2. Получение гамет, искусственное осеменение, культивирование зародышей.23
2.2. Световая микроскопия.24
2.2.1. Прижизненные наблюдения.24
2.2.2. Фиксации для световой микроскопии.24
2.2.2.1. Жидкость Ценкера.24
2.2.2.2. Жидкость Буэна.24
2.2.2.3. 3,7%-ный раствор формалина на ПБС.25
2.2.2.4. 3,7%-ный раствор формалина на Tris-CMFSW.25
2.2.3. Тотальные препараты.25
2.2.3.1. Окраска галлоцианином.25
2.2.3.2.Окраска ДНК DAPI и Hoechst 33342.26
2.2.3.3. Снятие оболочек.26
2.2.3.4. Иммуноцитохимическое выявление тубулина ресничек и цитоскелетного кортекса.26
2.2.3.5. Выявление Р-актина родамин-фаллоидином.27
2.2.4. Парафиновые и полутонкие срезы.28
2.2.4.1. Изготовление срезов.28
2.2.4.2. Изготовление реконструкций зародышей по серийным полутонким срезам.28
2.2.5. Инкубация в растворах ингибиторов.29
2.2.5.1. Инкубация в растворах колхицина и нокодазола.29
2.2.5.2. Инкубация в растворе колхицина и цитохалазина В.29
2.2.5.3. Инкубация в растворах цитохалазина В.29
2.2.5.4. Инкубация в растворах актиномицина Р.30
2.2.5.4. Инкубация в растворах афидиколина.30
2.3. Электронная микроскопия .31
2.3.1. Трансмиссионная электронная микроскопия.31
2.3.2. Сканирующая электронная микроскопия.31
2.4. Фотографирование.32
2.5. Статистические методы.32
3. РЕЗУЛЬТАТЫ.- 34
3.1. Нормальное развитие.34
3.1.1. Закончивший рост ооцит.34
3.1.2. Подготовка к первому делению дробления и процессы ооплазматической сегрегации.37
3.1.2.1. Кортикальная реакция.37
3.1.2.2. Морфологические изменения в яйце перед делениями созревания 37
3.1.2.3. Первое и второе мейотические деления.40
3.1.2.4. Формирование зиготы.45
3.1.3. Деления дробления.49
3.1.3.1. Первое деление дробления.49
3.1.3.2. Второе деление дробления.49
3.1.3.3. Третье деление дробления.55
3.1.3.4. Четвертое деление дробление.58
3.1.3.5. Пятое деление дробления.61
3.1.4. Трохофора.61
3.1.4.1. Формирование личинки.61
3.1.4.2. Строение прототроха.69
3.2. Аномалии в развитии.69
3.3. Влияние цитоскелетных ингибиторов на процессы ооплазматической сегрегации.71
3.3.1 Влияние колхицина.71
3.3.2. Влияние нокодазола.74
3.3.3. Влияние цитохалазина В.75
3.3.4. Одновременное воздействие колхицина и цитохалазина В.78
3.4. Влияние некоторых ингибиторов на дифференциацию трохобластов.78
3.4.1. Влияние цитохалазина В на дифференциацию трохобластов.78
3.4.2. Влияние актиномицина D на дифференциацию трохобластов.88
3.4.3. Влияние афидиколина на дифференциацию трохобластов.88
4. ОБСУЖДЕНИЕ.96
4.1. Структурные изменения периферии яйца после плодотворения . 96
4.2. Ооплазматическая сегрегация у Nereis virens.99
4.3. Асимметрия веретена и его положения - важный организующий фактор развития.102
4.4. Дифференциация первичных трохобластов.105
4.4.1. Строение и функции прототроха у различных животных.105
4.4.2. Дифференциация первичных трохобластов.107
4.4.3. Модель спецификации трохобластов.109
5. ВЫВОДЫ.113