Трансформация 2,4,6-тринитротолуола молочнокислыми бактериями Суворова, Елена Степановна

Краткое описание

Суворова,ЕленаСтепановна.Трансформация2,4,6-тринитротолуоламолочнокислымибактериями: диссертация ... кандидата биологических наук : 03.00.04. - Пущино, 1999. - 94 с. : ил.больше
Цитаты из текста:

стр. 1
577.121.9+577.124.23+577.152.1СУВОРОВАЕЛЕНАСТЕПАНОВНАТРАНСФОРМАЦИЯ2,4,6-ТРИНИТРОТОЛУОЛАм о л о ч н о к и с л ы м иБАКТЕРИЯМИ03.00.04 - биохимия ДИССЕРТАЦИЯ на соискание

стр. 2
Введение 2. Обзор литературы 2.1. Восстановление арильных нитрогрупп 2.2. Основные пути микробного метаболизма Т Н Т 2.2.1.ТрансформацияТ Н Т в аэробных условиях 2.2.2.ТрансформацияТ Н Т в анаэробных условиях 2.3. Нитроредуктазы 2.3.1. Кислород-нечувствительные нитроредуктазы 2.3.2. Кислород-чувствительные

стр. 35
3.1. М и к р о о р г а н и з м ы и условия культивирования. В работе использовалимолочнокислыебактерии(МКБ), выделенные измолочнокислых(В S3601, BS3605,

Оглавление диссертациикандидат биологических наук Суворова, Елена Степановна
1. Введение
2. Обзор литературы
2.1. Восстановление арильных нитрогрупп
2.2. Основные пути микробного метаболизма ТНТ
2.2.1. Трансформация ТНТ в аэробных условиях
2.2.2. Трансформация ТНТ в анаэробных условиях
2.3. Нитроредуктазы
2.3.1. Кислород-нечувствительные нитроредуктазы
2.3.2. Кислород-чувствительные нитроредуктазы
2.4. Молекулярные основы токсичности нитроароматических соединений
2.4.1. Цитотоксичность нитроароматических соединений
2.4.2. Генотоксичность нитроарилов
3. Материалы и Методы
3.1. Микроорганизмы и условия культивирования.
3.2. Идентификацию молочнокислых бактерий.
3.3. НП-ПЦР Фингерпринтинг геномов и выделение тотальной ДНК лактобацилл
3.4. Проверка чувствительности штаммов к ТНТ
3.5. Эксперименты по трансформации ТНТ
3.5.1. Трансформация ТНТ клеточными суспензиями
3.5.2. Трансформация ТНТ суспензиями протопластов
3.5.3. Трансформация ТНТ клеточными экстрактами
3.6. Тест на восстановление мембранонепроницаемых акцепторов электронов
3.7. Определение ферментативных активностей
3.8. Очистка нитроредуктаз Ь./егтепШт В83601 32 3.8.1. Нитроредуктаза
3.8.2. Нитроредуктаза
3.9. Определение кинетических параметров нитроредуктаз
3.10. Определение молекулярного веса нитроредуктаз
3.11. Определение типа флавиновых кофакторов
3.12. Аналитические методы
3.12.1. НРЬС-анализ
3.12.2. ТЬС-анализ
3.12.3. Масс-спектрометрический анализ
3.12.4. !Н-ЯМР - анализ
3.12.5. Химический синтез стандартов: 2-АДНТ, 4-АДНТ и ГАДНТ
3.13. Определение концентрации белка
3.14. 808-РААС электрофорез
4. Обоснование выбора объекта исследования
5. Результаты
5.1.Выделение и идентификация лактобацилл, способных трансформировать ТНТ
5.1.1. Идентификация изолятов с использованием классических физиолого-биохимических тестов
5.1.2. Использование фингерпринтинга геномов для дифференциации изолятов лактобацилл
5.2. Метаболизм ТНТ, ксенобиотика из класса полинитроароматических соединений
5.2.1. Активность трансформации ТНТ и ингибирование роста лактобацилл, осуществляющих гомо- и гетероферментативное брожение
5.2.2. Идентификация основных продуктов трансформации ТНТ лактобациллами
5.2.3. Активность оксидоредуктаз молочнокислого брожения исследуемых штаммов лактобацилл
5.2.4. Нитроредуктазная активность клеточных экстрактов лактобацилл
5.2.5. Ингибирование активности ключевых дегидрогеназ лактобацилл под действием ТНТ и ГАДНТ
5.2.6. Локализация нитроредуктазной активности в клетках
Ь./егтепШт В83601 и Ь.р1агйагит В83604 53 5.3. Очистка и характеристика нитроредуктаз штамма Ь./егтепШт В
5.3.1. Выделение и очистка нитроредуктазы (НР1) из мембранной фракции
5.3.2. Очистка внутриклеточной нитроредуктазы (НР2) штамма
Ь. /егтеШитВ^
5.3.3. Анализ кофакторной специфичности НР1 и НР
5.3.4. Влияние температуры на активность и стабильность НР1 и НР
5.3.5. рН-зависимость активности НР1 и НР
5.3.6. Кинетические параметры НР1 и НР
5.3.7. Молекулярный вес и субъединичный состав НР1 и НР
5.3.8. Ингибиторы ферментативной активности нитроредуктаз штамма Ь. /егтепШт В
5.3.9. Определение спектра утилизуемых нитроароматических субстратов НР1 и НР
5.3.10. Интермедиаты и продукты реакций нитровосстановления, катализируемых нитроредуктазами НР1 и НР
6. Обсуждение результатов