Исследование конформации ингибиторов протеиназ, выделенных из фасоли и картофеля, методами КД-спектроскопии и модификации функциональных групп Дронова, Лидия Александровна

Краткое описание

Дронова,ЛидияАлександровна.Исследованиеконформацииингибиторовпротеиназ,выделенныхизфасолиикартофеля,методамиКД-спектроскопииимодификациифункциональныхгрупп: диссертация ... кандидата биологических наук : 03.00.04. - Москва, 1983. - 174 с. : ил.больше
Цитаты из текста:

стр. 1
АКАДШЙЯ НАУК СССР ОРДЕНА ЛЕНИНА ИНСТИТУТ БИОХИМИИ им. А.Н.БА5СА На правах рукописиДРОНОВАЛддияАлександровнаУДК 577.II2.4ИССЛЕДОВАНИЕКОНФОРМАЦЩ ЙНЕЖИТОРОВПРОТЕИНАЗ,ВЫДЕЛЕННЫХИЗФАСОЛИИКАРТОФЕЛЯ, МЕТ0ДА1М КД-СПЕКТРОСКОПИИИМОДИФИКАЦИИФУНКЦИОНАЛЬНЫХГРУПП03,00.04 - биохимия Д и с с е р т а

стр. 10
позволяющим получать информацию о количественном содержании £?<-, /- и неупорядоченных структур в белках являетсяметодкругового дихроизма /2/. - 10 в цредставленной диссертационной работеметодомкругового дихроизма исследованаконформациядвух белков-ингибиторов,вы­ деленныхиз семянфасолии клубнейкартофеля. Обаингибиторахарактеризуются высоким содержанием дисульфидных связей, но в отличие отингибитораизфасоли...

стр. 37
4 ! 6 7 5 6 10 II 4 5 ! 6 0,21 0,19 0,21 0,20 0,37 0,32 0,30 1.ИнгибиторБаумана-Бирк из сои 2.Ингибиториз лимскойфасоли3.Ингибиториз нута 4.Ингибиторизфасолиугловатой 5.ИнгибиторКунитца из сои 6.Ингибитортрипсина из ячменя 7. ПанкреатическийингибиторКунитца li * 3 1 3 61 174 398 399

Оглавление диссертациикандидат биологических наук Дронова, Лидия Александровна
ВВЕДЕНИЕ.
ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1. КОНФОРМАЦИОННЫЕ СВОЙСТВА ГЛОБУЛЯРНЫХ БЕЛКОВ.II
1.1. Принципы организации и стабилизации структуры . II
1.2. Круговой дихроизм.
1.2.1. Определение вторичной структуры из спектров КЦ.
1.2.2. Спектры 1ЭД в ближней УФ-области.
2. КРУГОВОЙ ДИХРОИЗМ ИНГИБИТОРОВ ПРОТЕАЗ И ИХ КОМПЛЕКСОВ
С ПРОТЕИНАЗАМИ.
2.1. Вторичная структура.
2.2. Третичная структура.
2.3. Свойства комплекса ингибитор-протеиназа . 57 ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.
1. Материалы.
2. Спектрофотометрические измерения.
2.1. Спектры КД и спектры поглощения.
2.2. Собственная флуоресценция.
2.3. Флуоресценция зонда.
3. Гель-хроматография.
4. Седиментационный анализ.
5. сйектрофорез в полиакриламидном геле.
6. Изоэлектрофокусирование в геле.
7. Диссоциация комплекса фермент-ингибитор.
8. Ограниченный протеолиз.
9. Восстановление дисульфидных связей.
10. Оцределение содержания сульфгидрильных групп.
11. Модификация остатков лизина.
12. Модификация остатков аргинина.
13. Модификация остатков тирозина.
14. Определение ингибиторной активности
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛВДОВАНИИ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
1. СРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ КОНФОРМАЦИИ ИНГИЬЖОРОВ ПРОТЕАЗ ИЗ ФАСОЛИ И КАРТОФЕЛЯ.
1.1. Конформация нативных молекул ингибиторов
1.2. Влияние денатурирующих агентов на конформацшо ингибитора из фасоли
1.3. Влияние денатурирующих агентов на конформацию ингибитора из картофеля.
1.4. Флуоресцентные свойства ингибиторов.
2. ОСОБЕННОСТИ КОНФОШАЦИОННЫХ ПРЕВРАЩЕНИЙ БРИ ОБРАЗОВАНИИ ФЕРТЛЕНТ-ИНГИБИТОРНЫХ КОМПЛЕКСОВ.
2.1. Взаимодействие химотрипсина с нативными ингибиторами из фасоли и картофеля.
2.2. Взаимодействие химотрипсина с ингибитором из картофеля, модифицированным с помощью ограниченного протеолиза.
2.3. Связывание флуоресцентного зонда с комплексом химотрипсин-ингибитор из картофеля.
3. ПРИРОДА КОМПЛЕКСОВ ИНГИБИТОРА ИЗ КАРТОФЕЛЯ С ПРОТЕИНАЗАМИ.ИО
3.1. Физико-химическая характеристика.III
3.2. Стехиометрия взаимодействия.
3.3. О взаимосвязи структуры и функции.
4. ВЛИЯНИЕ МОДИФИКАЦИИ ФУНКЦИОНАЛЬНЫХ ГРУШ ИНГИБИТОРА
ИЗ КАРТОФЕЛЯ НА ЕП) КОНФОШАЦИЮ И ВЗАИМОДЕЙСТВИЕ С ПРОТЕИНАЗАМИ.
4.1. Восстановление дисульфидных связей
4.2. Модификация остатков основных аминокислот -аргинина и лизина.
4.3. Модификация остатков тирозина.