Механизмы фототрансдукции в зрительной клетке Каламкаров, Григорий Рафаэлевич

Краткое описание

Каламкаров,ГригорийРафаэлевич.Механизмыфототрансдукциивзрительнойклетке: диссертация ... доктора биологических наук : 03.00.02. - Москва, 1999. - 309 с. : ил.больше
Цитаты из текста:

стр. 1
АКАДЕМИЯ НАУК РФ ИНСТИТУТ БИОХИМИЧЕСКОЙ ФИЗИКИ •авах рукописиГригорийРафаэлевичМЕХАНИЗМЫФОТОТРАНСДУКЦИИВЗРИТЕЛЬНОЙКЛЕТКЕ03.00.02-Биофизика Диссертация

стр. 12
регуляции рН в палочках. световой Выявить возможную роль этихмеханизмовв регуляции чувствительностиклетки. 5. Исследовать свойства цГМФ-чувствительных каналов взрительнойклетке. Выявить возможную функциональную роль 8Нгрупп в работе этих каналов. 6. Исследовать возможную роль цитоскелета палочек и

стр. 179
по одной канала. 8Н-группе, состояние которых оиредежет проводимость 180 ГЛАВА 6. РЕГУЛЯЦИЯ рН ВЗРИТЕЛЬНОЙКЛЕТКЕИ ЕЕ РОЛЬ ВМЕХАНИЗМАХФОТОТРАНСДУКЦИИ. 6.1. Процессы, вызывающие закисление взрительнойклетке. В фоторецепторах постоянно происходят процессы, могли бы вызывать быстроеклеткивнутриклеточное

