Транспортная функция и ферментативные свойства мономерной мембраносвязанной формы Са2+ - АТФазы саркоплазматического ретикулума Щербакова, Наталья Сергеевна

Краткое описание

Щербакова,НатальяСергеевна.ТранспортнаяфункцияиферментативныесвойствамономерноймембраносвязаннойформыСа2+ -АТФазысаркоплазматическогоретикулума: диссертация ... кандидата биологических наук : 03.00.04. - Москва, 1984. - 181 с. : ил.больше
Цитаты из текста:

стр. 1
Биологический факультет На правах рукописиЩЕРБАКОВАНатальяСергеевнаУДК 577.153ТРАНСПОРТНАЯФУНКЦИЯИФЕРМЕНТАТИВНЫЕСВОЙСТВАМОНОМЕРНОЙМЕМБРАНОСВЯЗАННОЙФОРМЫСа2+-АТФазыСАРКОПЛАЗМАТИЧЕСКОГОРЕТИКУЛУи1А 03.00.04, - Биохимия Д и с с е р т а ц и я на соискание ученой степени кандидата биологических

стр. 4
'^•-АТШазы в реконструированных про теолипо сомах с различной концентрацией белка в мембране У. ОБСУНДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ Глава I. ПолучениемономерноймембраносвязаннойформыСа^"*"-АТФазыГлава II.Исследованиеферментативныхсвойствмономер­ ноймембраносвязаннойформыСа "•АТФазы•ВЬЮОда СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

стр. 88
препарат протеолипосом, в котором АТФаза находится преимущественно вмономернойформе, Цель дальнейших исследований состояла в выяснении способно­ стимономернойформыАТФазыктранспортнойфункции, а также в проведении сравненияферментативныхсвойствагрегированной имо­ номернойформфермента. - 89

Оглавление диссертациикандидат биологических наук Щербакова, Наталья Сергеевна
Список сокрагцений
I. ВВЕДЕНИЕ б
II. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
Глава I. Структурная и функциональная характеристики мембран саркоплазматического ретикулума
Глава II. Механизм трансформации энергии гидролиза
АТФ в транспорт Са^+
Глава III. Реконструкция Са - насоса
Глава 1У. Структура молекулы АТФазы
Глава У. Структурная организация Са-зависимой АТФазы в мембране. Предполагаемые модели Са- насоса
III. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
111.1. Выделение фрагментов саркоплазматичеекого ретикулума из скелетных мышц кролика 54 2+
111.2. Выделение Са -зависимой АТФазы
111.3. Выделение фосфолипндов из мембран саркоплазматичеекого ретикулума
111.4. Электрофорез в полиакриламидном геле
111.5. Определение концентрации белка 57 III .6. Определение липидного фосфора
111.7. Электронный парамагнитный резонанс
111.8. Определение SH - групп белка
111.9. Определение АТФазной активности и Са - транспортирующей функции препаратов ретикулума и АТФазы
111.10.Получение протеолипосом с различной концентрацией Са^+- АТФазы в мембране
111.11. Обработка Са - АТФазы в реконструированных про-теолипосомах бифункциональным сшивающим реагентом
1,3-дифтор-4,6-динитробензолом
111.12. Обработка Са-АТФазы в реконструированных проте-олипосомах 5,5'-дитиобис-2-нитробензойной кислотой
111.13. Флуориметрическое определение Са -транспортирую щей функции с CI-тетрациклином
111.14. Измерение триптофановой флуоресценции Са-АТФазы в реконструированных протеолипосомах
111.15. Электронномикроскопические исследования мембранных препаратов Са -зависимой АТФазы
111.16. Получение липосом, нагруженных Са
111.17. Получение протеолипосом из делипидированной Са-АТФазы и различных фосфолипидов
111.18. Характеристика использованных реактивов
111.19. Статистическая обработка данных 65 1У. РЕЗУЛЬТАТЫ
Глава I. Характеристика препаратов мембран саркоплазматического ретикулума и Са-зависимой АТФазы
Глава II. Получение препарата мономерной мембраносвязанной формы Са-зависимой АТФазы
11.1. Получение протеолипосом с различной концентрацией белка в мембране
11.2. Зависимость термостабильности Са^+-АТФазы от ее концентрации в мембране
11.3. Исследование организации Са-АТФазы в мембранах реконструированных протеолипосом методом сшивающих реагентов
Глава III. Транспорт Ca ^ реконструированными протеолипосо
III Л. Использование флуоресценции CI-тетрациклина для оцентки концентрации ионов кальция внутри липосом и протеолипосом
111.2. Реконструкция Ga ^-транспортирующей функции протеолипосом
111.3. Зависимость транспортной функции Са - АТФазы в реконструированных протеолипосомах от соотношения липид: белок
Глава 1У. Исследование влияния разведения фосфолипидами на некоторые ферментативные свойства Са -АТФазы
1У.1. Измерение удельной активности Са-АТФазы
1У.2. Зависимость числа оборотов Са -АТФазы от ее концентрации в мембране 106 1У.З. Зависимость АТФазной активности от концентрации
М^АТФ2" III
IV.4. Зависимость АТФазной активности от концентрации ионов кальция ИЗ
Глава У. Температурозависимые структурные перестройки 2.
Са -АТФазы в реконструированных протеолипосомах с различной концентрацией белка в мембране
V. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
Глава I. Получение мономерной мембраносвязанной формы Са2+- АТФазы
Глава II.Исследование ферментативных свойств мономерной мембраносвязанной формы Са2+- АТФазы 143 ВЫВОДЫ 154 СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