Изучение структуры и функции митохондриальной АТФазы с помощью методов ЭПР Имедидзе, Эльдар Адамович

Краткое описание

Имедидзе,ЭльдарАдамович.ИзучениеструктурыифункциимитохондриальнойАТФазыспомощьюметодовЭПР: диссертация ... кандидата биологических наук : 03.00.04. - Москва, 1984. - 138 с. : ил.больше
Цитаты из текста:

стр. 1
Биологический факультет На правах рукописи УДК.577.352.332. ШЛЕДИДЗЕЭЛЬДАРАДАМОВИЧИЗУЧЕНИЕСТРУКТУРЫИФУНКЦИИМИТОХОНДРИАЛЬНОИАТФазыСПОМОЩЬЮМЕТОДОВЭПР/03.00.04. - Биологическая химия/ Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук ^«^ ' .JJ^^ 3 п 1/1г^У Научный руководитель доктор

стр. 2
Мембранные компоненты АТФазного комплекса митохондрий и ихфункции2. Локализация фактора FJ вмитохондриальноймембране Глава Ш.Методыизмерения мембранного потенциала § I.Методыизмерения электрического потенциала 1. Прямыеметодыизмерения электрического потенциала 2.Методыопределения ДЧ^ , основанные

стр. 17
экспериментах происходит в центре, кото­ рый осуществляет синтез АТФ. § 3. функциональные группы нуклеотидсвязывающих центровмитохондриальнойАТШазы Исследованиеструктурынуклеотидсвязывающих центров фактора Fj является вшшым этапом визучениимеханизма функционирования иструктурыАТФазного комплекса. Спомощьюингибиторов АТФазной реак­ ции фактора Fj были определены некоторые аминокислотные остатки, принимающие участие в формировании активного

Оглавление диссертациикандидат биологических наук Имедидзе, Эльдар Адамович
Введение.
Глава I. Структура растворимой АТФазы и функции ее субъединиц
1. Субъединичный состав растворимой АТФазы -.
2. Нуклеотидсвязывающие центры АТФазы и их функции
3. Функциональные группы нуклеотидсвязывающих центров митохондриальной АТФазы
4. Конформационные изменения АТФазы
Глава П. Структура и функции АТФазного комплекса митохондрий.
1. Мембранные компоненты АТФазного комплекса митохондрий и их функции.
2. Локализация фактора Fj в митохондриальной мембране.
Глава Ш. Методы измерения мембранного потенциала
§ I. Методы измерения электрического потенциала
1. Прямые методы измерения электрического потенциала.
2. Методы определения A4f , основанные на измерении равновесного распределения пробных зарядов
3. Метод липидорастворимых проникающих ионов
4. Измерение трансмембранного электрического потенциала с помощью флуоресцентных зондов
§ 2. Методы измерения градиента рН на сопрягающих мембранах
I. Титрометрический метод
2. Распределение проникающих кислот
3. Измерение ДрН с помощью флуоресцентных и спиновых зондов
Глава 1У. Материалы и методы.
Препаративные методы.
1. Выделение митохондрий из сердца быка
2. Выделение субмитохондриальных частиц /СМЧ/
3. Выделение марганцевых субмитохондриальных частиц.
4. Выделение субмитохондриальных частиц, лишенных фактора Fj.
5. Выделение водорастворимой АТФазы /фактор Fj/
6. Реконструкция фактора Fj с мембраной СМЧ.
7. Модификация фактора Fj с профлавином
8. Модификация фактора Fj спиновыми метками
Аналитические методы
1. Определение концентрации белка
2. Определение АТФазной активности фактора Fj и субмитохондриальных частиц
3. Электрофорез в полиакриламидном геле в присутствии денатурирующих реагентов
4. Измерение спектров флуоресценции профлавина
5. Измерение электрического потенциала Д4* с помощью проникающих анионов
6. Измерение спектров Электронного Парамагнитного Резонанса'/ЭПР/
Глава У. Модификация митохондриального фактора спиновыми метками и разделение модифицированного фермента на субъединицы
Глава У1. Локализация фактора Fj в митохондриальной мембране.
Глава УП. Измерение градиента рН на мембране субмитохондриальных частиц
Выводы .III