Исследование процессов модификации липопротеидов низкой плотности в плазме крови человека Каплун, Виктор Владимирович

Краткое описание

Каплун,ВикторВладимирович.Исследованиепроцессовмодификациилипопротеидовнизкойплотностивплазмекровичеловека: диссертация ... кандидата биологических наук : 03.00.04. - Москва, 2000. - 129 с. : ил.больше
Цитаты из текста:

стр. 1
на правах рукописиКаплунВикторВладимировичИССЛЕДОВАНИЕПРОЦЕССОВМОДИФИКАЦИИЛ И П О П Р О Т Е И Д О ВНИЗКОЙПЛОТНОСТИв П Л А З М ЕКРОВИЧЕЛОВЕКА

стр. 7
лектин бузины. Гал - галактоза. ГалКАц - N-ацетил галактозамин. Глю - глюкоза. ГлюМАд - N-ацетил глюкозамин. Л В П -липопротеидывысокойплотности. ЛНП -липопротеидынизкойплотности. Л О Н П -липопротеидыоченьнизкойплотности. Л П П -липопротеидыпромежуточнойплотности. М А Л - лектин Маакии амфСкой.

стр. 9
биологическихпроцессов, приводящих к появлению вплазмекровичеловекадесиалированных атерогенныхлипопротеидов. в связи с этим, целью данной работы явилосьисследованиепроцессовмодификациилипопротеидовнизкойплотностиплазмыкровичеловека. В соответствии с поставленной целью были сформулированы следующие

Оглавление диссертациикандидат биологических наук Каплун, Виктор Владимирович
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.
ВВЕДЕНИЕ.
ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.
ГЛАВА 1. Модифицированные липопротеиды низкой плотности плазмы крови человека.
ГЛАВА 2. Сиаловые кислоты.
2.1. Свойства и распространение сиаловых кислот.
2.2. Биологические функции сиаловых кислот.
ГЛАВА 3. Ферменты, участвующие в метаболизме сиаловой кислоты.
3.1. Сиалидазы.
3.2. Сиалилтрансферазы.
3.3. Транс-сиалидазы.
3.4. Десиалирующая активность в сыворотке крови.
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
ГЛАВА 4. Материалы и методы исследований.
4.1. Получение плазмы крови и липопротеидов.
4.2. Получение сиалированных и десиалированных липопротеидов плазмы крови.
4.3. [ Н]-мечение сиаловой кислоты гликоконьюгатов, ганглиозидов, липопротеидов, белков и эритроцитов.
4.4. Получение липопротеидов и белков, ковалентно связанных с агарозой.
4.5. Получение десиалированного фетуина и трансферина методом кислотного гидролиза.
4.6. Выделение транс-сиалидазы из липопротеиддефицитной плазмы крови методом афинной хроматографии.
4.7. Клеточная культура.
4.8. Определение десиалирования ЛНП клетками.
4.9. Модификация ЛНП в плазме крови.
4.10. Анализ состава липопротеидов низкой плотности.
4.10.1. Определение сиаловой кислоты.
4.10.2. Определение нейтральных Сахаров.
4.10.3. Определение количества десиалированных липопротеидов.
4.10.4. Экстракция липидов.
4.10.5. Определение нейтральных липидов.
4.10.6. Определение фосфолипидов.
4.10.7. Определение холестерина.
4.10.8. Определение тиобарбитуровая кислота - реактивных продуктов в ЛНП.
4.10.9. Определение содержания гидроперекисей в ЛНП.
4.10.10. Определение уровня конъюгированных диенов в ЛНП.
4.11. Электрофоретические методы.
4.11.1. Определение продуктов протеолитической деградации.
4.11.2. Определение среднего диаметра ЛНП.
4.11.3. Определение суммарного поверхностного заряда ЛНП.
4.11.4. Определение молекулярного веса и гомогенности препарата фермента.
4.12. Определение активности транс-сиалидазы с использованием в качестве субстрата [3Н]-меченного фетуина, трансферина, липопротеидов ковалентно связанных с агарозой.
4.13. Определение активности транс-сиалидазы с использованием в качестве субстрата ганглиозидов.
4.14. Определение активности транс-сиалидазы с использованием в качестве субстрата биотинилированных гликоконьюгатов.
4.15. Определение активности транс-сиалидазы при использовании в качестве донора сиаловой кислоты эритроцитов.
4.16. Определение активности транс-сиалидазы при использовании эритроцитов в качестве акцептора сиаловой кислоты.
4.17. Определение типа образуемой гликозидной связи.
4.18. Определение концентрации белка.
4.19. Статистическая обработка данных.
РЕЗУЛЬТАТЫ
ГЛАВА 5. Модификация ЛНП клетками.
ГЛАВА 6. Модификация ЛНП в плазме крови.
6.1. Десиалирование ЛНП.
6.2. Изменение липидного состава ЛНП.
6.3. Изменение физических свойств ЛНП.
6.3.1. Диаметр липопротеидных частиц.
6.3.2. Поверхностный заряд.
6.4. Атерогенные свойства ЛНП.
6.5. Природа десиалирующей активности в плазме.
ГЛАВА 7. Транс-сиалидаза плазмы крови человека.
7.1. Характеристики изолированного препарата фермента.
7.2. Влияние значения рН на транс-сиалидазную активность.
7.3. Влияние ионов металлов на транс-сиалидазную активность.
7.4. Субстратная специфичность транс-сиалидазы плазмы крови.
7.4.1. Фетуин, трансферин, ЛНП.
7.4.2. Липопротеиды плазмы крови.
7.4.3. Сфинголипиды.
7.4.4. Клетки крови (эритроциты).
7.4.5. Синтетические гликоконьюгаты.
7.5. Акцепторная специфичность транссиалидазы плазмы крови.87 7.5.1. Гликопротеиды плазмы крови (фетуин).
7.5.2. Липопротеиды плазмы крови.
7.5.3. Акцепторные свойства клеток крови (эритроциты).
7.5.4. Сфинголипиды.
7.5.5. Синтетическиее гликоконьюгаты.
7.6. Влияние транс-сиалидазы на атерогенность ЛНП.
ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.
ВЫВОДЫ.