Роль нуклеотидов в регуляции процессов сверхсинтеза органических кислот у дрожжей Yarrowia lipolytica Солодовникова, Наталия Юрьевна

Краткое описание

Солодовникова,НаталияЮрьевна.РольнуклеотидовврегуляциипроцессовсверхсинтезаорганическихкислотудрожжейYarrowialipolytica: диссертация ... кандидата биологических наук : 03.00.04. - Пущино, 1998. - 105 с. : ил.больше
Цитаты из текста:

стр. 1
РОССИЙСКАЯ АКАДЕМИЯ НАУК ИНСТИТУТ БИОХИМИИ И ФИЗИОЛОГИИ МРЖРООРГАНИЗМОВ ИМ. т . к . СКРЯБИНА На правах рукописи УДК 577.171 СОЛОДОВНЖОВАНАТАЛИЯЮРЬЕВНАРОЛЬНУКЛЕОТИДОВВРЕГУЛЯЦИИПРОЦЕССОВСВЕРХСИНТЕЗАОРГАНИЧЕСКИХКИСЛОТУДРОЖЖЕЙYarrowialipolytica03.00.04. - Биохимия Диссертация на соискание

стр. 8
и пиридиновыхсверхсинтезасверхсинтезадрожжейорганическихлимонньсскислот. и вдрожжах7.Иро1уиса Установлено принципиальное отличиекислотсверхсинтезакетокислот в обеспеченности клеток восстановительными и 8 энергетическими эквивалентами. Показано, чтопроцесссверхсинтезалимонныхкислотсопровождается

стр. 74
ингибирования детального нашим фермента промежуточными метаболитами вьывило пулы исследованиярегуляцииНАД-ИЦЦГ претерпевают существенныенуклеотидами, в данным измененияпроцессекультивированиядрожжейY.lipolyticaв условияхсверхсинтезаорганическихкислот. 7.4. Кинетическое поведение ирегуляцияНАД^-изоцитратдегидрогеназы При исследовании кинетических параметров фермента учитывался известный факт аллостерической природы...

Оглавление диссертациикандидат биологических наук Солодовникова, Наталия Юрьевна
СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ
ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
ГЛАВА 1. ФИЗИОЛОГО-БИОХИМИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ДРОЖЖЕЙ Уаггоую Про1уПса, ПРОДУЦЕНТОВ ОРГАНИЧЕСКИХ
9
КИСЛОТ
1.1. Сверхсинтез лимонных кислот дрожжами при выращивании
9
на глюкозе
1.1.1. Физиологические особенности синтеза
9
лимонных кислот
1.1.2. Биохимические особенности процесса сверхсинтеза лимонных
10
кислот
1.1.2.1. Ферментные системы, участвующие в метаболизме глюкозы
дрожжами
1.1.2.2. Изменение биоэнергетического состояния клеток дрожжей
14
в условиях лимитирования роста культуры источником азота
1.2. Сверхсинтез кетокислот дрожжами Уатжга Ыро1уИса
при выращивании на глюкозе
ГЛАВА 2. НАД^-ЗАВИСИМАЯ ИЗОЦИТРАТДЕГИДРОГЕНАЗА
И ЕЕ РЕГУЛЯЦИЯ У ДРОЖЖЕЙ
2.1. Характеристика НАД^-гооцигратдегидрогеназы
2.2. Влияние метаболитов на НАД^-изоцитратдегидрогеназу
2.3. НАД^-изоцитратдегидрогеназа и энергетический обмен
ГЛАВА 3. МЕТАБОЛИЗМ ИСТОЧНИКА АЗОТА У ДРОЖЖЕЙ
3.1. Ассимиляция аммония дрожжами
3.2. Активность ферментов начальных этапов азотного метаболизма
ло
у дрожжей
3.3. Субклеточная локализация ферментов азотного метаболизма
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
ГЛАВА 4. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
4Л. Объект исследования
4.2. Культивирование дрожжей
4.3. Методика контроля роста биомассы
4.4. Определение органических кислот в культуральной жидкости
4.5. Определение концентрации ионов аммония в
33
культуральной жидкости
4.6. Определение концентрации глюкозы в
34
культуральной жидкости
4.7. Измерение интенсивности дыхания и ингибиторный анализ
4.8. Экстракция нуклеотидов
4.9. Определение адениловых нуклеотидов
4.10. Определение пиридиннуклеотидов
4.11. Получение бесклеточных гомогенатов
4.12. Субклеточное фракционирование
4.13. Определение активности ферментов
4.13.1. НАД^-зависимая изоцитратдегидрогеназа
4.13.2. Глюкозо-6-фосфатдегидрогеназа
4.13.3. Фумарат-гидратаза
4.13.4. НАД'-зависимая глутаматдегидрогеназа
4.13.5. НАДФ+-зависимая глутаматдегидрогеназа
4.13.6. Аланинаминотрансфераза
4.13.7. Аспартатаминотрансфераза
4.13.8. Глутаминсинтетаза
4.14. Очистка НАД^-зависимой изоцитратдегидрогеназы
4.15. Определение молекулярного веса и субъединичного
состава НАД^-зависимой изоцигратдегидрогеназы
4.16. Определение концентрации белка
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
ГЛАВА 5. ДИНАМИКА АДЕНИЛОВЫХ И ПИРИДИНОВЫХ НУКЛЕОТИДОВ В КЛЕТКАХ ДРОЖЖЕЙ Уаггомш 1лро1уПса В УСЛОВИЯХ СВЕРХСИНТЕЗА
ОРГАНИЧЕСКИХ КИСЛОТ
5Л. Рост дрожжей У. Иро1уйса 704 на глюкозе
в условиях лимитирования источником азота
5.2. Интенсивность дыхания и чувствительность
к цианиду при лимитировании роста дрожжей источником азота
5.3. Экстракция нуклеотидов
5.4. Внутриклеточное содержание адениловых нуклеотидов

