Разработка новых подходов к изучению "слабого" связывания миозина с актином Росткова, Елена Вячеславовна

Краткое описание

Росткова,ЕленаВячеславовна.Разработкановыхподходовкизучению"слабого"связываниямиозинасактином: диссертация ... кандидата биологических наук : 03.00.04. - Москва, 1999. - 118 с. : ил.больше
Цитаты из текста:

стр. 1
РОССИЙСКАЯ А К А Д Е М И Я НАУК ИНСТИТУТ БИОХИМИИ и м . А. Н. Б А Х А На правах рукописи УДК 577.152.2 Р О С Т К О В АЕленаВячеславовнаРАЗРАБОТКАНОВЫХПОДХОДОВКИЗУЧЕНИЮСЛАБОГО"СВЯЗЫВАНИЯМИОЗИНАСАКТИНОМ03.00.04 - биологическая химия диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических

стр. 4
-АВР-ВеРх в отсутствие и присутствии 62 Р-актина3.1.2. Доказательство "слабого"связываниякомплексов 81 -АВР-ВеРх и 81 -АВР-А1Р4- с Р-актином3.1.3. Сравнительный кинетический анализ "слабого"связыванияс Р-актиномтройных комплексов 81 -АВР-ВеРх и 81 -АВР-А1Р43.2. Структурные исследования тропомиозина

стр. 51
исследование особенностей "слабого"связываниямиозинасактиноми структурных перестроек, происходящих в миозиновой головке при такомсвязывании. Дляизучения"слабого"связываниямиозинасактиномсуществует несколько возможныхподходов. Один из них состоит в том, чтобы успеть зарегистрировать "слабое"связывание

Оглавление диссертациикандидат биологических наук Росткова, Елена Вячеславовна
Оглавление
Список использованных
Введение
Обзор литературы
1.1. Структура и основные свойства актина
1.1.1. Биологическая характеристика актина
1.1.2. Функциональные свойства актина. Полимеризация
1.1.3. Структура молекулы актина 1.1.3.1. Участки связывания лигандов
Катион-связывающий участок' Участок связывания нуклеотидов Участки взаимодействия между мономерами актина Участки взаимодействия с актин-связывающими белками Участки связывания токсинов
1.2. Структура и основные свойства тропомиозина 1.3 Структура и основные свойства миозина
1.3.1. Строение молекулы миозина
1.3.2. АТРазная активность миозина
1.3.3. Стабильные аналоги интермедиатов 81**-АВР-Р^ и 81*-АТР
1.4. Взаимодействие миозина с актином
1.4.1. Молекулярный механизм подвижности
1.4.2. "Слабое" и "сильное" связывание миозина с актином
1.4.3. Регуляция сокращения
1.5. Применение метода дифференциальной сканирующей калориметрии для структурных исследований мышечных белков:
Миозин Актин
Тропомиозин Экспериментальная часть
2. Материалы и методы
2.1. Получение препаратов белков
2.1.1. Выделение миозина из скелетных мышц кролика
2.1.2. Получение субфрагмента 1 (S1) миозина из скелетных мышц кролика
2.1.3. Выделение актина из скелетных мышц кролика
Получение ацетонового порошка Выделение актина из ацетонового порошка
2.1.4. Приготовление препарата гладкомышечного тропомиозина
2.1.5. Разделение гладкомышечного тропомиозина на изоформы
2.2. Используемые биохимические методы
2.2.1. Формирование стабильных тройных комплексов Sic ADP и аналогами
2.2.2. Определение АТРазной активности миозина
2.2.3. Пиреновая модификация актина
2.2.4. Измерение концентрации белка микробиуретовым методом
2.3. Использованные методы исследования
2.3.1. Кинетические методы исследования
2.3.2. Исследования тепловой денатурации белков методом дифференциальной сканирующей калориметрии (ДСК)
2.3.3. Исследование температурных зависимостей диссоциации комплекса F-актина с тропомиозином по изменению интенсивности светорассеяния
3. Результаты и их обсуждение
3.1. Кинетические исследования "слабого" связывания головок миозина с F-акгином
3.1.1. Исследования скорости образования тройных комплексов 81- АБР-АШ4" и 81-А1)Р-ВеРх в отсутствие и присутствии Б-актина
3.1.2. Доказательство "слабого" связывания комплексов 81-АБР-ВеРх и 81-АБР-А1Р4" с Р-актином
3.1.3. Сравнительный кинетический анализ "слабого" связывания с Р-актином тройных комплексов
81 -АБР-ВеРх и 81 -АВР-А^" 3.2. Структурные исследования тропомиозина из гладких мышц утки и его комплексов с Р-актином
3.2.1. Тепловая денатурация комплекса ТМ - Р-актин
3.2.2. Тепловая денатурация связанного с актином ТМ при различных молярных отношениях ТМ:актин
3.2.3. Влияние разведения комплекса ТМ - Р-актин на тепловую денатурацию связанного с актином ТМ
3.2.4. Исследование тепловой денатурации гомодимеров ТМ в комплексе с Р-актином
3.2.5. Исследование процесса тепловой денатурации комплекса Р-актин - ТМ в присутствии кальдесмона
3.2.6. Изучение методом ДСК комплекса Р-актин - ТМ в присутствии