Биологические основы получения и практического применения субклеточных фракций бактерий на модели бруцелл Григорьева, Галина Ивановна

Краткое описание

Биологические основы получения и практического применения субклеточных фракций бактерий на модели бруцелл Григорьева, Галина Ивановна

ОГЛАВЛЕНИЕ ДИССЕРТАЦИИ

доктор биологических наук Григорьева, Галина Ивановна

ф Введение.

1. Обзор литературы.

1.1. Бруцеллез как зоонозное заболевание и его распространение.

1.2. Биологические свойства и современная таксономия рода Brucella

1.3. Строение клетки бруцелл и ее антигенная структура.

1.4. Сравнительное изучение белковык систем и состава жирных кислот в аспекте идентификации и дифференциации бактерий.

1.4.1. Белковые системы бактерий.

1.4.1.1. Значимость различных белковых систем в сравнительном изучении бактерий.

1.4.1.2.Белковые системы в сравнительной характеристике бруцелл. 52 1.4.2. Изучение спектров жирных кислот в целях идентификации и дифференциации бактерий.

1.4.2.1. Применение газо-жидкостной хроматографии для

Ф идентификации различных групп бактерий.

1.4.2.2. Газо-хроматографический анализ жирных кислот применительно к бруцеллам.

1.5. Некоторые аспекты иммуногенеза при бруцеллезе и проблемы диагностики.

1.5.1. Основные элементы иммунитета.

1.5.2. Стадии инфекционного бруцеллезного процесса и его иммунологические проявления.

1.5.3. Диагностика бруцеллеза.

1.5.3.1. Клиническая и эпизоотологическая диагностика.

1.5.3.2. Серологическая диагностика.

1.5.3.3. Применение иммуноферментного анализа (ИФА) в диагностике бруцеллеза.

1.5.3.4. Аллергическая диагностика. Значение методов in vitro.

1.6. Особенности патогенеза при бруцеллезе. Факторы патогенности бруцелл.

1.7. Разработка средств вакцинопрофилактики бруцеллеза.

1.7.1. Живые вакцины.

1.7.2. Инактивированные корпускулярные вакцины.

1.7.3. Молекулярные вакцины.

1.7.4. Искусственные вакцины.

1.8. Основные биотехнологические подходы к получению субклеточных фракций бруцелл различной функциональной направленности.

1.9. Основные направления национальных и региональных программ по контролю за бруцеллезом.

2. Собственные исследования.

2.1. Материалы и методы исследований.

2.1.1. Эпизоотологические исследования.

2.1.2. Характеристика изучаемых культур бактерий и условия их выращивания.

2.1.3. Методы фракционирования бактерий.

2.1.4. Аналитические методы.

2.1.5. Методы диагностических исследований.

2.1.6. Методы изучения иммуногенной активности препаратов.

2.1.7. Расчеты экономической эффективности от внедрения противобруцеллезных мероприятий.

2.1.8. Методы статистической обработки.

2.2. Результаты собственных исследований.

2.2.1. Субклеточные структуры бактерий в приложении к решению вопросов таксономии, идентификации и дифференциации

2.2.1.1. Сравнительный анализ белковых спектров бактерий.

2.2.1.1.1. Изучение растворимых белков микобактерий.

2.2.1.1.2. Белковые системы стафилококков.

2.2.1.1.2.1. Сопоставление спектров мембранных белков стафилококков.

2.2.1.1.2.2. Сопоставление спектров внеклеточных белков в дифференциации культур стафилококков.

2.2:1.1.2.3. Характеристика белковых систем сальмонелл.

2.2.1.1.4. Белковые системы бруцелл в сравнительном аспекте

2.2.1.1.4.1. Анализ экзобелков бруцелл.

2.2.1.1.4.2. Белки наружной мембраны бруцелл.

2.2.1.1.4.3. Анализ суммарных белков клетки (СБК).

2.2.1.1.5. Перспективные подходы к сравнительному изучениюбелковых спектров бактерий на основе многомерного статистического анализа.

2.2.1.2. Сравнительный анализ жирных кислот бруцелл с применением метода газохроматографического анализа.

2.2.2. Разработка и оптимизация технологической схемы получения из клетки бруцелл субклеточных фракций различной функциональной направленности.

2.2.2.1. Оптимизация технологии получения протективного антигена бруцелл и его применение в составе бруцеллезной искусственной вакцины.

2.2.2.1.1. Изучение структурных и функциональных особенностей экстрацеллюлярного антигена бруцелл.

2.2.2.1.2. Получение протективного антигена бруцелл и его характеристика.

2.2.2.1.3. Получение бруцеллезной искусственной вакцины (БИВ) на основе протективного антигена.

2.2.2.1.4. Изучение иммуногенных свойств БИВ в условиях эксперимента.

2.2.2.2. Фракционирование клетки бруцелл с целью получения антигенных препаратов.

2.2.2.2.1. Выделение серологически активных фракций и их использование.

2.2.2.2.1.1. Получение и испытание эритроцитарных антигенных бруцеллезных диагностикумов на основе Б-и Я-антигенов бруцелл.

2.2.2.2.1.2. Разработка и применение метода экспресс-РПГА

Э-РПГА).

2.2.2.2.1.3. Применение выделенных антигенных фракций в иммуноферментном анализе (ИФА).

2.2.2.2.2. Получение белковой фракции клеток бруцелл со свойствами аллергена.

2.2.2.2.2.1. Получение белковых фракций и их характеристика 296 2.2:2.2.2.2. Испытание полученных белковых препаратов в качестве аллергенов.

2.2.2.2.2.3. Применение аллергенных препаратов в непрямой реакции лизиса лейкоцитов как аллерготеста при бруцеллеза.

2.2.2.2.3. Обобщение способа поэтапного фракционирования клетки бруцелл.

2.2.3. Разработка и применение научно-обоснованных систем противобруцеллезных мероприятий в хозяйствах Нечерноземной зоны России.

2.2.3.1. Комплексный подход к диагностике бруцеллеза в неблагополучной зоне как метод эпизоотологического надзора.

2.2.3.1.1. Изучение эпизоотологии бруцеллеза крупного

• рогатого скота ¿Нечерноземной зоне РФ.

2.2.3.1.2. Эпизоотический бруцелезный процесс в Рязанской области.

2.2.3.1.3. Изучение гостальности возбудителя бруцеллеза крупного рогатого скота.

2.2.3.1.4. Комплексный подход к серологической диагностике бруцеллеза крупного рогатого скота.

2.2.3.1.4.1. Сравнительная оценка некоторых серологических реакций при диагностике бруцеллеза.

2.2.3.1.4.2. Изучение эффективности РБП с молоком при диагностике бруцеллеза крупного рогатого скота.

2.2:3.1.4.3. Изучение влияния гетерогенных вакцин на показатели серологической диагностики бруцеллеза у коров, иммунизированных против бруцеллеза.

2.2.3.2. Вопросы дифференциальной диагностики бруцеллеза в благополучной зоне.

2.2.3.3. Эпизоотологический надзор в конкретных схемах противобруцеллезных мероприятий для зон с различной степенью благополучия по бруцеллезу.

2.2.3.3.1. Разработка и внедрение системы противобруцеллезных мероприятий в хозяйствах Рязанской области

2.2.3.3.2. Разработка и внедрение системы противобруцеллезных мероприятий в хозяйствах Нечерноземной зоны РФ.

2.2.3.3.3. Разработка системы дифференциальной диагностики бруцеллеза и иерсиниоза и мер по их профилактике.

3. Обсуждение результатов.

Выводы.