Исследование биосинтеза и стабильности супероксиддисмутазы в культуре ткани Panax ginseng Комов, Юрий Вадимович

Краткое описание

Комов,ЮрийВадимович.ИсследованиебиосинтезаистабильностисупероксиддисмутазывкультуретканиPanaxginseng: диссертация ... кандидата биологических наук : 03.00.04. - Санкт-Петербург, 2000. - 113 с.больше
Цитаты из текста:

стр. 1
МИтТСТЕРСТВО з ДРАВООХР А Н Е Ш Я РОССРТЙСКОЙ ФЕДЕР АЦРТИ САНКТ-ПЕТЕРБУРГСКАЯ ГОСУДАСРТВЕННАЯ ХИМИКО-ФАРМАЦЕВТИЧЕСК.'ЧЯ .АКАДЕМИЯ На правах рукописиКОМОВЮРИЙВ А Д И М О В тИССЛЕДОВАНИЕБИОСИНТЕЗА. ИСТАБИЛЬНОСТИСУПЕРОКСИДДИСМУТАЗЫВКУЛЬТУРЕТК>Л1Т P A N A XGINSENGСпециальность - 03.00.04 - биологическая

стр. 47
шоку [ McKersie B.D.et all 1993]. 48 ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫИССЛЕДОВАНИЯ. 2.1. Объектисследованияи метод культивированияткани. Объектомисследованияв данной работе служилакультуратканиженьшеня обыкновенного Ранахginseng[Бутенко Р.Г., 1986] которая была полу'чена из корней нативных растений

стр. 59
накопления биомассы и содержание белка в процессе роста клетоккультурытканилекарственного растенияPanaxgiseng. В течение 40 дневного ростакультурытканиженьшеня каждые 5 дней отбирали навескуткани.Тканьгомогенизировали с 0,05 М триссолянокислым буфером в соотношении 1:1 (W/V) и центрифугировали

Оглавление диссертациикандидат биологических наук Комов, Юрий Вадимович
Введение
ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1. Супероксиддисмутаза
1.1.2. Структура молекулы и активного центра Си,2п-СОД
1.1.3. Влияние электростатического взаимодействия на механизм действия СОД
1.1.4. Изоформы СОД
1.2. Методы выделения и очистки СОД
1.2.1. Выделение СОД с помощью лиганд-обменной хроматографии
1.3. Применение супероксиддисмутазы
1.4. Метод культуры растительных тканей
1.5. Кругооборот белков в растительных тканях
1.5.1. Общая характеристика кругооборота белков в растениях
1.5.2. Кругооборот белков в процессе прорастания семян
1.5.3. Кругооборот белка в период активного роста
1.5.4. Кругооборот белка при старении
1.5.5. Кругооборот белков при созревании фруктов
1.6. Влияние высоких и низких температур на синтез белка
1.6.1. Действие высокой температуры на модификацию белкового метаболизма
1.6.2. Действие низкой температуры на модификацию белкового метаболизма
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Объект исследования и метод культивирования ткани
2.2. Выделение и очистка СОД из культивируемых растительных клеток
2,З.Определение активности супероксиддисмутазы
2.4. Электрофоретические методы
2.4.1. Диск-электрофорез в 10% полиакриламидном геле
2.4.2. Диск-электрофорез в 10% ПААГ с ДС-Na.
2.4.3. Определение активности СОД в геле
2.5. Определение содержания общего белка
2.6. Получение моноспецифических антисывороток к СОД
2.7. Двойная радиальная иммунодифузия в геле
2.8. Определение параметров обмена индивидуальных белков и общего белка в растительных клетках
2.9. Изучение влияния температурного шока на состояние общего белка и СОД в клетках женьшеня
2.10. Статистическая обработка результатов
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
3.1. Динамика накопления биомассы и содержание белка в процессе роста клеток культуры ткани лекарственного растения Panax giseng
3.2. Обмен внутриклеточного белка в каллусной культуре Р. ginseng
3.3. Изучение СОД в процессе роста культуры ткани Panax ginseng
3.4. Молекулярная гетерогенность СОД
3.5.Выделение и очистка СОД из культуры ткани женьшеня
3.5.1. Синтез иминодиацетат-сефарозы 6В
3.6. Определение молекулярной гетерогенности полученного фермента
3.7.Физико-химические свойства выделенной супероксиддисмутазы
3.7.1. Зависимость активности СОД от времени
3.7.2. Оптимум рН для супероксиддисмутазы
3.7.3. Зависимость активности фермента от температуры
3.7.4. Определение молекулярной массы СОД
3.7.5. Электрофорез в ПААГ с ДС-Na
3.8. Кругооборот СОД в каллусной культуре Р. ginseng
3.9. Влияние температуры на состояние внутриклеточного белка и СОД в клетках женьшеня
3.9.1. Влияние высокотемпературного шока и 24 -ти часовой адаптации на состояние внутриклеточного белка
3.9.2. Влияние высокотемпературного шока и 24-ти часовой адаптации на активность СОД
3.9.3. Влияние низких температур и 24-ти часовой адаптации на состояние общего белка
3.9.4. Влияние низкотемпературного шока и 24-ти часовой адаптации на активность СОД в культуре ткани женьшеня
ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
ВЫВОДЫ