при лимитировании роста дрожжей источником азота
5.5. Внутриклеточное содержание НАД* и НАДН 53 при лимитировании роста дрожжей источником азота
5.6. Рост дрожжей Y. lipolytica 704 на глюкозе при
лимитировании тиамином
5.7. Интенсивность дыхания и чувствительность
57
к цианиду в условиях лимитирования роста дрожжей тиамином
5.8. Внутриклеточное содержание адениловых и пиридиновых
57
нуклеотидов в клетках дрожжей, лимитированных тиамином
ГЛАВА 6. МЕТАБОЛИЗМ ИСТОЧНИКА АЗОТА
У ДРОЖЖЕЙ Yarrowia lipolytica
6.1. Динамика активностей ферментов начальных этапов
метаболизма азота
6.2. Локализация ферментов азотного обмена
ГЛАВА 7. ИССЛЕДОВАНИЕ РЕГУЛЯЦИИ НАД+-ЗАВИСИМОЙ
ИЗОЦИТРАТДЕГИДРОГЕНАЗЫ ДРОЖЖЕЙ Yarrowia lipolytica
7.1. Очистка НАД^-изоцитратдегидрогеназы
7.2. Характеристика НАД^-изоцитратдегидрогеназы
7.3. Влияние метаболитов на активность НА Д+-из о цитр атд ег идр о геназ ы
7.4. Кинетическое поведение и регуляция НАД^-изоцигратдегидрогеназы
7.5. Зависимость скорости реакции от концентрации НАД^
7.4.2. Зависимость скорости реакции от концентрации изоциграта
и влияние АМФ
7.4.3. Влияние АТФ на кинетические параметры фермента
7.4.4. Ингибирование БАД^-изоцитратдегидрогеназы НАДН
ГЛАВА 8. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
8.1. Сравнение обеспеченности клеток дрожжей Y.lipolytica энергетическими и восстановительными эквивалентами
в условиях сверхсинтеза лимонных и кетокислот
8.2. Метаболизм источника азота у дрожжей -
продуцентов органических кислот
8.3. Регуляция НАД+-зависимой изоцитратдегидрогеназы дрожжей
Yarrowia lipolytica
8.4. Биохимический механизм сверхсинтеза органических кислот
дрожжами Y. lipolytica на глюкозе
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