Свойства и механизмы регуляции НАД+киназы в онтогенезе Neurospora crassa Филиппович, Светлана Юрьевна

Краткое описание

Филиппович,СветланаЮрьевна.СвойстваимеханизмырегуляцииНАД+киназывонтогенезеNeurosporacrassa: диссертация ... кандидата биологических наук : 03.00.04. - Москва, 1985. - 171 с. : ил.больше
Цитаты из текста:

стр. 1
S/: f6^'S//ScZf-s~ АКАДЕМИЯ НАУК СССР ОРДЕНА ЛЕНИНА ИНСТИТУТ ШОХИМИИ и м . А.Н.БАХА На правах рукописиФИЛИППОВИЧСВЕТЛАНАЮРЬЕВНАУДК 577.152.27+577.151.64+579.243СВОЙСТВАИМЕХАНИЗМЫРЕГУЛЯЦИИНАД"*Т{ИНАЗЫ ВОНТОГЕНЕЗЕNEUROSPORACRASSA. (03,00,04 - биологическая химия) Д и с с е р т а ц и я на соискание

стр. 10
множественных форм НАЛ^киназыи.сгазза и дина­ мика их поведения вонтогенезегриба; - изучение участияНАД^киназыврегуляцииметаболизма ион­ тогенезаN.crassa, в частности:- рассмотрение динамики удельной активностиНАД"^киназыN.crassaпри фотостимуляции конидиогенеза и фотоиндукции каротиногенеза, выявление

стр. 59
отечественного производства. 60 РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУВДЕН'Ш Глава Ш.СВОЙСТВАНАД+КИНАЗЫNEUROSPORACRASSA. Ввиду того, чтоНАД^киназаN.crassaсовершенно не изуче­

Оглавление диссертациикандидат биологических наук Филиппович, Светлана Юрьевна
ввдашЕ.' s-ii
ГЛАВА I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ: ФШШТАТИВНЫЙ СИНТЕЗ
НАДФ+ И ПРОЦЕССЫ ДИФФЕРЕНЦИРОВКИ . 12
1.1. Роль никотинамидных коферментов в метаболизме клетки и их участие в процессах дифференцировки • . . 12
1.1.1. Функции HAjf и НАДФТ.12
1.1.2. HAJQj и НАДФ"^ как регуляторы активности ферментов .16
1.1.3. Соотношение НАД?" и НАДФ* в клетках и его связь с обменом веществ и дифференцировкой . 18
1.2. НДД^киназа и ее функции. 30
1.2.1. НАД^киназа и превращения никотинамидных коферментов . 30
1.2.2. Роль НАД*" киназы в дифференцировке и регуляции обмена веществ . 32
1.2.2.1. Участие HAjf киназы в процессах дифференцирозки 32
1.2.2.2. ШЦ£киназа и гормональный контроль . 37
1.2.2.3. Роль НАД?" киназы в адаптации.41
1.2.3. Возможные механизмы регуляции активности киназы.43
ТШк П. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ. 48
2.1. Объект исследования.
2.2. Условия культивирования.49
2.3. Получение бесклеточного экстракта
2.4. Обработка гомогенатов N.crassa. при определении внутриклеточной локализации HAjf киназы.50
2.5. Определение активности HAjf киназы.5Г
2.6. Определение концентрации белка
2.7. Энзим-электрофорез
2.8. Определение молекулярной массы HAjf киназы методом электрофореза в полиакриламидном геле
2.9. Определение молекулярной массы НАД!" киназы методом гельфильтрации .55
2.10. Аналитическое изоэлектрическое фокусирование HAjf-киназы на пластинах полиакриламидного геля.56
2.11. Препаративное изоэлектрическое фокусирование НАД!"-киназы в гранулированном геле - ультродексе .57
2.12. Реактивы.58
РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ.6Q-I
ГЛАВА Ш. СВОЙСТВА НАД^КИНАЗЫ WEUROSPORA CRASS А . 60
3.1. Внутриклеточная локализация НАД!"киназы N.crassa. 60
3.2. Оптимум рН и стабильность HAJJjкиназы N.crassa при различных рН .62
3.3. Зависимость активности НАД!"киназы N.crassa от природы фосфорильного донора и присутствия ионов металлов . 64
3.4. Влияние сульфгидрильных реагентов на активность киназы N.crassa .68
3.5. Влияние солей на НАД^киназную активность N.crassa.
3.6. Особенности поведения НАД!"киназы ПРИ хроматографии на голубой сефарозе . . 73
ГЛАВА 1У. ОЧИСТКА НАД!" КИНАЗЫ ИЗ КЛЕТОК N.CRASSA. . 81
4.1. Разработка подходов к очистке HAjfкиназы из N.crassa 81
4.2. Получение очищенного препарата НАД!" киназы из N. crassa.87
4.3. Кинетические характеристики очищенного препарата
НАД!"киназы N.crassa.9С^
ГЛАВА У. HAjfMHASA В РЕГУЛЯЦИИ МЕТАБОЛИЗМА И
ОНТОГЕНЕЗА N. GRASS А . . . . 94
5.1. Динамика удельной активности HAjf киназы в онтогенезе N. crassа .94
5.2. Регуляция активности BAif киназы N.crassa при фотостимуляции конидиогенеза и фотоиндукции каротиногенеза 100
5.3. Изменение удельной активности ШЦ£киназы в клетках N.crassa , помещенных в стрессовые условия . 105
5.4. К вопросу о кальмодулин-зависимой регуляции HAjf кинаЗЫ N.crassa .108-Ы
ГЛАВА У1. МНОЖЕСТВЕННЫЕ ФОРШ НАД^КИНАЗЫ N. GRASS А .II3-I
6.1. Обнаружение множественных форм НАД^киназы уи. crassa . • . .II3-II
6.2. божественные формы НАД^киназы как маркеры диффе-ренцировки У N.crassa . . II7-I
6.3. Изменение активности множественных форм HAjf киназы при фотостимуляции конидиогенеза N. crassa . . . • • 123