Оглавление диссертациидоктор биологических наук Каламкаров, Григорий Рафаэлевич
ВВЕДЕНИЕ.
Актуальность проблемы.
Цель и задачи работы.
Научная новизна работы.
Научно-практическая значимость работы.
Положения, выносимые на защиту.
ГЛАВА I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.
Введение.
1.1. Структура фоторецепторов и свойства зрительного пигмента родопсина.
1.2. Преобразование света в зрительной клетке и генерация фотоответа.
1.3. цГМФ-регулируемые ионные каналы.
1.4. Роль кальция в механизме фототрансдукции.
1.5. Изменения концентрации внутриклеточного кальция.
1.6. На+/Са++/К+-обменник.
1.7. Влияние кальция на механизм фототрансдукции.
1.8. Роль кальция в восстановлении фотоответа.
1.9. Гуанилатциклаза.
1.10. Цитоскелетная организация фоторецепторной клетки.
ГЛАВА 2. ГЕНЕРАЦИЯ ФОТОПОТЕНЦИАЛА НА
ФОТОРЕЦЕПТОРНОМ ДИСКЕ.
2.1. Генерация фотопотенциала родопсином и бактериородопсином.
2.2. Фотоиндуцированный электрический ответ метародопсина.
2.3. Отсутствие трансмембранного переноса протона в фоторецепторном диске при освещении.
2.4. Поглощение протона фоторецепторными дисками при освещении и восстановление эффекта после регенерации обесцвеченного родопсина в присутствии
11-цис ретиналя.
2.5. Разделение инвертированных и нормально ориентированных дисков на конканавалин А-сефарозе.
2.6. Фотоиндуцированные изменения рН в отдельных фракциях фоторецепторных дисков после хроматографии на конканавалин А-сефарозе.
2.7. Высвобождение протона фоторецепторными дисками при фотоиндуцированном переходе метародопсина П в метародопсин Ш.
2.8. Связь поглощения протона с образованием изохромной формы метародопсина П.
2.9. Фотоиндуцированное ускорение спада фотопотенциала; увеличение проводимости мембраны.
2.10. Природа фотоиндуцированных изменений проводимости.
2.11. Существенны ли протонирование родопсина и генерация фотопотенциала для его взаимодействия с трансдуцином?.
2.12. Обсуждение результатов.
ГЛАВА 3. СРАВНЕНИЕ ПРОВОДИМОСТИ
ФОТОРЕПЦЕТОРНОЙ МЕМБРАНЫ ДИСКА И ПЛАЗМАТИЧЕСКОЙ МЕМБРАНЫ ФОТОРЕЦЕПТОРА.
3.1. Сравнение фотоответов от фоторецепторной и плазматической мембран, сорбированных на плоской липидной мембране.
3.2. Обсуждение результатов.
ГЛАВА 4. ВЗАИМОДЕЙСТВИЕ РОДОПСИНА С
ЦИТОПЛАЗМАТИЧЕСКИМИ БЕЛКАМИ В ФОТОРЕЦЕПТОРНОЙ КЛЕТКЕ (ТРАНСДУЦИНОМ И АРЕСТИНОМ).
4.1. Модификация родопсина спиновыми метками. Малеимидные спиновые метки. Определение мест связывания меток при помощи протеолиза родопсина папаином.
4.2. Ртутьорганическая спиновая метка (HgSL).
Локализация места связывания метки.
4.3. Модификация фосфорилированного родопсина спиновыми метками.
4.4. Фотоиндуцированные изменения в спектрах ЭПР спинмеченного родопсина. Темноадаптированный родопсин.
4.5. Влияние протеолиза на спектры ЭПР спинмеченного родопсина.
4.6. Влияние фосфорилирования родопсина на спектры ЭПР меток. t <<><<<< t <<<<<<.<< ><<<<< t << t <<<<> t <<<<><<<<<< 128 4Л, Модификация сульфгидрильных групп арестина DTNB и HgSL.!.
4.8. Влияние модификации сульфгидрильных групп на взаимодействие арестина с родопсином.
4.9. Определение Кд комплексов арестина и трансдуцина с фосфорилированными и нефосфорилированными формами родопсина.
4.10. Изучение электростатических взаимодействий при связывании арестина с родопсином.
4.11. Изучение методом спиновых меток характера взаимодействия арестина с фосфорилированным и нефосфорилированным опсином.
4.12. Влияние протеолиза фосфорилированного родопсина на связывание с ним арестина.
4.13. Влияние трасндуцина на спектры ЭПР меток, связанных с родопсином.
4.14. Роль фосфорилирования родопсина в ингибирующем действии арестина на фосфодиэстеразу цГМФ.
4.15. Обсуждение результатов.
4.15.1. Фотоиндуцированные изменения в родопсине.
4.15.2. Характер взаимодействия родопсина с арестином.
4.15.3. Взаимодействие с трасдуцином и арестином.
ГЛАВА 5. ВЛИЯНИЕ РЕАГЕНТОВ,
МОДИФИЦИРУЮЩИХ SH-ГРУППЫ, НА ФОТОТОК В ЗРИТЕЛЬНОЙ КЛЕТКЕ
5.1. Влияние реагентов, модифицирующих SH-гругаш, на ток изолированной палочки саламандры, „.,.,„.,.,.„
5.2. Влияние SH-реагентов на активность фосфодиэстеразы в суспензии НСП.
5.3. Проницаемость плазматической мембраны НСП для НЭМиИАА.
5.4. Влияние модификации SH-rpyim ионных каналов плазматической мембраны фоторецепторной клетки на ее проводимость.
5.4. Обсуждение результатов.
ГЛАВА 6. РЕГУЛЯЦИЯ рН В ЗРИТЕЛЬНОЙ КЛЕШЕ И ЕЕ
ЮЛЬ В МЕХАНИЗМАХ ФОТОТРАНС ДУКЦИЙ.
6.1. Процессы, вызывающие закисление в зрительной клетке.
6.2. Регистрация внутриклеточного рН в слое фоторецепторов.
6.2.1. Na+/H+ и НСОзТСГ обмен в зрительных клетках.
6.2.2. Транспорт бшсарбоната в фоторецепторах.
6.2.3 . В фоторецепторной клетке существует
Ма+-зависимый НСОз'/СГ обменник.
6.3. Измене1шя фоточувствительного тока в палочке при изменении внутриклеточного рН.
6.3.1. Эффект амилорида.
6.3.2. Сохранение темнового тока после потери фоточувствителыюстн.
6.3.3. Эффект ДИДС.,. V,.,,,.,,,
6.3.4. Переходные процессы при изменении рН.
6.3.5. Влияние амилорида на наружный сегмент фоторецептора.
6.3.6. Транспорт бикарбоната в наружном сегменте.
6.4. Фототрансдукция в палочках сетчатки лягушки модулируется бикарбонатом. Влияние ацетазоламида и ДИДС.
6.4.1. Бикарбонат и ААА увеличивают фотоответы.
6.4.2. Увеличение ответов не обусловлено глиальными токами.
6.4.3. Кинетика фотоответов ускоряется в присутствии AAA.
6.4.4. Зависимость действия AAA от бикарбонатного режима.
6.4.5. Бикарбонат и AAA увеличивают концентрацию цГМФ в наружных сегментах палочек.
6.4.6. Бикарбонат и AAA прямо не влияют на фототрансдукцию.
6.4.7. ДИЦС полностью подавляет световую чувствительность.
6.4.8. Эффект ДИДС зависит от рН.
6.5. Обсуждение результатов.
6.5.1. Стационарное значение внутриклеточного рН.
6.5.2. Роль регуляции рН в работе фоторецептора.
6.5.3. Внутриклеточное закисление во внутреннем сегменте.
6.5.4. Механизмы транспорта.
6.5.5. Регуляция рН в наружном сегменте.
6.5.6. Обмен бикарбоната.
6.5.7. Na+/H* обмен.
6.5.8. Механизм воздействия рН на фотоответ.
6.5.9. Функциональная роль НС037СГ и Ка+/Н+-обменников в наружном сегменте.
6.5.10. Транспорт С02 в Мюллеровских клетках и влияние AAA.
6.5.11 .Корреляция между амплитудой ответа и концентрацией цГМФ.
ГЛАВА 7. ИССЛЕДОВАНИЕ РОЖ ЦИТОСКЕЛЕТА В
ФУНКЦИОНИРОВАНИИ ФОТОРЕЦЕПТОРНЫХ КЛЕТОК СЕТЧАТКИ.
7.1. Влияние колхицина на регистрируемый внутриклеточно фотоответ палочек сетчатки лягушки.
7.2. Влияние ванадата на фотоответ палочки.
7.3. Влияние колхицина на суммарный ПРП сетчатки.
7.4. Обсуждение результатов.
ГЛАВА 8. ИССЛЕДОВАНИЕ цАМФ-РЕГУЛИРУЕМОЙ
ПРОВОДИМОСТИ В МЕМБРАНЕ ВОЛОСКОВЫХ КЛЕТОК ВНУТРЕННЕГО УХА.
8.1. цАМФ-активируемая проводимость волосковых клеток.
8.2. Обсуждение результатов.
ГЛАВА 9. ИСПОЛЬЗОВАНИЕ S-АНТИГЕНА
АРЕСТИНА) ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ
ГЛАЗНЫХ ПАТОЛОГИЙ.
9.1. Выявление S-антител в крови и слезной. жидкости больных различными формами увеита
9.2. Применение метода выявления S-антител при диагностике и прогнозе развития диабетической ретинопатии.
9.3. Иммуноферментнымй метод и набор реагентов для определения антител к S-антигену сетчатки глаза в сыворотке крови человека.
ВЫВОДЫ.